梯度渗漉法提取丹参有效成分的工艺

刘少文

（广东省佛山市中医院，广东 佛山 528000）

丹参为唇形科中药丹参的根及根茎，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之等功效。文献报道[1,2]，脂溶性的丹参酮类成分，水溶性的丹参酚酸类成分为其主要有效化学成分。中药丹参广泛的应用于现有中成药处方中，但是在工艺上仅仅将丹参酚酸类成分或丹参酮类成分单一的进行提取，作为治疗疾病中的有效成分，从而造成中药丹参的浪费。因此，我们通过丹参有效成分的性质[3]，对丹参的提取方式进行了系统的研究，为找出同时提取丹参中丹参酮类成分和丹参酚酸类成分的简便方法，将中药丹参进行充分合理的利用，更为丹参有效成分最大限度的进行提取提供一种实验参考，现将实验研究结果报道如下。

1 仪器与试药

1.1 实验仪器

仪器Sartorius BP211-D型电子天平（美国梅特勒公司）；UVVIS8500紫外可见分光光度仪（安捷伦）；BUG25-12型超声波清洗机。

1.2 试药的选择

丹参药材 （产于四川，购自广州清平中药材市场）；丹参酮IIA标准品（购于中国药品生物制品检定所，生产批号：20110214）、丹酚酸B标准品（购于中国药品生物制品检定所，生产批号：20110112），乙醇由我院自制（无水乙醇与蒸馏水进行配比，分别配成浓度为50%、65%、95%的乙醇溶液）。

2 方法与结果

2.1 丹参提取工艺的比较

脂溶性和水溶性两类成分是丹参中的主要成分，其中我院通过丹参酮IIA、丹酚酸B的含量指标作为对回流法、一般渗漉法、梯度渗漉法的浸提物进行含量的测定，提取步骤见如下操作。

2.1.1 中等浓度乙醇回流法

采用天平称取丹参颗粒约50g，采用10倍量的65.0%乙醇进行回流提取，提取时间为1.5h，共提取2次，将提取液合并后定容，分别测定丹参酮IIA和丹酚酸B的含量。

2.1.2 一般渗漉法[4]

采用天平称取丹参粗粉约50g，采用10倍的65%乙醇浸泡过夜后进行渗漉，渗漉的流速为2.5mL/min，将渗漉液定容后，测定丹参酮IIA和丹酚酸B含量。

2.1.3 梯度渗漉法

天平称取丹参粗粉约50g，装入渗漉提取装置中，采用95%的乙醇浸泡过夜后开始进行渗漉，收集药材量约10倍的渗漉液，后采用浓度为50%的乙醇溶液进行第2次的渗漉，收集药材量10倍量的渗漉液，收集95%乙醇渗漉液测定丹参酮IIA的含量，50%的乙醇渗漉液测定丹酚酸B的含量。

2.1.4 比较结果

梯度渗漉法所得浸提物中丹参酮IIA和丹酚酸B含量均高于其他法，且操作简便，冷提取使有效成分不被破坏，稳定性好，故认为梯度渗漉法是同时提取丹参中脂溶性成分和水溶性成分较好的方法。

2.2 丹参梯度渗漉法提取工艺考察

2.2.1 取丹参药材粗粉约50g，分别称取3份，分别用95%、85%、75%的乙醇5mL溶胀1h后装筒，用提取溶媒50mL浸渍24h后，各用12倍量不同浓度的乙醇开始渗漉，渗漉速度为2mL /min，收集渗漉液，定容，测定丹参酮含量及干膏收率。

2.2.2 取丹参药材粗粉约50g，分别称取3份，分别用低浓度60%、50%、40%的乙醇5mL溶胀1h后装筒，用提取溶媒50mL浸渍24h后，各用12倍量不同浓度的乙醇开始渗漉，渗漉速度为2mL/min，收集渗漉液，定容，测定丹酚酸B含量及干膏收率，

2.2.3 上述不同浓度梯度渗漉结果表明，采用95%的乙醇渗滤提取丹参酮类成分的含量，提取率较高，固体物的收率较低，因此选用95%的乙醇进行渗漉；而采用50%的乙醇渗滤提取丹酚酸B的含量，提取率较高，纯度相差不大，因此选择50%的乙醇进行低浓度的渗漉。

2.3 正交实验设计

以丹参酮IIA的含量已经干膏的收率作为实验设计的指标，考察不同的渗漉溶剂的量、溶胀的时间和渗漉速度对提取后有效成分质量的影响，结果见表1、表2。

表1 丹参中脂溶性有效成分提取工艺因素水平表

表2 正交实验结果

由表1、表2确定最佳的醇提工艺条件为：A2B3C3，丹参药材粗粉，溶胀时间为120min，采用10倍的乙醇量进行渗漉，流速为4.0mL/min。

3 小 结

通过采用梯度渗漉的方法可以将丹参中脂溶性和水溶性的成分分别提取出来，经过梯度提取的有效成分的效率较高，同时提取工艺相对简单[5,6]，简化了纯化精制流程，提取的过程不用经过加热等操作环节，从而使丹参中的有效成分不受破坏。

[1]胡小成,曹凤梅.丹参的药理、临床应用与制剂作用[J].中国新医药,2006,3(1):6-12.

[2]杜冠华,张均田.丹参水溶性有效成分-丹酚酸研究进展[J].基础医学与临床,2004,20(5):394-398.

[3]刘绍华,唐献兰,杨卫豪,等.渗漉法提取两面针活性成分工艺的研究[J].中草药,2006,37(3):373-375.

[4]骞红玉,吴劲松.当归渗漉提取工艺的研究[J].湖南中医杂志,2008,24(3):94-96.

[5]张涛,赵正保.渗漉法提取祖师麻中瑞香素的工艺研究[J].中国药物与临床,2008,8(4):331-333.

[6]李承珠,李晓红,董作仁,等.丹参抗凝作用的研究[J].中西医结合杂志,2001,3(2):297.