归龙筋骨宁片中士的宁的含量测定

2012-11-01张立凤

亚太传统医药 2012年2期

魏霞，张立凤，魏海

（1.四平巨能药业有限公司，吉林四平 136000；2.吉林益民堂制药有限公司，吉林四平 136001；3.四平妇婴医院，吉林四平 136000）

归龙筋骨宁片由穿山龙、当归、桃仁（炒）、桂枝、丹参、地枫皮、制草乌、乳香（炒）、苍术（炒）、川牛膝、威灵仙、甘草、千年健、红花、马钱子（制）等中药组成。具有祛风活血，舒筋止痛的作用，用于风寒湿痹，关节疼痛［1］。本研究以归龙筋骨宁片中马钱子的主要成分士的宁的含量为指标，探讨其质量标准的定量检测方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

岛津LC-2010高效液相色谱仪（紫外可见双波长检测器SPD-10AVP Plus）；BSZZ4S型电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；KDQX-260超声波清洗机（济宁科电检测仪器有限公司）。

1.2 试药

士的宁对照品，含量测定用，批号110721-200211，中国药品生物制品检定所提供；醋酸乙酯、乙腈，色谱纯，山东禹王实业有限公司禹城化工厂；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

按照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定［2］，色谱柱：Shim-pack柱，4.6mm×150mm；乙腈-水（11：89）含三乙胺0.01mol／L，用磷酸调pH 值至3为流动相；流速：1.0mL／min；检测波长260nm；理论板数按士的宁峰计算应不低于2500。分离度大于1.5。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备

精密称取士的宁对照品适量，加醋酸乙酯制成每1mL含0.05mg的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备

取本品重量差异项下的10片，除去糖衣，精密称定，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加氯仿25mL与浓氨试液1mL，密塞，轻轻振摇，称定重量，放置24h，称定重量，用氯仿补足减失的重量，振摇，精密量取续滤液10mL，置分液漏斗中，用硫酸溶液振摇提取5次，每次20mL，合并硫酸液，用浓氨试液调节pH值至9～10，用氯仿振摇提取5次（30mL、20mL、20mL、20mL、20mL），合并氯仿液，蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，移至5mL量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.3 缺马钱子的阴性对照溶液制备

依据处方中的比例，按制法制备缺马钱子的阴性对照样品，按“2.2.2”项方法制备阴性对照溶液。

2.3 系统适用性试验

分别精密吸取供试品溶液及对照品溶液各10μL，注入液相色谱仪中测定。结果士的宁在9～10min内出峰，而且与前后的峰均有较好的分离，见图1、图2，阴性样品不干扰样品测定，见图3。

2.4 线性关系的考察

精密称取士的宁对照品，分别加醋酸乙酯制成0.02514mg／mL、0.1257mg／mL、0.2514mg／mL、0.3352mg／mL、0.419mg／mL的溶液，分别精密吸取上述溶液10μL注入液相色谱仪，测定峰面积积分值，计算（见表1）。以峰面积积分值为纵坐标，士的宁对照品进样量为横坐标绘制标准曲线（见图4）。得回归方程Y＝17762.8+1870822X，相关系数r＝0.9996，结果表明士的宁量在0.2514～4.19μg／mL范围内，峰面积积分值与士的宁量呈线性关系。