高效液相色谱法测定定喘止咳胶囊中盐酸麻黄碱含量

2012-11-06张亚锋王苑桃

中国药业 2012年17期

魏萍，张亚锋，王苑桃

(陕西省西安市食品药品检验所，陕西西安 710054)

定喘止咳胶囊是由麻黄、杏仁等多味中药制成的复方成药，具有宣肺平喘、理气止咳的功能，用于风寒喘咳、胸腹胀满，亦可用于支气管哮喘、支气管炎。原质量标准采用薄层扫描法测定方中麻黄碱的含量，但该方法精度较差，误差较大。笔者参考相关文献[1-4]，采用高效液相色谱法测定定喘止咳胶囊中的盐酸麻黄碱含量，专属性强，且方法简便、快速、准确、可靠。现报道如下。

1 仪器与试药

岛津LC-10AVP型高效液相色谱仪，SPD-10Avp可见紫外检测器，N2000色谱工作站;KQ-300DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号为1241-200102);定喘止咳胶囊(陕西方舟制药有限公司，批号为100501，100701，101001，规格为每粒装0.4 g);乙腈为色谱纯，水为重蒸馏去离子水，其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:瑞典 Kromasil C18柱(250 mm×4 mm，5μm);流动相:0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺，用磷酸调pH至2.7)-乙腈(96∶4);流速:1.0 mL/min;柱温:室温;检测波长:207 nm;进样量:10μL。理论塔板数按盐酸麻黄碱计应不低于3 500。在此条件下，盐酸麻黄碱与其他成分达到良好分离，阴性对照无干扰(图1)。

2.2 溶液制备

精密称取盐酸麻黄碱对照品8.05 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液(每1 mL中含盐酸麻黄碱0.322 mg);精密吸取贮备液1 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液(每1 mL含0.032 2 mg)。取本品内容物，研细，取约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加碱性甲醇(5 mL浓氨加入100 mL甲醇)溶液30 mL，浸泡30 min，超声(功率250 kW，频率40 Hz)处理15 min，离心，取上清液，药渣按上述方法重复操作3次，合并上清液，低温蒸干(50℃以下)，残渣加饱和氯化钠溶液30 mL溶解，用浓氨试液调pH至9，用乙醚提取5次，每次30 mL，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密吸取2 mL至10 mL量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，滤过，即得供试品溶液。

2.3 方法学考察

干扰性试验:按处方比例和工艺制备阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。按2.1项下色谱条件，分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各 10μL，注入高效液相色谱仪，结果见图1。供试品溶液色谱中，盐酸麻黄碱与其他色谱峰分离较好，阴性对照品溶液色谱在盐酸麻黄碱的保留时间范围内无干扰峰出现，表明处方中其他药味对测定无干扰。

线性关系考察:取盐酸麻黄碱对照品贮备液适量，分别配制成质量浓度为0.007 728，0.012 88，0.025 76，0.038 64，0.051 52，0.077 28 g/L 的对照品溶液，各吸取10μL，按2.1项下色谱条件，注入高效液相色谱仪进行测定。以峰面积为纵坐标(Y)、对照品进样质量浓度为横坐标(X)绘制标准曲线，得回归方程为 Y=1 999 298.4X-550.9，r=0.999 9(n=6)。结果表明，盐酸麻黄碱质量浓度在0.007728～0.07728g/L范围内与峰面积值有良好的线性关系。