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三种方法联合检测尿液有形成分的比较和评价

2012-11-14王蕾

实验与检验医学 2012年1期
关键词:化学法尿沉渣分析仪

王蕾

(肥城矿业中心医院检验科,山东 肥城 271608)

目前应用于临床的尿液检测方法主要有尿沉渣镜检、干化学法和尿沉渣分析仪三种方法。尿液干化学分析仪由于检测速度较快、使用方便,可以对尿液标本进行筛选,提高了临床检验工作的效率,但可导致假阳性和假阴性结果。尿沉渣分析仪具有操作简单、灵敏度高、重复性好、标本不需离心等优点,可对镜检报告中的红细胞、白细胞、管型等进行计数,定量报告,有助于血尿、尿路感染病人的疗效监控[1-3],适用于大批量标本检测,尿液干化学分析仪与尿沉渣分析仪流水线已广泛应用于实验室。但传统的尿沉渣镜检仍然是检测尿中有形成分的金标准,然而该方法精密度较差,劳动强度大,在大中型医院难以对每个尿液标本进行镜检。为了探讨三种方法联合检测尿液有形成分的应用价值和影响因素,我们对640份我院住院及门诊病人的尿液标本,同时用三种方法联合检测,并对检测结果进行比较和评价,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 UF-50尿沉渣分析仪 (日本Sysmex公司生产)与配套试剂、液体质控(批号S0006);迪瑞H-500尿干化学分析仪及配套11项试纸、液体质控品(批号20100817);人工显微镜、离心机。

1.2 标本 随机收集我院2011年3月门诊及住院患者尿液标本640份,患者年龄4~81岁,男性标本396例,女性标本244例。

1.3 实验方法

1.3.1 标本采集方法 用洁净一次性尿杯嘱患者留取中段尿约30ml,混匀后分装三个试管,每管10ml,其中一管按仪器操作程序在UF-50上机测定,一管进行尿干化学测定,另一管离心后进行尿沉渣镜检,接收标本后2h内完成所有检测。

1.3.2 UF-50及H-500检测 对UF-50及H-500进行校准,每天检测前用质控品做室内质控且结果在控,UF-50及H-500均按仪器说明严格操作。

1.3.3 显微镜检测 取刻度离心管,倒入混合均匀的新鲜尿液 10ml,用 1500r/min转速,离心 5min,弃去上清液,留下0.2ml沉渣,轻摇离心管,使尿沉渣有形成份充分混匀。取尿沉渣0.02ml,滴在载玻片上,用18mm×18mm盖玻片覆盖。首先用低倍镜观察尿沉渣分布情况后,再转高倍镜计数10个视野所见细胞数目[4]。

1.4 结果判断 三种方法都按各自的说明书或SOP文件进行操作,尿沉渣镜检结果参考值范围[4-5]:WBC:0~5 个/HP,RBC:0~3 个/HP,CAST:<0/LP,超出参考值上限为阳性;UF-50尿沉渣结果判定:RBC:男性为 0~10/μl,女性为 0~20/μl;白细胞:男性为 0~12/μl,女性为 0~22/μl,CAST:男性为0~0.9 个/μl;女性 0~0.7/μl,检查结果以超出参考值上限为阳性。

1.5 统计学方法 数据资料利用SPSS 17.0统计软件进行处理,三种方法间结果的比较用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

640 例尿标本三种方法检测WBC、RBC阳性率结果见表1。以尿沉渣镜检结果为标准,干化学与尿沉渣镜检之间RBC和WBC结果比较见表2。UF-50尿液WBC、RBC、CAST结果与尿沉渣镜检结果比较见表3。干化学法、UF-50检测尿液WBC、RBC的阳性率与尿沉渣镜检阳性率比较,结果差异有统计学意义(P<0.01)。UF-50检测结果阳性率分别与尿沉渣镜检结果比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。以干化学检测结果中白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐四项全阴性为过筛标准[5],对640例尿标本进行筛选,符合此标准的标本共316份,其中UF-50分析WBC阳性25份 (阳性率7.91%),RBC 阳性 24 例(阳性率 7.59%);尿沉渣镜检WBC阳性21例(阳性率6.65%),RBC阳性9例(阳性率 2.85%)。

表2 干化学法与尿沉渣镜检法WBC和RBC结果比较

表3 UF-50与尿沉渣镜检法WBC、RBC和CAST结果比较

3 讨论

UF-50采用流式荧光技术,具有检测速度快、重复性好等优点,但在临床使用中仍然会出现检测结果与尿沉渣镜检以及干化学不一致的情况[6-7]。干化学法是自动判定尿液中不同成分的定性或半定量结果的一种检测方法,具有快速、简便、准确的优点,但此法在测定尿液过程中,易受温度、酸碱度、药物、理化等外界因素的干扰,出现假阳性和假阴性,有一定局限性[8-10]。尿沉渣镜检虽操作繁琐,但标准化的尿沉渣镜检仍是尿沉渣分析的金标准,是尿液分析中不可缺少的检查手段,具有重要的临床价值[8]。640例尿液标本中,WBC阳性率以UF-50最高 (24.38%),干化学法最低(15.31%);干化学检测WBC的敏感性较低,有39.55%的假阴性,这是由于干化学试纸只能检测胞浆中含有白细胞酯酶的粒细胞,而不能测定部分缺乏酯酶的中性粒细胞、全部的淋巴细胞及大部分单核细胞。另外尿液中如含有大量先锋霉素IV、庆大霉素或尿蛋白>5g/L时,可导致结果偏低或假阴性[5,11]。因此,对于某些以尿中出现淋巴细胞为主的疾病(如肾结核、器官移植后等),如果单纯进行尿液干化学检测,就会出现漏诊[12]。UF-50和尿沉渣镜检法检测的是全部WBC,故其阳性率高

表1640例尿标本三种方式检测RBC和WBC阳性率项目例数常规镜检法干化学法UF-50法阳性阳性率阳性阳性率阳性阳性率WBC RBC 640 640 134 123 20.94 19.22 98 217 15.31 33.90 156 188 24.38 29.38于干化学法。干化学法过筛四项全阴的316份尿液标本中,UF-50检测WBC阳性的27例,尿沉渣镜检WBC阳性的21例,UF-50 WBC阳性符合率为91.04%,假阳性为8.96%。检测发现尿中盐类结晶的析出、裸核、上皮细胞、精子、滴虫等均可导致UF-50检测WBC出现假阳性。三种方法联合检测尿液,UF-50可以防止干化学法检测WBC的假阴性产生,尿沉渣镜检可排除UF-50的假阳性及假阴性产生。

640例尿液标本中,RBC以干化学法阳性率最高(33.90%),尿沉渣镜检法最低(19.22%)。干化学法检测尿中RBC是利用氧化酶法测定尿中的血红蛋白,RBC破碎后仍能测出,且灵敏度较高。但该法易受尿中氧化型或还原型物质(如维生素C)的影响导致假阳性或假阴性。表2中,干化学法测RBC假阳性19.92%,其中部分是红细胞完全破碎后尿沉渣镜检的假阴性标本。UF-50与尿沉渣镜检法相比有15.47%的假阳性,这80例假阳性标本,通过镜检发现有28份尿液有大量草酸钙结晶,有12份尿液含有大量细菌,33份标本中含有类酵母菌,占假阳性标本的91.25%。UF-50产生假阳性的原因可能是上述标本中含有的这些颗粒与红细胞形态相似,其染色的敏感性及散射光强度与红细胞类似,在散点图中与RBC交叉分布,干扰UF-50红细胞计数而将其误认为红细胞[7]。三种方法联合检测尿液标本时,干化学法可以弥补尿沉渣镜检法和UF-50检测不到的破碎红细胞的不足,尿沉渣镜检法可以排除UF-50对尿中结晶、类酵母菌等引起的假阳性干扰,UF-50还可以通过检测尿液中的RBC的变异性和均一性来鉴别血尿来源,有助于临床了解泌尿系统出血部位[1,2,5]。

尿液中有形成分复杂,形态变化较大,管型与上皮细胞及黏液丝的形态大小,染色性有许多相似之处,当尿标本中含有大量上皮细胞,又同时含有非晶型盐类、细菌等微粒附着时,仪器会将这些物质判定为管型的内容物而出现假阳性,从而造成相对较高的病理管型,出现假阳性结果。在实际工作中,当UF-50尿沉渣分析仪检出管型,尤其提示病理管型时,应与干化学结果进行综合分析并做尿沉渣镜检进行复核,减少仪器检查带来的误差。

综上所述,尿液干化学法和尿沉渣分析仪检测只能作为尿液有形成分检测的过筛试验,对于干化学和UF-50两者结果不符合及一些特殊标本务必进行尿沉渣镜检复查,以保证检验结果的可靠性[13-14]。在尿干化学、尿沉渣分析仪法结果均为阴性时,方可免去尿沉渣镜检[15]。建议各实验室根据自己的尿液分析系统建立室内质控程序和适合本检测系统的尿沉渣复检规则,只有将三种方法有机结合,互为补充,才能提高检验质量,保证检验结果的准确性。

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