胎盘生长因子在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义＊

苗向阳，罗 旭，付 逆，郭建桥，赵法亮，崔 伟

(遵义医学院附属医院泌尿外科，贵州 遵义 563099)

膀胱移行细胞癌(BTCC)是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，具有多中心、浸润性、易复发等生物学特性，所以，深入研究其生物学行为，预测膀胱癌预后和复发等问题已成为近年来研究的热点。胎盘生长因子(Placenta growth factor，PLGF)在1991年由Maglione［1］从人的胎盘cDNA文库中分离纯化而得，其基因序列与VEGF基因有53%同源性。PLGF在绒毛膜滋养细胞层中高度表达，在妊娠母体的血液中可以检测到有免疫活性的PLGF，并能维持一定的水平。国内外研究表明［1，3、5］PLGF 在多种肿瘤组织中呈高表达，但关于PLGF在膀胱癌组织中是否表达，国内外文献鲜有报道。本实验通过检测PLGF在膀胱移行细胞癌组织中的表达，以期探讨PLGF在膀胱移行细胞癌不同病理分级和临床分期中的表达变化及临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料 随机抽取遵义医学院附属医院泌尿外科2007～2008年手术切除证实为膀胱移行细胞癌的石蜡标本30例，其中男性19例，女性11例，年龄33～92岁，平均64岁;按TNM分期，Tis 2例，Ta 3例，T1 12例，T2 9例，T3 3例、T4 1例，分期依据CT，病理检查等;按WHO肿瘤分级，Ⅰ级10例，Ⅱ级11例，Ⅲ级9例;正常膀胱粘膜组织10例。正常呈阳性表达的胎盘组织1例。

1.2 主要试剂与方法 采用免疫组化SP两步法，实验用一抗兔抗人PLGF，二抗辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG，均为北京博奥森生物技术有限公司产品，工作浓度均为1:50;SP法实验步骤按试剂盒说明书进行。以PBS代替一抗，作为阴性对照，正常胎盘组织标本作为阳性对照。用10%甲醛固定样本、石蜡包埋、连续4μm厚切片，每份标本切片6张，DAB染色。

1.3 结果判定 PLGF以胞浆出现均匀分布黄褐色或棕黄色颗粒为阳性。每例标本随机计数10个高倍视野，计数100个肿瘤细胞中阳性染色细胞数，以阳性染色细胞的百分率作为结果。阳性染色细胞数少于5%判定为阴性，阳性染色细胞数大于5%判定为阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0软件进行统计学分析，组间比较采用检验或fisher exact test法，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 在正常膀胱粘膜和BTCC组织中PLGF的表达(见表1)。

PLGF在正常膀胱粘膜和BTCC组织中，主要分布在细胞浆(见图2、3)，在肿瘤间质的血管内皮细胞中也有少量表达(见图4)。

表1 正常膀胱粘膜和BTCC组织中PLGF的表达

2.2 在BTCC组织不同病理分级中PLGF的表达(见表 2、图 1)。

表2 在BTCC组织不同病理分级中PLGF的表达

2.3 在BTCC组织不同临床分期中PLGF的表达(见表3、图 2)。

表3 在BTCC组织不同临床分期中PLGF的关系

2.4 在BTCC组织不同性别中PLGF的表达(表4)。

3 讨论

膀胱移行细胞癌(BTCC)是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，对预测其预后和复发等问题已成为近年来研究的热点。肿瘤能否形成新生血管取决于促血管因子和抑制血管生成因子二者之间的平衡。胎盘生长因子(PLGF)是血管内皮生长因子(VEGF)家族中的一员，其蛋白氨基酸序列与VEGF有53%的同源性。研究发现PLGFmRNA在绒毛膜滋养细胞层中高表达，在整个妊娠过程中处于一定的水平，结果认为PLGF在胎盘绒毛膜血管形成中起重要作用，对胚胎发育也起一定的作用［6，7］。而在多种肿瘤组织中PLGF呈高表达状态，并认为PLGF过表达导致肿瘤的生长和血管的形成［8－10］。

本研究结果表明，随着膀胱移行细胞癌病理分级的升高，PLGF表达增加，G2、G3级组织中其表达均明显高于G1级，但在G2、G3组织中其表达却无明显差异，究其原因，可能与本组病例较少有关。同时本研究发现，PLGF在浸润性膀胱癌中的表达明显高于非浸润性膀胱癌，且无性别差异。因此，我们认为PLGF可作为临床初步判定膀胱癌恶性程度的一项检测指标。

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