贝克曼VCS技术和细胞形态学技术对正常WBC分类之比较
2012-11-08高旭红
高旭红
(广东医学院附属南山医院,广东 深圳 518052)
目前,全自动五分类血细胞分析仪在我院已开始应用,为了能更准确地了解、认识和使用全自动五分类血细胞分析仪,故将其VCS分类技术和外周血片血细胞形态学技术进行比较,评估两种分类技术对正常WBC有无显著性差异。
1 资料与方法
1.1 一般资料
100例健康体检人群,均为我院2010年1~3月份体检者,其中男性62例,女性38例,年龄22~61岁。
1.2 仪器与试剂
BECKMAN COULTER Hmx 全自动五分类血细胞分析仪。OLYMPUSCH2显微镜,溶血素、分类包、清洗液、稀释液等试剂均由贝克曼库尔特实验系统有限公司提供。
1.3 方法
采集100例检测对象静脉血3ml。经EDTA-K2抗凝,利用BECKMAN COULTER Hmx 全自动五分类血细胞分析仪对100例各自进行5次重复测定,分别求算出100例的各自成熟中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)、单核细胞(M)、嗜酸性粒细胞(E)、嗜碱性粒细胞(B)、百分比值的平均值(Nc、1c、Mc、Ec、Bc):标准差值(SDNC、SDLC、SDMC、SDEC、SDBC)和变异百分数(CVNC、CVLC、CVMC、CVEC、CVBC)。再用100例抗凝血各自制成五张外周血片,经染色后,油镜下分类500个,分别求出100例各自的成熟中性粒细胞(N)淋巴细胞(L)单核细胞(M)嗜酸性粒细胞(E)嗜碱性粒细胞(B)百分比值的平均值(N、L、M、E、B),标准差值(SDN、SDL、SDM、SDE、SDB)百分变异数(CVN、CVL、CVM、CVE、CVB)。
1.4 统计学处理
通过BECKMAN COULTER Hmx全自动五分类血细胞分析仪VCS技术与外周血血细胞形态学对100例正常WBC分类后,对两种技术分类出的5类百分比以(C±S)-(±s)表示,采用t检验以P>0.05为无显著性差异,具有可比性。
2 结 果
经BECKMAN COULTER Hmx全自动五分类血细胞分析仪VCS技术对100例正常WBC各自5次重复分类每例CVNC均<2%、CVLC均<3.4%、CVMC均<5%。结果均可接受CVEC和CVBC>10%,经外周血片细胞形态学技术对100例正常WBC各自5次重复分类,每例CVN均<3.7%、CVL<3.65%、CVM<5%,结果均可接受,CVE和CVB均>10%。鉴于嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞在WBC分类中所占百分比及小,百分变异数不可接受,故只对中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞进行比较。VCS技术和细胞形态学技术对100例正常WBC分类比较见表1。
由表1可见,经两种技术对100例正常WBC进行比较,其中性粒细胞(N)无显著性差异(P>0.05),淋巴细胞(L)无显著性差异(P>0.05),单核细胞(M)无显著性差异(P>0.05)。
3 讨 论
全自动五分类血细胞分析仪VCS技术的检测原理:
3.1 应用电阻抗原理测量细胞体积(V)技术,应用电导性(C)技术。检测原理是:根据细胞壁能产生高频电流的性能,采用高频电磁探针,测量细胞内部结构,即以细胞核和细胞质的比例、细胞内颗粒的大小和密度,来辨别体积相同、但性质不同的两个细胞群体,但当高频电流检测时,可根据两种细胞的核浆比例不同而呈现不同检测信号进行区分。
表1 VCS技术与细胞形态学技术对正常WBC分类比较
3.2 应用光散射(S)技术。原理是:来自激光源的单色光直接扫描进入计数敏感区的每一个细胞,根据细胞产生的不同角度的散射光,可提供细胞形态、核结构等光散射信息,并能鉴别细胞颗粒的构型和质量:光散射可区别粒细胞的类型。而细胞形态学原理是对WBC胞膜、胞浆、胞核的结构及组成成分进行组化染色后在显微镜下进行分类,由于正常白细胞的理化性质及细胞结构等大致相似。因而两种技术对正常WBC的中性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞分类无显著性差异,具有可比性。