气相色谱法测定樟酚酊中樟脑含量

陈 刚

(湖南省张家界市食品药品检验所，湖南 张家界 427000)

樟酚酊系张家界市人民医院制剂注册品种，协定处方，由樟脑、苯酚、甘油、乙醇等组方，具有消炎、止痒等功效，主要用于预防和治疗皮肤瘙痒症。该品种原质量标准比较简单[1]，仅规定了性状、化学鉴别等检验项目，未制定含量测定检测指标。为较好地控制其内在质量，笔者采用气相色谱(GC)法对樟酚酊中樟脑进行含量测定，结果准确、重现性好，现报道如下。

1 仪器与试药

GC－2010型气相色谱仪(日本岛津)，AOC－5000型自动进样器，GCsolution色谱工作站;TM－WAX(天美)毛细管柱(30 mm ×0.32mm，0.25μm);AUW220D 型电子分析天平(日本岛津)，1020a超纯水器(重庆摩尔)，KQ2200DB型数控超声波清洗器(昆山超声仪器公司)。樟脑对照品(批号为 110747－201008，纯度 97.0%，供含量测定用)，苯酚对照品(批号为100509－200401，供鉴别用)，水杨酸甲酯(批号为 110707－201011，内标物，纯度99.9%)，均来自中国药品生物制品检定所;高纯氮气(批号为20110329，纯度99.999%，长沙日臻气体有限公司)，水为超纯水，其他试剂为分析纯;樟酚酊样品3批(批号分别为20110901，20110929，20110930，张家界市人民医院制剂室)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

以 TM－Wax毛细管柱(30mm×0.32mm×0.25μm)为分析柱，FID检测器，分流进样，分流比40∶1，进样口温度:230℃，柱温:125℃，检测器温度:250℃。樟脑峰和内标物质峰的分离度应大于 1.5。

2.2 内标溶液制备

精密称取水杨酸甲酯1.139 39 g(纯度99.9%)，精密称定，置25mL容量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。

2.3 对照品溶液制备和校正因子测定

精密称取樟脑对照品0.021 19 g(纯度97.0%)，置25mL容量瓶中，精密加入内标溶液1mL，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。吸取1μL注入气相色谱仪，记录峰面积，计算校正因子。

2.4 供试品溶液制备

精密量取本品2 mL置50 mL容量瓶中，精密加入内标溶液2 mL，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.5 方法学考察

阴性干扰试验:按樟酚酊处方组成除不加樟脑外，制成缺“樟脑”的阴性样品，照供试品溶液同法制成阴性对照品溶液。精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液各1μL，分别注入气相色谱仪，测定。结果阴性对照品溶液色谱图中，在樟脑峰相应的保留时间附近，无干扰峰检出。气相色谱图见图1。

图1 气相色谱图

线性关系考察:精密称取樟脑对照品 0.234 71 g(纯度97.0%)，置25mL容量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液。另精密称取水杨酸甲酯0.991 14 g(纯度99.9%)，置25mL容量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为内标贮备溶液。精密量取对照品贮备溶液1，2，3，5，7mL分别置25mL容量瓶中，各瓶精密加入内标贮备溶液1mL，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。分别吸取1μL，注入气相色谱仪。以樟脑与内标物的峰面积之比为纵坐标(Y)、樟脑质量浓度为横坐标(X)，得线性回归方程 Y=0.906 39X －0.005 88，r=0.999 9(n=5)，线性范围为 0.364 3 ～2.549 9 g/L。

精密度试验:精密吸取对照品溶液1μL，按上述色谱条件进样，重复6次，测定对照品与内标物峰面积的比值。结果的 RSD为0.46%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:精密吸取同一供试品(批号为20110901)溶液1 μL，按上述色谱条件，分别在 0，2，4，8，12，24 h 时进样，测定樟脑和内标物的峰面积，计算校正因子，以内标法计算含量。结果的 RSD为0.13%(n=6)，表明供试品溶液在24 h内基本稳定。

重现性试验:取同一批号(20110901)的樟酚酊样品6瓶，分别精密吸取2mL，照供试品溶液制成6份供试液，按上述色谱条件测定樟脑含量。结果的 RSD=0.23%(n=6)，表明方法精密度高，重现性较好。

加样回收试验:精密称取樟脑对照品 0.223 49 g(纯度97.0%)，精密称定，置10mL量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液(21.678 53 g/L)。再精密称取水杨酸甲酯 0.990 15 g(纯度99.9%)，精密称定，置25 mL量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为内标贮备溶液(39.566 39 g/L)。另取已知含量的样品[批号为 20110901，含量为标示量的 99.63%(19.926 g/L)]0.5，1，2mL 共 6 份，置 50mL量瓶中，分别精密加入对照品贮备溶液(21.678 53 g/L)0.5，1，2mL，再分别精密加入内标贮备溶液1mL，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，分别吸取1μL，注入气相色谱仪，记录峰面积。根据标准曲线计算樟脑的含量和回收率。结果见表1。

表1 樟脑加样回收试验结果(n=6)

2.6 样品含量测定

取样品 3 批(批号为 20110901，20110929，20110930)，按供试品溶液制备方法制成供试液，精密吸取1μL，注入气相色谱仪，测定樟脑和内标物的峰面积，以内标法计算含量。结果3批样品中樟脑含量分别为标示量(100mL∶2 g)的99.63%，99.48%，99.54%。

3 讨论

曾有报道应用高效液相色谱法测定樟脑含量的方法[2]。由于气相色谱法具有分离速度快、效率高、保留时间短、试验成本相对较小等优点，故对于既可用液相又可用气相时，一般考虑首选气相色谱法。

改变柱温，可改善分离效能。文中所述色谱条件未采用程序升温，樟脑与溶剂(乙醇)、内标物等成分能达到较好分离。经试验，按上述色谱条件采用程序升温(柱温为120℃保持5min，以10℃ /min的速度升至160℃，保持2 min)，结果樟脑和内标物(水杨酸甲酯)也能达到较好分离，樟脑峰保留时间在3～4min左右，可满足含量测定要求。两种方法均适用的原因是本品药物组分较少，分离容易。若是复杂组分的样品，应以程序升温法较好。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:1 108.

[2]余小平，舒金富，黄 华，等.高效液相色谱法同时测定樟脑苯酚溶液中两组分的含量[J].药物分析杂志，2006，26(8):1 161－1 162.