洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度检测研究

蒋艳霞，吕治红，秦晶晶

（山西康宝生物制品股份有限公司，山西 长治046011）

洛伐他汀烟酸缓释片是新开发的血脂调节药，是烟酸缓释片与洛伐他汀速释片的双层片剂，综合了烟酸和洛伐他汀的优势，具备对LDL和VLDL的强力疗效，且疗效有相互增强作用。作者在此建立了洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度的检测方法。

1 实验

1.1 试药、试剂与仪器

洛伐他汀烟酸缓释片供试品，规格：洛伐他汀20mg、烟酸500mg，批号：111101、111102、111103，山西康宝生物制品有限公司；洛伐他汀、烟酸对照品，中国药品生物制品检定所。

乙腈（色谱级），天津科密欧化学试剂有限公司；磷酸（分析纯），天津凯通化学试剂有限公司；十二烷基硫酸钠（分析纯）、磷酸二氢钠（分析纯），天津北联精细化学品开发有限公司。

AE240型电子分析天平，梅特勒－托利多仪器（上海）有限公司；安捷伦1260型高效液相色谱仪，美国安捷伦公司；C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm）。

1.2 溶液的配制

（1）对照品溶液的配制 精密称取洛伐他汀对照品22mg置于100mL量瓶中，加10mL甲醇使溶解，加0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液（取1.38g磷酸二氢钠和5.0g十二烷基硫酸钠溶于900mL水中，用1mol·L－1氢氧化钠溶液调pH值至7.0，补水至1000mL）定容，超声10min，摇匀，精密量取5.0mL置于50mL量瓶中，加0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐溶液定容，作为对照品溶液。

（2）供试品溶液的配制 取洛伐他汀对照品22mg置于100mL量瓶中，按处方量加入相应辅料，加10mL甲醇使溶解，加0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液定容，超声10min，摇匀，精密量取5.0mL置于50mL量瓶中，加0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐溶液定容，作为供试品溶液。

1.3 洛伐他汀释放度测定方法

采用《中国药典》（2000年版）二部附录XC第一法进行洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀的溶出，以900mL 0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液作为溶出介质。

按照《中国药典》（2010年版）二部附录VD选择高效液相色谱法［1］测定洛伐他汀含量。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件与系统适应性

色谱条件：C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈－0.5%磷酸溶液（4∶1）为流动相，检测波长为238nm。理论板数按洛伐他汀峰计算不低于2000，洛伐他汀峰与相邻杂质峰之间的分离度符合要求。

取0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液适量，滤过，取20μL，进样，记录色谱图。结果表明，缓冲溶液对洛伐他汀的含量测定无干扰。

2.2 线性范围

精密称取干燥至恒重的洛伐他汀对照品20mg，置于100mL量瓶中，加入10mL甲醇使溶解，加0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液溶解并稀释至刻度；分别精密量取0.5mL、1.0mL、4.0mL、7.5mL、5.0mL、5.0mL，各置于200mL、100mL、100mL、100mL、50mL、25mL量瓶中，加0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度。分别取上述溶液进样20μL，测定不同洛伐他汀浓度下的峰面积，结果见表1 。

表1 洛伐他汀峰面积与浓度关系Tab.1 The relationship of peak area and concentration for lovastatin

以峰面积（y）为纵坐标、洛伐他汀浓度（x）为横坐标绘制标准曲线，拟合线性回归方程为：y＝594695x＋25529，R2＝0.9999。表明洛伐他汀在浓度为0.59～40.18μg·mL－1范围内与峰面积线性关系良好。

2.3 溶出转速及洛伐他汀取样时间

分别采用50r·min－1、75r·min－1、100r·min－1的转速进行洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀的溶出，并于10min、20min、30min、45min、60min取样，测定洛伐他汀的溶出量，结果见表2 。

表2 不同转速下不同时间的洛伐他汀溶出量／%Tab.2 The lovastatin elution amount at different times with different rotation speeds／%

由表2 可知，转速为100r·min－1时洛伐他汀能够较好地溶出，洛伐他汀在45min时释放度与国外文献[2］基本一致。因此，确定溶出转速为100r·min－1，取样时间为45min。

2.4 重复性

按洛伐他汀溶出度测定方法操作，于45min取样。连续进样6次，峰面积分别为11 712 168、11 741 808、11 779 796、11 731 662、11 794 378、11 724 485，平均峰面积为11 747 383，RSD为0.28%，表明实验的重复性较好。

2.5 溶液稳定性

按洛伐他汀溶出度测定方法操作，于0h、2h、4h、6h、8h时取20μL进样，记录液相色谱图，峰面积分别为：11 712 168、11 775 193、11 753 307、11 785 618、11 720 135，平 均 峰 面 积 为 11 749 284，RSD 为0.28%，表明样品在溶出介质中放置8h仍稳定。

2.6 回收率

用外标法计算3种不同浓度供试品溶液的回收率，结果见表3。

表3 回收率实验结果Tab.3 The determination results of recovery experiment

由表3可知，样品的回收率在99.0%～101.0%之间，平均回收率为99.8%、相对标准偏差（RSD）为0.71%，均符合规定。

2.7 均一性

取洛伐他汀烟酸缓释片6片（分别编号1＃～6＃），采用100r·min－1的转速进行溶出，分别于10min、20min、30min、45min、60min取样5mL，滤过，同时补充0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液5 mL；另按照1.2方法（调整超声时间为15min）制得对照品溶液；分别取两溶液各20μL，进样，按外标法计算每片的溶出量，结果见表4。

表4 3批样品洛伐他汀释放度均一性实验结果／%Tab.4 The results of lovastatin dissolution homogeneity experiment／%

由表4可知，不同批号洛伐他汀烟酸缓释片在不同时间的释放度测试结果一致性良好，RSD在2.0%～11.8%之间，且限度为标示量的70%，符合规定。

3 结论

取洛伐他汀烟酸缓释片，按照《中国药典》洛伐他汀溶出度测定法进行溶出，以0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液为溶剂，转速为100r·min－1，45min时取样，进行高效液相色谱测定。色谱条件为：C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm），以乙腈－0.5%磷酸溶液（4∶1）为流动相，检测波长238nm，进样量20μL。洛伐他汀浓度在0.59～40.18μg·mL－1范围内与峰面积线性关系良好，回收率在99.0%～101.0%之间，相对标准偏差为0.71%。该方法重复性好、稳定性高，适合洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度的测定。

[1]国家药典委员会.中国药典二部（2010年版）[M］.北京：中国医药科技出版社，2010：29－31，87－88.

[2]美国药典委员会.美国药典－国家处方集，USP35－NF30[M］.2012：3154－3155.