大球盖菇菌丝生长适宜氮源研究*

黄春燕，万鲁长，张柏松，张海兰，郭惠东，宫志远

（山东省农业科学院农业资源与环境研究所，山东 济南 250100）

大球盖菇Stropharia rugoso-annulata又名皱环球盖菇，是一种色泽艳丽、清香脆甜、肉质嫩滑的优质珍稀食用菌，含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质和多糖。上世纪60年代，德国最早进行人工驯化栽培，现在波兰、美国及荷兰也进行了人工栽培。上世纪90年代，我国开始引种栽培[1]，它是目前国内具有良好发展前景的珍稀食用菌之一。近几年国内也有许多学者对大球盖菇的特性、制种及栽培技术等进行了研究，但各研究者报道的适宜大球盖菇菌丝生长的氮源种类差别较大，甚至互相矛盾[2，3，5]。为了掌握大球盖菇菌丝生长特性，更好地开发这一资源，笔者对大球盖菇菌丝生长适宜的氮源进行了研究，以期为大球盖菇的高产栽培提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

大球盖菇DQ-12（本所筛选）。

1.2 供试培养基

活化培养基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨1 g、磷酸二氢钾1.5 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、复合维生素B1片10 mg、琼脂粉20 g，水1 000 mL。

基础培养基：葡萄糖20g、磷酸二氢钾1.5g、MgSO4·7H2O 0.5 g、复合维生素B1片10 mg、琼脂粉20 g，水1 000 mL。

1.3 试验处理

将上述基础培养基分别添加酵母浸粉、蛋白胨、硫酸铵、硝酸铵、尿素和硝酸钾为氮源，根据各氮源的不同含氮量，分别设5个浓度梯度；以不加氮源为空白对照，共31个处理，每一处理重复3次，每一重复做5个培养皿。常规方法制作培养基，用试管定量分装25 mL，灭菌后倾倒于直径90 mm的培养皿中，制成培养基平板，供实验用。

1.4 接种培养

取供试保藏菌种，挑取一小块于活化培养基斜面上，适温下培养，待长满管时，转接至相同的平板培养基上，置于适宜的温度下培养，当菌落直径长至6 cm～7 cm时，在菌落边缘打取直径为5 mm的菌圆片，接种于各处理培养基平板上，置25℃恒温培养箱培养。

1.5 数据测定与统计

各处理于恒温培养箱培养12 d后，测量菌落半径，计算菌丝日均生长速度并观察菌丝长势。

2 结果与分析

2.1 不同浓度酵母浸粉对大球盖菇菌丝生长的影响

不同浓度酵母浸粉对大球盖菇菌丝生长的影响，结果见表1。

表1 不同浓度酵母浸粉对大球盖菇菌丝生长的影响

由表1可以看出，添加不同浓度的酵母浸粉对大球盖菇菌丝生长影响较大，添加酵母浸粉后，菌丝扩张速度变慢，但菌丝分支增多，当酵母浸粉浓度为0.13%时，菌丝致密，长势较强，但菌丝扩张速度与对照相比差异不显著。当酵母浸粉浓度为0.26%时，菌丝致密，长势较强，菌丝扩张速度与对照相比差异极显著。当酵母浸粉浓度大于0.39%时，不但菌丝扩张速度与对照相比差异极显著，菌丝长势也变弱。

2.2 不同浓度蛋白胨对大球盖菇菌丝生长的影响

不同浓度蛋白胨对大球盖菇菌丝生长的影响见表2。

表2 不同浓度蛋白胨对大球盖菇菌丝生长的影响

由表2可以看出，随蛋白胨浓度的增加，菌丝生长速度逐渐变慢，但与无氮对照相比菌丝生长速度无显著性差异，而加入蛋白胨可促进菌丝分支，长势增强。

2.3 不同浓度硫酸铵对大球盖菇菌丝生长的影响

不同浓度硫酸铵对大球盖菇菌丝生长的影响见表3。

表3 不同浓度硫酸铵对大球盖菇菌丝生长的影响

由表3可以看出，加入硫酸铵可极显著的影响大球盖菇菌丝的生长，使生长速度变慢，长势亦比较微弱。

2.4 不同浓度硝酸铵对大球盖菇菌丝生长的影响

不同浓度硝酸铵对大球盖菇菌丝生长的影响见表4。

表4 不同浓度硝酸铵对大球盖菇菌丝生长的影响

由表4可以看出，微量硝酸铵可以促进大球盖菇菌丝生长，当浓度大于0.06%时即可抑制菌丝生长。

2.5 不同浓度尿素对大球盖菇菌丝生长的影响

不同浓度尿素对大球盖菇菌丝生长的影响见表5。

表5 不同浓度尿素对大球盖菇菌丝生长的影响

由表5可以看出，微量尿素可以促进大球盖菇菌丝生长，但随浓度增大，菌丝生长速度变慢，当浓度大于0.13%时，长势也变弱。

2.6 不同浓度硝酸钾对大球盖菇菌丝生长的影响

不同浓度硝酸钾对大球盖菇菌丝生长的影响见表6。

由表6可以看出，添加不同浓度的硝酸钾可显著影响大球盖菇菌丝生长，使菌丝生长速度变慢，长势也比较弱。

3 结论与讨论

氮源是大球盖菇菌丝生长的主要营养源之一。据刘胜贵等[2]报道，大球盖菇营养生长所需最适氮源以硫酸铵为最好，其余依次为蛋白胨、硝酸铵、尿素，在酵母膏为氮源的培养基中不生长；颜淑婉[4]研究认为最适氮源为酵母浸膏；而张世敏等[5]报道认为最佳氮源为尿素，其次为蛋白胨和酵母膏。闫培生等[3]研究认为，最适有机氮源是豆粉，其次是酵母膏，牛肉膏和蛋白胨不宜做氮源，无机氮中以NH4NO3最佳。

表6 不同浓度硝酸钾对大球盖菇菌丝生长的影响

而本研究表明大球盖菇菌丝生长最适宜氮源是尿素，其适宜浓度是0.026%；蛋白胨次之，其适宜浓度是0.1%；硫酸铵最差。大球盖菇菌丝生长对氮源浓度极敏感，在无氮源的情况下，大球盖菇菌丝能快速生长，但长势极微弱。低浓度氮源可促进菌丝分支，长势强，高浓度氮则显著抑制菌丝生长；有机氮源优于无机氮源。

文献报道中对最佳氮源的研究结果之所以差异巨大，可能与研究者所采用的研究方法有关，刘胜贵、张世敏、颜淑婉、闫培生等的研究均只测定了供试氮源的一个浓度，未做梯度试验，通常情况下，如果研究对象对氮源浓度不敏感，采用常用浓度筛选最佳氮源对结果影响不大，但如果研究对象对氮源浓度非常敏感，不做梯度试验可能会导致试验结果差异较大。

[1]黄年来.大球盖菇的分类地位和特征特性[J].食用菌，1995，17(6)：11.

[2]刘胜贵，吕金海.大球盖菇生物学特性的研究[J].农业与技术，1999，19(2)：19-22.

[3]闫培生，李桂舫，蒋家慧，等.大球盖菇菌丝生长的营养需求及环境条件[J].食用菌学报，2001，8(1)：5-9.

[4]颜淑婉.大球盖菇的生物学特性[J].福建农林大学学报：自然科学版，2002，31(3)：401-403.

[5]张世敏，和晶亮，邱立友，等.不同碳氮营养源和培养温度对大球盖菇菌丝生长的影响[J].微生物学杂志，2005，25(6)：32-34.