新型耐热植酸酶对肉仔鸡营养物质表观消化率及胫骨灰分含量的影响

张现玲 梁陈冲 于会民 陈宝江 李军国 李学军 杨禄良 汤海鸥，

（1.中国农业科学院饲料研究所，北京100081；2.河北农业大学，河北保定071000;3.北京挑战生物技术有限公司，北京100081）

植酸酶是一种新型绿色环保饲料添加剂，随着发酵工程技术的发展以及人们环保意识的提高，植酸酶在生产中的应用也越来越广泛。研究表明，在低磷日粮中添加植酸酶能提高植酸及盐的水解率，改善日粮中植物性磷的利用率，并减少粪氮、磷的排泄[1-2]，而且植酸酶还能提高钙、蛋白质、氨基酸以及微量元素的消化率[3-4]。植酸酶作为一种酶制剂，对温度非常敏感，酶通常在干燥的状态下较稳定，能保留较高的酶活，但在饲料加工的制粒工艺中有一个短暂的高温过程，在此过程中植酸酶活性损失在所难免，因而限制了植酸酶在颗粒料中的应用。耐高温植酸酶通过特殊表达系统表达，使酶蛋白分子得到高度的糖基化修饰，耐热性提高的同时在储存、使用过程中具有良好的稳定性。

本研究在低磷日粮中添加耐热植酸酶及普通植酸酶，探讨其对肉仔鸡营养物质消化率及胫骨灰分含量的影响，对耐热植酸酶产品的实际应用效果进行评价。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

普通植酸酶产品，活性含量为5 000 U/g，从市场上购买；耐热植酸酶产品，活性含量为3 000 U/g，由北京挑战生物技术有限公司提供。

1.2 试验动物及分组

选用4 800只1日龄AA肉仔鸡随机分为6个处理，每个处理设5个重复，每个重复160只肉仔鸡，性别比例一致，各处理组之间起始体重差异均不显著（P＞0.05），1日龄平均体重39.71 g。试验分两期进行，1～3周和4～6周。

1.3 试验日粮和处理设计

参照NRC（1994）肉仔鸡饲养标准和AA肉仔鸡的推荐标准饲养管理手册配制基础日粮，由北京华都肉鸡公司饲料厂加工制粒，其原料组成和营养水平见表1。试验共包括6种日粮，分别饲喂6个处理，见表2。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.4 饲养管理

试验由专人负责指导和饲养管理，按照试验要求严格进行；其饲养管理参照AA肉仔鸡的饲养管理手册进行，按照常规免疫程序进行免疫接种；自由采食和饮水。

1.5 样品采集与测定方法

分别在21日龄和42日龄时，每处理挑取12只鸡进行屠宰，分离左侧胫骨，冷冻保存以备测定其胫骨灰分、钙和磷含量。

采用内源指示剂法测定各养分的消化率。分别在19～21日龄和40～42日龄连续3 d，均匀采粪样各约200 g混合，以重复为单位充分混匀，样品置于-20℃冰箱冷冻保存。试验结束后，粪样全部解冻，65℃烘干，空气中回潮24 h，最后同日粮样品一样粉碎至40目。按四分法取样，分别测定粪样和日粮样品中的养分和盐酸不溶灰分(AIA)的含量。粗蛋白、粗灰分、钙和磷的测定方法均参照《饲料分析及饲料检测技术》[5]。

粗蛋白含量采用凯氏定氮法测定；粗脂肪含量采用索氏抽提法测定；钙含量采用高锰酸钾滴定法测定；总磷含量采用钒钼黄比色法测定；酸不溶解灰分含量的测定采用4N盐酸消煮法。

某养分消化率（%）=[1-（b×c）/（a×d）]×100。

式中：a——饲料中某养分含量；

b——粪样中某养分含量；

c——饲料中酸不溶灰分含量；

d——粪样中酸不溶灰分含量。

表2 各处理组日粮设计

1.6 数据处理和统计分析

采用SPSS 16.0统计软件ANOVA模块进行数据处理和统计分析，结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 不同植酸酶处理对肉仔鸡营养物质表观消化率的影响（见表3）

从表3中可以看出，在19～21日龄阶段，粗蛋白表观消化率，处理组1和处理组2较对照组有降低趋势（P＞0.05），处理组2高于处理组1，差异不显著（P＞0.05）；处理组3、4和5与对照组相比基本没有变化，与处理组1相比有提高趋势（P＞0.05）。4个植酸酶添加组中以处理组2的粗蛋白表观消化率最低。在40～42日龄阶段，表现出相似变化规律。

整个试验周期，钙的表观消化率，与处理组1相比较，处理组2、3、4和5表现出提高趋势，各处理组之间均无显著性差异（P＞0.05）。

磷的表观消化率，在19～21日龄阶段，处理组1较对照组下降，差异不显著（P＞0.05）；处理组2、3、4和5均显著高于处理组1和对照组（P＜0.05）；其中处理组3、4和5较处理组2均有提高趋势，以处理组5最高，均无显著性差异（P＞0.05）。在40～42日粮阶段，变化规律基本相似。

表3 不同植酸酶处理对肉仔鸡营养物质表观消化率的影响（%）

2.2 不同植酸酶处理对肉仔鸡胫骨灰分、钙和磷含量的影响（见表4）

由表4可知，在21日龄，胫骨灰分含量，处理组1显著低于对照组（P＜0.05），4个植酸酶添加组与对照组相比均无显著性差异（P＞0.05），但显著高于处理组1（P＜0.05），4个植酸酶添加组之间无显著性差异（P＞0.05）。

表4 不同植酸酶对肉仔鸡胫骨灰分、钙和磷含量的影响（%）

胫骨磷含量，处理组1显著低于对照组（P＜0.05），处理组2与对照组相比基本没有差异；处理组2、3、4和5均显著高于处理组1（P＜0.05），处理组3、4、5显著高于处理组2与对照组（P＜0.05）。

在42日龄，胫骨灰分含量，与对照组相比较，处理组1显著降低（P＜0.05），处理组2呈降低趋势（P＞0.05），处理组3、4和5呈提高趋势（P＞0.05）；与处理组1相比较，处理组2呈提高趋势（P＞0.05），处理组3、4和5显著提高（P＜0.05），4个植酸酶添加组之间均无显著性差异（P＞0.05）。

胫骨磷含量，与对照组相比较，处理组1显著降低（P＜0.05），处理组2基本没有差异，处理组3、4、5得到提高，其中处理组5显著提高（P＜0.05），且显著高于处理组2（P＜0.05）；4个植酸酶添加组均显著高于处理组1（P＜0.05）。

在21日龄和42日龄，胫骨钙含量，与对照组相比较，处理组1呈降低趋势（P＞0.05），4个植酸酶添加组与其相比均无显著性差异（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 耐热植酸酶处理对肉仔鸡营养物质表观消化率的影响

植酸酶能使日粮中的养分从与植酸的结合状态中释放出来，添加植酸酶可明显提高蛋白质和氨基酸在小肠中的消化率(张克英等，2001)[6]。陈文等(2006)报道，日粮中添加植酸酶可以改善蛋白质的生物学利用率[7]。徐奇友等(2000)试验表明，植酸酶水解植酸磷提高了磷的利用率，满足了肉仔鸡对磷的营养需要[8]。谢新东等(2002)研究报道，添加植酸酶能显著提高饲料中P的表观利用率，并随植酸酶添加量增加而提高，当添加量为500 U/kg时，饲料中P的表观利用率达59.3%，比低磷组提高36.95%，比无机磷组提高19.32%[9]。Johnston等(2004)的研究结果表明，用植酸酶替代部分无机磷后，钙、磷、粗蛋白质、氨基酸及淀粉的回肠表观消化率提高[10]。王丽娟等（2002）研究了玉米-豆粕型日粮中添加植酸酶对蛋鸡生产性能和营养物质利用的影响，结果表明，植酸酶可显著提高日粮粗灰分、粗蛋白、钙、总磷和铜的表观利用率[11]。

本试验结果表明，当降低基础日粮中磷添加水平时，降低了磷的表观消化率；在此基础上添加500～2 000 U/kg普通植酸酶或250～500 U/kg耐热植酸酶，显著提高了磷的表观消化率（P＜0.05），其中以250～500 U/kg耐热植酸酶与处理组3效果理想，说明同等制粒温度下，耐热植酸酶的应用效果优于普通植酸酶。

3.2 耐热植酸酶处理对肉仔鸡胫骨灰分、钙和磷含量的影响

钙、磷是家禽体内重要的矿物元素，钙在参与骨骼形成、维持体内酸碱平衡和正常心率等方面具有重要的作用，磷也能参与骨骼的形成，此外对维持体内酸碱平衡、碳水化合物和脂肪代谢方面也有一定的影响。研究表明，骨骼中的灰分与钙、磷之间存在着一定的相关性。骨灰分含量被广泛用来作为评估磷需要量的标准，因为对于磷缺乏日粮，该指标比生长率更为敏感[12]。呙于明等(1995)对5周龄艾维茵肉仔鸡的研究发现，随日粮钙、磷营养水平的降低，肉仔鸡胫骨灰分及钙、磷含量极显著下降[13]。李文立等(2004)报道，胫骨灰分与胫骨钙、磷之间呈强直线正相关，胫骨钙、磷之间呈强直线相关[14]。王庆云等(2008)研究不同无机磷水平日粮中添加植酸酶对肉鸡生长性能及骨骼的影响，12.3 g/kg和8.2 g/kg磷酸氢钙组肉鸡胫骨灰分及胫骨中钙、磷含量均高于对照组[15]。

本试验结果显示，当降低基础日粮中磷添加水平时，显著降低了胫骨灰分和磷的含量（P＜0.05），同时钙含量呈降低趋势（P＞0.05）；在此基础上添加500～2 000 U/kg普通植酸酶或250～500 U/kg耐热植酸酶，胫骨灰分和钙磷的含量恢复或超出对照组水平，与前人报道结果一致，说明日粮中添加植酸酶提高了胫骨中灰分及钙、磷含量。

4 结论

当降低基础日粮中磷添加水平时，降低了磷的表观消化率与胫骨灰分和磷的含量；在此基础上添加植酸酶，可以提高磷的表观消化率，胫骨灰分和钙磷的含量恢复或超出对照组水平，其中以250～500 U/kg耐热植酸酶与2 000 U/kg普通植酸酶效果理想，降低磷添加水平或添加不同来源植酸酶对粗蛋白质和钙的表观消化率基本没有影响，充分表明耐热植酸酶不仅没有影响营养物质消化率，而且较普通植酸酶有更好的应用效果。

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