GC测定香桂活血膏中薄荷脑含量

胡端龙，姜丽珍，赵华良，奚静芳，张国明

(上海市中药研究所，上海 201401)

GC测定香桂活血膏中薄荷脑含量

胡端龙，姜丽珍，赵华良，奚静芳，张国明*

(上海市中药研究所，上海 201401)

目的建立外用中成药香桂活血膏的含量测定方法。方法应用气相色谱法，测定香桂活血膏中薄荷脑的含量。结果以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标作标准曲线，结果显示薄荷脑在0.107 8～2.155 0 μg内，峰面积与薄荷脑进样量呈良好线性关系。3批香桂活血膏薄荷脑含量分别为26.0，24.7，25.9 mg/片。结论该方法简便、准确快速、重现性好，可有效控制香桂活血膏的质量。

香桂活血膏；薄荷脑；含量测定；气相色谱法

香桂活血膏是由大黄、木香、檀香、丁香、桂皮油、薄荷脑等23味药材提取制成的橡胶膏剂，具有祛风散寒，活血止痛的功效，用于跌打损伤，风湿性关节痛等[1]。现行香桂活血膏的质量标准收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂》第四册，但无含量测定项。本文根据香桂活血膏的制备工艺，也参考了部分文献资料[2]，建立了气相色谱法测定薄荷脑含量的方法，经初步的实验考核，本品中薄荷脑含量测定方法稳定、可行，适用于香桂活血膏质量控制。

1 仪器与试药

Agilent 6890N气相色谱仪，FID检测器。薄荷脑对照品(批号：0728-200005,中国食品药品检定研究院，供含量测定)；样品：香桂活血膏(上海雷允上药业有限公司，批号：100201，100202，100203)；乙醇为分析纯，水为高纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Agilent HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm)；柱温为100 ℃；进样体积1 μL。理论板数以薄荷脑峰计算应不低于10 000。

2.2 相关试样的配制

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取薄荷脑对照品适量，加乙醇溶解，制成每1 mL含薄荷脑0.5 mg的溶液作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品1片(每片规格为7 cm×10 cm)，剪成小条，除去盖衬，置锥形瓶中，精密加入乙醇50 mL，精密称定，超声45 min，放冷，精密称定，用乙醇补足失重，0.45 μm滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性对照品溶液的制备 按工艺处方，制备不含薄荷脑的阴性样品，然后按2.2.2项下方法制成阴性对照溶液。

2.3 专属性试验

照2.1色谱条件，取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各1 μL，分别注入气相色谱仪。结果显示，在薄荷脑对照品色谱相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，且与其他成分的色谱峰分离良好。而阴性液在薄荷脑保留时间处无色谱峰，不存在干扰，见图1～3。

图1 薄荷脑对照品溶液GC图

图2 香桂活血膏供试品溶液GC图

图3 缺薄荷的阴性样品溶液GC图

2.4 线性关系的考察

取薄荷脑制成每1 mL含薄荷脑0.107 8,0.215 5,0.538 8,1.075 5,2.155 0 mg的溶液作为对照品溶液，分别精密吸取上述溶液1 μL，注入气相色谱仪，以峰面积为纵坐标，进样质量为横坐标作标准曲线，线性方程为Y=1 320.6X-6.533 4，r=0.999 8，结果表明薄荷脑在0.107 8～2.155 0μg峰面积与薄荷脑含量线性关系良好。

2.5 精密度试验

精密吸取浓度为0.538 8 mg·mL-1的薄荷脑对照品溶液1 μL，按2.1色谱条件，重复测定6次，记录峰面积，其RSD=0.57%(n=6)，结果表明本试验精密度良好。

2.6 稳定性试验

取批号为100201的样品，按2.2.2制备供试品溶液，以2.1色谱条件，于0,2,4,6,8 h进样分析，记录峰面积。结果RSD=0.62%(n=5)，表明供试品溶液中含有的薄荷脑在8 h内含量稳定。

2.7 重复性试验

取批号为100201的样品，一式6份，制备方法参考2.2.2，按上述色谱条件测定含量，含量的RSD=0.68%(n=6)，表明该方法具有较好的重复性。

2.8 回收率试验

取批号为100201的样品适量，一试9份，取半片，精密称定，加入一定量的薄荷脑对照品，按2.2.2方法制备，按2.1色谱条件注入气相色谱仪测定,结果表明该方法提取较完全，准确度高，见表1。

2.9样品含量测定

取100201、100202、100203 3批样品，按2.2.2项下方法制备供试品溶液，精密吸取对照品溶液1 μL，供试品溶液1 μL,注入气相色谱仪测定。结果薄荷脑含量分别为26.0，24.7，25.9 mg/片。

表1 薄荷脑加样回收率试验

3 讨论

《中国药典》2010年版一部中薄荷脑(单体原料)项下的GC含测柱温是120 ℃，若以此条件检测香桂活血膏中的薄荷脑成分，其分离度达不到要求，而柱温降至100 ℃时，GC色谱分离度明显改善，故对《中国药典》方法作了部分改进。

本文对样品处理中的提取溶媒作过比较，结果是使用无水乙醇提取的方法明显优于乙酸乙酯，乙酸乙酯法所制得供试液GC图谱的基线明显不到位；对提取方法，比较了挥发油提取器和无水乙醇直接超声提取二者效果，结果是使用挥发油提取器所得供试品GC图谱分离效果不如超声提取。

在确定使用无水乙醇超声法基础上，以GC色谱中薄荷脑峰面积为指标，平行筛选乙醇用量(40～60 mL)和超声时间(30～60 min)，选出了本文的“50 mL无水乙醇超声45 min”的基本前处理方法。

[1] 卫生部.卫生部药品标准·中药成方制剂[S].第4册. 1991：127.

[2] 国家药典委员会 中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：395-396.

AssayofMentholinXiangguiHuoxuePlasterbyGC

HU Duan-long，JIANG Li-zhen，ZHAO Hua-liang，XI Jing-fang，ZHANG Guo-ming

(ShanghaiInstituteofChineseMateriaMedica，Shanghai201401)

To establish a GC method determinate ι-menthol content in external-used TCM Xianggui Huoxue Plaster.A good linear relationshi Pwas at a range from 0.107 8 to 2.155 0 μg.The contents of ι-menthol in three batches were 26.0，24.7 and 25.9 mg per plaster respectively.The method was simple，quick and repeatable，could be used for quality control of the plaster.

Xianggui Huoxue Plaster；Menthol；Assay；Gas Chromatography

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张国明，Tel：(021)37565589-127，E-mail：zhangguoming1271@yahoo.com.cn

2012-03-26)