艳山姜果实提取液对实验动物胃肠动力的促进作用研究①

阮志鹏，何梅钦，侯炳昌，余雪媛，何金火

（1.莆田学院医学院药学系，福建 莆田 351100 E－mail：rzp611＠yahoo.com.cn；2.莆田学院医学院临床医学系，福建 莆田 351100；3.福建莆田第一中学化学教研组，福建 莆田 351100）

艳山姜又名玉桃，为姜科山姜属植物，具有温胃散寒、燥湿健脾、行气止痛、截疟等功效［1］。姜科植物中有很多为常用的中药材或草药，例如姜科山姜属植物的高良姜不仅具有抗消化道溃疡、解除胃肠痉挛、止吐作用，还具有镇痛抗炎、抗血栓形成、抗氧化及化学预防作用［2，3］，其主要化学成分以双苯庚烷类和黄酮类为主，双苯庚烷类化合物和黄酮类化合物有效结构多样，因此药理作用也很广泛，具有较好的抗氧化、抗炎、镇痛和抗肿瘤、抗细胞毒活性。但同样作为山姜属植物的艳山姜，目前对其促进胃肠运动研究的报道则较少。本实验拟观察其对实验动物胃肠运动的影响，并检测大鼠胃及十二指肠电活动的变化，以探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 正露丸，大幸药品株式会社生产，批号11EA01；甲基橙，温州市华侨化学试剂有限公司生产，批号20061027；黑墨水，上海派克笔有限公司生产，批号DO9941；0.1mmol／L碳酸氢钠溶液，由莆田学院机能中心实验室提供；艳山姜果实。实验前配置0.0125g／ml正露丸溶液，0.1%甲基橙溶液，避光储存备用。

1.2 动物 健康昆明种小鼠100只，体重16～24g，SD大鼠50只，体重180～220g，雌雄均有，由福建医科大学实验动物研究室提供。

1.3 仪器 离心机，型号：80－2，由上海浦东物理光学仪器厂生产；精密电子天平，型号：GF－200，由日本AND生产；721分光光度计，上海第三分析仪器厂生产；民间瓦罐炖蛊，深圳市联创实业有限公司生产，型号：DF－BL011。RM6240生物信号采集处理系统，成都仪器厂生产。

1.4 实验方法

1.4.1 艳山姜果实提取液的制备 用精密电子天平称取艳山姜果实50g，加水200ml，混匀置于民间瓦罐炖蛊，炖化4h，将炖化后的溶液充分过滤，弃滤渣，再将收集的滤液经1 500r／min离心机离心，收集上清液，40℃旋转蒸发后得到浓缩液为艳山姜果实提取液（Alpinia zerumbet fruit extract，Afex），用该滤液分别配置成0.4、0.2、0.1g／ml Afex，待用。

1.4.2 Afex对健康小鼠胃排空的影响 将50只健康小鼠随机分成5组，每组10只，分组和给药情况如下：①阴性对照组（蒸馏水，20ml／kg）；②阳性对照组（正露丸，0.625g／kg）；③Afex大剂量组（8g／kg）；④Afex中剂量组（4g／kg）；⑤Afex小剂量组（2g／kg）组。灌胃给药，每日1次，连续给药4天，末次给药前禁食不禁水12h，第4天末次给药为皮下注射，末次给药40min后对各组每只小鼠灌胃0.1%甲基橙溶液0.7ml，20min后用颈椎脱臼法处死小鼠，立即剖腹取胃结扎胃贲门和幽门，取胃放于小烧杯中并加入10ml蒸馏水，将胃剪开充分冲洗，用碳酸氢钠溶液调pH 至6.0～6.5，3 500r／min离心洗出液15min，将上清液置于721分光光度计于560nm波长处测其吸光度作为胃内0.1%甲基橙光密度［4］。

另以0.1%甲基橙0.7ml加入到10ml蒸馏水摇匀后置于721分光光度计于560nm波长处测其吸光度作为基数甲基橙光密度。计算甲基橙胃残留率（%）。

甲基橙胃残留率（%）＝胃甲基橙光密度／基数甲基橙光密度×100%

1.4.3 Afex对健康小鼠肠推进的影响 将50只生理状态良好的小鼠，随机分成5组，每组10只，分组和给药情况同1.4.2项。灌胃给药，每日1次，连续4天。末次给药前禁食但不禁水24h，第4天末次给药为皮下注射，末次给药后30min，灌服墨汁0.1ml／只，20min后处死，立即剖腹取出胃肠，平铺于玻璃板上，测量墨汁前端在肠管内的移动距离和小鼠的全长（自幽门至回盲部），计算推进百分率。

墨汁推进百分率（%）＝墨汁前端与幽门的距离／小肠全长×100%

1.4.4 Afex对大鼠胃及十二指肠电活动的影响［5］取大鼠50只，分组及给药方法同1.4.2项。经禁食24h后，3%戊巴比妥钠（1ml／kg）腹腔麻醉，剖腹，暴露胃肠；在胃窦部及十二指肠中段的平滑肌中各插入一对直径为0.35mm的F4－康铜电极线，关腹，导线引出腹腔，1周后将导线与RM6240生物信号采集处理系统相连，选择时间常数0.03s，高频滤波10Hz，描记在给药后1h内胃肠平滑肌电活动的频率和振幅的变化。

2 实验结果

2.1 Afex对健康小鼠胃排空的影响 与阴性对照组（蒸馏水组）比较，阳性对照药正露丸也可减少甲基橙胃残留率，但差异无显著性；3个剂量（2、4、8g／kg）的 Afex，均有降低甲基橙胃残留率作用（P＜0.05），有提高胃排空趋势，且呈剂量依赖性。但随着剂量的增加，Afex 3个剂量组（2、4、8g／kg）之间的甲基橙胃残留率比较差异无显著性，见表1。

表1 各组艳山姜果实提取液对健康小鼠胃排空的影响 （±s，每组n＝10）

表1 各组艳山姜果实提取液对健康小鼠胃排空的影响 （±s，每组n＝10）

注：与蒸馏水对照组比较，a：P＜0.05

组别 剂量（g／kg） 甲基橙胃残留率（%）38.21±15.21正露丸组 0.625 35.96±13.52 Afex小剂量组 2 30.49±12.29a Afex中剂量组 4 26.53±11.23a Afex大剂量组 8 25.69±11.45蒸馏水组 －a

2.2 Afex对健康小鼠肠推进的影响 与阴性对照组比较，阳性对照药正露丸也可促进小鼠小肠中墨汁的推进，但差异无显著性；3个剂量（2、4、8g／kg）的 Afex，均有促进小鼠小肠中墨汁推进的作用（P＜0.05），且呈剂量依赖性。但随着剂量的增加，Afex 3个剂量组（2、4、8g／kg）之间的小鼠小肠中墨汁推进百分率比较差异无显著性，见表2。

表2 各组艳山姜果实提取液对健康小鼠肠推进的影响 （±s，每组n＝10）

表2 各组艳山姜果实提取液对健康小鼠肠推进的影响 （±s，每组n＝10）

注：与蒸馏水对照组比较，a：P＜0.05

组别 剂量（g／kg）小肠全长（cm）推进长（cm）墨汁推进百分率（%）－ 47.5±5.2 24.7±4.1 51.9±5.2正露丸组 0.625 48.2±5.9 27.6±5.55 7.6±10.4 Afex小剂量组 2 47.4±5.1 29.6±6.9 62.1±9.9a Afex中剂量组 4 47.1±5.2 32.8±6.2 69.5±9.1a Afex大剂量组 8 47.3±4.7 36.3±6.6 76.3±8.1蒸馏水组a

2.3 Afex对大鼠胃及十二指肠电活动的影响 见表3。对各组大鼠胃及十二指肠电活动进行分析发现，正露丸组和Afex 3个剂量组（2、4、8g／kg）均可引起大鼠胃电活动的变化，表现为慢波频率加快、振幅增高，其中以4g／kg剂量组的胃电变化最为显著，与阴性对照组比较差异有显著性（P＜0.05）。

3 讨论

艳山姜具温胃散寒、燥湿健脾、行气止痛、截疟等功效［6］。艳山姜在莆田民间被广泛应用，其叶用于红团的制作历史悠久，民间有流传积食用红团治疗。民间对艳山姜的应用多集中在其根茎和叶方面，基础研究较少，本实验依据艳山姜果实粗提物促胃肠动力作用进行研究，并对其可能作用机制进行了初步探索，为进一步发现艳山姜的有效作用部位及药理作用机制提供线索。

表3 Afex对大鼠胃及十二指肠电活动的影响 （±s，每组n＝10）

表3 Afex对大鼠胃及十二指肠电活动的影响 （±s，每组n＝10）

注：与蒸馏水对照组比较，a：P＜0.05

组别 剂量（g／kg）慢波频率（次／min）振幅（mV）－ 3.65±0.24 3.53±0.53正露丸组 0.625 4.26±0.44 4.10±0.54 Afex小剂量组 2 4.44±0.48 4.11±0.33a Afex中剂量组 4 4.91±0.49 4.93±0.69a Afex大剂量组 8 4.73±0.51 4.65±0.40蒸馏水组a

实验结果证实，不同剂量（2、4、8g／kg）的艳山姜果实提取液对小鼠胃排空、肠推进具有一定的促进作用，且呈一定的量—效关系，随艳山姜剂量的增加其作用愈加明显。不同剂量（2、4、8g／kg）的艳山姜果实提取液对小鼠的肠推进作用以及胃排空作用均强于正露丸，且大鼠胃十二指肠的慢波频率加快、振幅增高，表明其作用机制可能与促进胃十二指肠电活动有关，对胃、十二指肠平滑肌收缩活动有较强的促进作用。艳山姜果实提取液的有效成分可能与艳山姜的双苯庚烷类和黄酮类的化学成分有关［6］。双苯庚烷类化合物可对抗由于硫酸酮引起的呕吐，对番泻叶引起的腹泻亦有效。黄酮类化合物具有预防术后腹胀、抗病原微生物等作用。可通过增加胃液分泌和胃蛋白酶活性，降低总酸度与游离酸度，对胃有收缩兴奋作用；对肠肌张力升高，振幅升高，收缩加快等引起肠管兴奋性升高，从而促进胃内容物排空和肠壁蠕动。对该过程具体作用机制有待进一步研究。

从目前的临床应用情况来看，促胃肠动力的药物较少，中草药的开发及利用就更为有限。所以，该研究具有良好的应用前景。随着社会生活水平的不断提高，人们饮食方式及食物的逐渐多样化、复杂化等因素，由此而造成的胃肠道消化不良等胃肠道动力障碍性疾病逐渐增多。胃肠道动力异常性疾病是人群中的多发病、常见病。中医认为脾胃虚弱、气机失调为其病机。饮食劳倦、损伤脾胃、中气不足、邪犯胃肠等为其病因。因此进一步研发促胃肠动力药物是基础医学、临床医学研究领域的迫切需求。从自然界丰富的药用植物中发现促胃肠动力药物将具有广阔的应用前景。

该研究结果为植物资源的合理研究开发与充分有效利用提供了实验基础。利用当地民间验方进行研究是中草药研究的一个方向，研究结果可促进农村中医药事业发展及促进艳山姜果实资源的合理开发与利用。

［1］ 陈奇.中药药理研究方法学［M］.2版.北京：人民卫生出版社，2006：27－67.

［2］ 彭腾，李鸿翔，文焕松，等.蜜橘皮中柠檬苦素总类似物促胃肠动力实验研究［J］.海峡药学，2010，22（8）：36.

［3］ 赵学军，熊天琴，李卓明，等.疏肝和胃颗粒的催眠和促胃肠动力作用实验研究［J］.成都中医药大学学报，2006，3（1）：40.

［4］ 李煜国，薛敬东.达泰胶囊促胃肠动力作用的实验研究［J］.中国中医基础医学杂志，2005，11（8）：599.

［5］ 赵贤俊，金永日，崔海月，等.胃肠宁合剂对大鼠胃肠运动的作用及其机制探讨［J］.辽宁中医杂志，2005，32（12）：1327－1329.

［6］ 杨世林，杨学东，刘江云.天然产物化学研究［M］.北京：科学出版社，2009：445－454.