采用自动煎药机制备橘红痰咳液的工艺及稳定性研究

徐水琴

(北京航天中心医院 中药房,北京 100049)

中药工业

采用自动煎药机制备橘红痰咳液的工艺及稳定性研究

徐水琴

(北京航天中心医院 中药房,北京 100049)

目的研究自动煎药机制备橘红痰咳液的最佳煎药工艺及稳定性。方法选定影响煎药的3个主要因素，通过正交试验确定最佳煎药工艺；采用HPLC法测定不同贮存方法和贮存时间橘红痰咳液中苦杏仁苷和柚皮苷的含量及其卫生学检测指标。结果橘红痰咳液在所测定的7周内，药液微生物含量符合《中国药典》2010版中关于合剂的微生物限度要求；苦杏仁苷和柚皮苷在7周内含量比较稳定。结论煎药机制备橘红痰咳液最佳煎煮工艺为浸泡40 min，100 ℃煎40 min；橘红痰咳液在常温和冰箱能保存4周。

中药煎药机；橘红痰咳；苦杏仁苷；柚皮苷；高效液相色谱法；微生物

自从韩国研制了第一台自动煎药机后，中药煎药机在各大医院和零售药店被广泛使用。煎药机与传统煎药方法相比具有方便、快捷、卫生、耐储存等优点。但是自动煎药机的煎药工艺和质量考察却鲜有报道，对其保存时间的研究也未见报道。为此，我们选择橘红痰咳液对自动煎药机的制备工艺、质量标准和贮存期进行了系统研究，以期对自动煎药机的性能进行评价，为医院和药店的正确使用提供依据。

1 仪器与试药

1.1 高效液相色谱系统

LC-3A溶剂输送泵，SPD-10Avp紫外检测器，SIL-10ADvp自动进样器。BKL-3010色谱工作站。自动煎药机为韩国产东南DN-15型，包装机为东南DN-12型。

1.2 试药

柚皮苷对照品(批号：722-200107)、苦杏仁苷对照品(批号：110820-200403)，购自中国食品药品检定研究院。化橘红(北京四方中药饮片有限公司，批号：11063003，产地：浙江)。苦杏仁(北京鹤延龄中药饮片有限公司，批号：101043，产地：河北)。甲醇、乙腈和磷酸为分析纯，水为瓶装纯净水。

2 方法与结果

2.1 橘红痰咳液最佳煎药工艺研究

根据文献[1-3]，影响煎药效果的主要因素有：药材粉碎度、加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮温度等，本研究主要考察后3个因素对煎药的影响。根据L9(34)正交表进行正交试验。

表1 正交试验因素水平

2.1.1 苦杏仁苷煎煮工艺正交试验 正交试验结果见表2，方差分析见表3。

表2 苦杏仁苷煎煮工艺正交试验结果

表3 苦杏仁苷煎煮工艺方差分析表

注：n=2

表3正交试验方差分析表表明以上3个条件对苦杏仁苷含量差异无统计学意义。依据常规煎药方法,选定最佳煎煮工艺为浸泡40 min，100 ℃煎40 min。

2.1.2 柚皮苷正交试验 正交试验结果见表4，方差分析见表5。

表4 柚皮苷煎煮工艺正交试验结果

表5 柚皮苷煎煮工艺正交方差分析表

注：n=2

正交试验方差分析表验证以上3个因素对柚皮苷含量差异无统计学意义。综合以上实验数据，并按照常规煎药方法,最终确定煎煮工艺为：浸泡40 min，100 ℃煎40 min。

2.2 橘红痰咳液煎剂中苦杏仁苷和柚皮苷含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)柱。苦杏仁苷测定[4]：流动相为甲醇-水-磷酸(110∶390∶2.5)，检测波长为210 nm，进样20 μL，苦杏仁苷出峰时间比较合适(约为15 min)，分离度为1.7。

柚皮苷测定[5]：流动相为甲醇-乙腈-水-磷酸(75∶75∶350∶2.5)，检测波长为283 nm，进样5 μL,流速为1.0 mL·min-1，室温。柚皮苷出峰时间比较合适，约为19 min,分离度为1.8，在此条件下，苦杏仁苷不出峰。

2.2.2 对照品溶液的制备

2.2.2.1 苦杏仁苷对照品溶液制备 精密称取苦杏仁苷对照品1.87 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇适量超声振荡溶解，定容即得，浓度为0.187 mg·mL-1,色谱图见图1。

2.2.2.2 柚皮苷对照品溶液制备 精密称取柚皮苷对照品1.86 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇适量超声振荡溶解，定容即得，浓度为0.186 mg·mL-1,色谱图见图1。

A.苦杏仁苷 B.柚皮苷图1 苦杏仁苷和柚皮苷对照品HPLC图

2.2.3 供试品溶液的制备 精密量取供试品5 mL，上大孔树脂HPD-100小柱(1 cm内径)，用纯净水80 mL冲洗，继用95%乙醇50 mL淋洗，洗液水浴蒸干，残渣加甲醇适量，温热使溶解，转移至5 mL量瓶中，稀释至刻度，摇匀，上清液用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。供试品样品HPLC图见图2、3。

图2 供试品样品HPLC图(苦杏仁苷)

图3 供试品样品HPLC图(柚皮苷)

2.2.4 线性关系

2.2.4.1 苦杏仁苷标准曲线 精密吸取苦杏仁苷对照品溶液不同体积进样，测得峰面积，以峰面积和进样量计算回归方程Y=1.178 27×10-6X+1.908 35×10-3，r=0.999 7。结果表明苦杏仁苷在0.187～4.675 μg线性关系良好。

2.2.4.2 柚皮苷标准曲线 精密吸取柚皮苷对照品溶液不同体积进样，测得峰面积，以峰面积和进样量计算回归方程Y=6.589 51×10-7X+0.011 037 6,r=0.999 8。结果表明柚皮苷在0.186～5.58 μg线性关系良好。

2.2.5 精密度考察

2.2.5.1 苦杏仁苷 精密吸取同一对照品溶液进样6次，测定，计算RSD=1.25%。

2.2.5.2 柚皮苷 精密吸取同一对照品溶液进样6次，测定，计算RSD=0.88%。

2.2.6 稳定性考察

2.2.6.1 苦杏仁苷 取同一供试品溶液，分别在0，2，4，6，8 h各测定1次,计算RSD=3.03%,说明供试品在8 h内稳定。

2.2.6.2 柚皮苷 取同一供试品溶液，分别在0，2，4，6，8 h各测定1次，计算RSD=2.42%，说明供试品在8 h内稳定。

2.2.7 重复性试验

2.2.7.1 苦杏仁苷 取同一批号的供试品6份，按供试品溶液制备方法处理，制备供试品溶液，每份供试品溶液进样3针，测定峰面积，计算RSD=2.77%。说明重复性试验结果良好。

2.2.7.2 柚皮苷 取同一批号的供试品6份，按供试品溶液制备方法处理，制备供试品溶液，每份供试品溶液进样3针，测定峰面积，计算RSD=2.97%。说明重复性试验结果良好。

2.2.8 加样回收率试验

2.2.8.1 苦杏仁苷 取已知含量的药液，精密加入0.5，1，1.5倍量的苦杏仁苷对照品，按样品含量测定方法测定，每个浓度测3份，计算回收率及RSD，结果见表6。

2.2.8.2 柚皮苷 取已知含量的药液，精密加入0.5，1，1.5倍量的柚皮苷对照品，按样品含量测定方法测定，每个浓度测3份，计算回收率及RSD，结果见表6。

表6 回收率试验结果

2.2.9 不同放置时间样品的含量测定及微生物检测

2.2.9.1 饮片含量测定[6]精密称取苦杏仁粗粉1.317 3 g，置于具塞锥形瓶中，加100 mL甲醇，称重，超声30 min，放至室温，称重，补足分量，0.45 μm微孔滤膜滤过，进样10 μL。精密称取化橘红粗粒1.456 3 g，加60～90 ℃石油醚80 mL水浴回流2.5 h，挥尽石油醚，加甲醇回流提取3 h，移至100 mL容量瓶中，定容，0.45 μm微孔滤膜滤过，进样5 μL。

2.2.9.2 不同放置时间的样品含量测定及微生物检测 按照最佳煎药条件，一次煎煮20付药，一部分常温保存，一部分冰箱(-4 ℃)保存，一部分40 ℃、RH=75%保存。按照前面所示配制供试品，苦杏仁苷样品进样10 μL，柚皮苷样品进样5 μL。结果见表7。微生物含量测定照《中国药典》2010版一部附录ⅠJ合剂微生物限度检查法检查，都符合规定。

表7 不同放置时间的橘红痰咳液含量测定结果 /mg·g-1

注：标号1为常温保存，2为冰箱冷藏保存，3为加速保存(40 ℃，RH=75%)。

3 讨论

《中国药典》2010年版橘红痰咳液项下只有柚皮

苷含量测定，没有苦杏仁苷含量测定。苦杏仁苷含量虽然比较少，也是一个很重要的成分,并且苦杏仁苷有小毒。本试验建立了两个成分的含量测定方法，对完善橘红痰咳液的含量测定提供了一定的依据。

煎药机煎得的药液成分很复杂，杂质很多，需要经过预处理，比较了石油醚、乙酸乙酯萃取，大孔吸附树脂处理，最后确定最佳条件为大孔树脂HPD-100，95%乙醇处理效果最佳。

药液在设定的几个因素下,苦杏仁苷和柚皮苷含量差异并无统计学意义,可能是煎煮半小时以上,这两个成分已溶出完全。

药液放置两个月微生物检测仍然合格，说明药液的密封性能很好，但药液本身含有的抑菌成分是否在起作用需进一步研究。

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StudyonOptimizationProcessandStabilityofJuhongtankeDecoctionPreparedbyAutomaticChineseMaterialMedicaBoilingMachine

XU Shui-qin

(AerospaceCenterHospital,Beijing100039,China)

Objective:To study the optimal process and stability of Juhongtanke decoction prepared by automatic CMM(Chinese Material Medica) boiling machine.MethodsOrthogonal experimental method was used to sellect an optimal process from three factors. Amounts of animalcules and contents of amygdalin and naringin of Juhongtanke decoction were used as evaluation on storage way and time.ResultsAmounts of animalcules was accord with specified number in Chinese Pharmacopoeia.Contents of amygdalin and naringin are steady comparatively in 7 weeks.ConclusionThe optimal process of decoct Juhongtanke is soaking in water for 40 minutes, boiling for 40 minutes in 100 ℃; Juhongtanke decoction can be preserved for 7 weeks in friger or room temperature.

Automatic CMM (Chinese material medica) boiling machine;Juhongtanke; Amygdalin;Naringin; HPLC;Animalcule

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徐水琴,E-mail：lindaxu188@163.com

2011-11-19)