产地和采收时间对栀子中栀子苷含量的影响△

朱琦，吴炳忠，沈晓霞

（1.浙江省中药研究所有限公司，浙江 杭州 310023；2.浙江大学医学院附属第二医院，浙江 杭州 310023）

产地和采收时间对栀子中栀子苷含量的影响△

朱琦1*，吴炳忠2，沈晓霞1

（1.浙江省中药研究所有限公司，浙江 杭州 310023；2.浙江大学医学院附属第二医院，浙江 杭州 310023）

目的：考察不同产地和采收时间对栀子中栀子苷含量的影响。方法：采用高效液相色谱法测定不同产地、不同采集时间栀子中栀子苷含量。色谱柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相：乙腈－水（15∶85），流速：1.0mL·min－1，柱温：30℃，波长：238nm。结果：各产区同一时间采集的栀子中栀子苷含量从高到低排列：安吉＞缙云东渡＞丽水莲都＞温州泰顺＞淳安枫树岭。收集样品中栀子苷含量在9月中旬刚结果时最高。

栀子；高效液相色谱法；栀子苷；含量

栀子Gardenia jasminoidesEllis为茜草科常绿灌木，以成熟果实入药，又称山栀、生山栀子，属常用中药，在我国临床应用已有1 600多年历史。《中国药典》2010版规定栀子药材的含量测定成分为栀子苷［1］。《中国药典》规定栀子的采收时间是9～11月果实成熟呈黄色时，但产地调查发现9月大部分栀子均刚刚结果，栀子为青色果实，10月大部分为青色果实，小部分为半红半青果实，11、12月为全红成熟果实；栀子产区栀子采摘期均在11月左右。本文对不同产地、对《中国药典》规定的不同采收期的栀子进行了栀子苷含量的测定，综合研究两种因素对栀子苷含量的影响，为栀子确定适宜采收时间提供了理论依据。

1 仪器与材料

Agilent 1100高效液相色谱仪，Senco R-501旋转蒸发仪，KQ-100DB数控超声波清洗器，DHG-9140电热恒温鼓风干燥箱，AB 204-S电子天平；乙腈（色谱纯）、甲醇（分析纯）、栀子苷对照品（含量测定用，中国食品药品检定研究院，批号：110749-200613）；无水乙醇（分析纯），95%乙醇（分析纯）。

实验用的栀子干燥成熟果实采于安吉、缙云东渡、丽水莲都、温州泰顺、淳安枫树岭，经浙江省中药研究所俞旭平教授鉴定为栀子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果实。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液制备

2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，即得。

2.1.2 供试品溶液的制备 收集各产地不同时间新鲜栀子各1kg，切片烘干后，各取100 g粉碎备用。

取药材粉末（过四号筛）约0.1 g精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理20 min，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取滤液10mL，置25mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.2 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18键合硅胶柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相：乙腈 －水（15∶85），流速：1.0mL·min－1，柱温：30℃，检测波长：238nm。

2.3 绘制栀子苷标准曲线

精密称取栀子苷对照品12 mg，用甲醇（色谱纯）定容于100mL容量瓶中，即得120μg·mL－1得栀子苷对照品溶液，栀子苷对照品色谱图见图1。栀子苷在20～120μg峰面积A与其质量M呈现良好的线性关系，其回归方程为：A＝312.2M＋17.95，r＝0.999 4，n＝6。

图1 栀子苷对照品图谱

2.4 精密度试验

精密吸取栀子苷对照品溶液（40μg·mL－1）10μL，连续进样5次，测定峰面积，结果RSD＝1.62%，表明该方法测定栀子苷，仪器精密度符合要求。

2.5 稳定性试验

精密吸取刚配好栀子苷对照品溶液1.5mL，24 h内不定期测定其峰面积，结果 RSD＝1.20%（n＝7），表明栀子苷用该方法在该仪器24 h内测定结果较稳定，符合要求。

精密吸取上述栀子苷对照品溶液10μL，每隔一定时间段测定两次，其积分面积RSD＝2.81%（n＝3），表明栀子苷用该方法在该仪器2009-09-01～2010-05-31测定结果较稳定，符合要求。

2.6 重复性试验

取缙云东渡同一批栀子药材，分别制备6份供试品溶液，在上述色谱条件下分别进样10μL，测得栀子苷平均含量为4.71%，RSD＝2.1%，结果表明方法重复性较好。

2.7 回收率试验

精密称定已知含量的缙云东渡栀子药材粉末6份，每份0.05 g，再分别精密加入浓度为0.235 5 mg·mL－1的对照品10mL，之后分别精密加入15mL的50%甲醇。按2.1.2项下方法制备供试品溶液，取10μL在上述色谱条件下测定栀子苷的含量，结果表明该方法的回收率良好，见表1。

表1 栀子苷加样回收率试验

2.8 不同产地及不同采集时间栀子中栀子苷含量测定

2.8.1 不同产地栀子药材的栀子苷含量测定 取2009年11月14日各地采集的样品，按上述条件测定栀子苷含量，结果见表2。按栀子药材中栀子苷含量从高到低排序，分别为安吉、缙云、丽水、温州泰顺、淳安枫树岭。

表2 同一采集时间不同产地栀子中栀子苷含量

2.8.2 成熟期栀子的不同采收时间药材的含量测定 结果见表3。2009年11月14日为首摘时间。由表3中可看出，成熟果实早期采摘的含量较高。

表3 不同采集时间栀子中栀子苷含量比较

2.8.3 不同成熟度栀子新鲜药材中栀子苷含量 结果见表4。可看出栀子苷含量在栀子刚结果时较高，栀子果实由青变红时和完全成熟时含量较低。随着成熟度提高含量逐渐降低。

表4 不同采集时间相同产地栀子（鲜）中栀子苷含量（2010年）／%

3 讨论

本实验对磐安枫树岭、临安於潜等地所采栀子，均采用50℃干燥8 h［2］进行干燥。并测定栀子苷折干率，其值均在32%～40%，干燥过程对栀子苷含量未产生影响。

经采集比较安吉、缙云东渡、丽水莲都、温州泰顺、淳安枫树岭等地采摘期的成熟栀子，晒干后栀子中栀子苷含量均达到了《中国药典》规定的1.8%的标准，证实其均为质量优良的栀子药材，其中尤以安吉产的栀子（干货）中栀子苷含量最高，为6.07%，在实验过程收集2010年样品（相同时间段不同产地的栀子）中，以9月中旬刚结果栀子中栀子苷含量最高。

本实验详细研究栀子苷在果实发育过程中的累积规律，可以为栀子的采收提供更加科学的依据。《中国药典》仅规定了栀子苷的含量作为有效成分的指标，本实验所采栀子中栀子苷的含量均符合《中国药典》规定。因此，在实际应用中若纯粹提取栀子苷，建议采摘栀子青果提取。

［1］国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2010：231.

［2］黄锐，唐灿，姚建，等.栀子果实干燥工艺优选研究［J］.中国实验方剂学杂志，2011，17（7）：37-39.

Influences of Different Origins and Collection Time on Content of Geniposide in Gardeniae Fructus

ZHU Qi1，SHEN Xiao-xia1WU Bing-zhong2
（1.Zhe Jiang Resrrch Institute Of Trrditiionrl Chinese Medicin Co.Ltd，Hangzhou 310023，China；2.Second Affiliated Hospital Zhejiang University School of Medicine，Hangzhou 310023，China）

Objective：Investigate the influence of different origins and collection time on content of geniposide in Gardeniae Fructus.Methods：HPLC was used to determine content of geniposide in Gardenia from different origins and different collection time.Diamonsil C18chromatographic column（250mm ×4.6mm，5μm）was used with themobile phase being acetonitrile-water（15∶85），the column temperature being 30℃，the flow rate being 1.0mL·min－1，the detection wavelength being 238nm.Results：Geniposide contents in Gardeniae Fructus from each region at the same collection time from high to low were Anji，DongDu（JinYun），LianDu（LiShui），TaiShun（WenZhou），XiaoHeShan），FengShuLing.The highest content of Geniposide in Gardeniae Fructus was in themiddle of September when it is just bear fruit.

Gardenia；HPLC；Gardeniae Fructus；Content

浙江省重大科技专项（2009C12091）

* ［通讯作者］朱琦，Tel：（0571）85229698，E-mail：zhuqiqi1985＠yahoo.com.cn

2011-08-30）