高效液相色谱法测定蒲金散结胶囊中绿原酸含量

2012-09-14蒋俊春

中国药业 2012年24期

蒋俊春

(河南省商丘市食品药品检验所，河南商丘 476000)

蒲金散结胶囊是由蒲公英、夏枯草、金银花、浙贝母4味药材加工制成的复方制剂，具有清热解毒、消肿散结之功效，用于乳房肿痛、乳腺增生症，临床疗效显著。现行质量标准中未收载含量测定项目，制剂质量不能得到有效的控制。为进一步控制其质量，保证临床用药疗效稳定、安全可靠，采用高效液相色谱法对处方中的活性成分绿原酸进行定量测定[1－3]，方法简便准确、结果可靠，为提高和完善本制剂质量标准提供了试验依据。

1 仪器与试药

Agilent 1200型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);赛多利斯电子分析天平(德国赛多利斯有限公司);YQ－020超声波清洗器(上海易净超声波清洗机有限公司)。绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号为0753－200111);乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯;蒲金散结胶囊(永城市人民医院，自制)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Diamonsil C18色谱柱(150mm ×4.6mm，5μm);流动相:乙腈－0.4% 磷酸(14 ∶86);流速:1.0 mL/min;检测波长:327 nm;进样量:10μL。

2.2 溶液制备

取绿原酸对照品约20 mg，精密称定，置50 mL量瓶中，加50%甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取本品约1.6 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50%甲醇50mL，称定质量，超声处理30min，放冷，再称定质量，用50%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置25mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取缺金银花的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性考察:取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液各10μL，按拟订的色谱条件，分别进样测定，记录色谱图。结果表明，其他成分对绿原酸测定无干扰，见图1。

线性关系考察:分别精密量取绿原酸对照品溶液1，2，3，5，6，7，9mL，置50mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀。按拟订的色谱条件，分别进样10μL，记录绿原酸峰面积值，以峰面积积分值(Y)对对照品质量浓度(X)进行线性回归，得回归方程Y=2 669.36X －31.28，r=0.999 6(n=7)。结果表明，绿原酸质量浓度在8.056～72.50μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。

精密度试验:取同一对照品溶液，重复进样5次，每次10μL，记录峰面积。结果的 RSD=0.73%(n=5)，表明方法精密度良好。

图1 高效液相色谱图

重复性试验:取同一批样品制备的供试品溶液，分别进样测定，记录峰面积。结果的 RSD=0.94%(n=5)，表明方法的重复性良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液 10 μL，分别在 0，2，4，6，8，10 h时进样测定。结果的 RSD=1.01%(n=6)，表明供试品溶液中绿原酸在10 h内可保持稳定。

加样回收率试验:取同一样品(含量为4.962 5 mg/g)约0.8 g，共 6份;另精密称取绿原酸对照品 40.05 mg，置 100 mL容量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取8，10，12 mL各两份，分别置上述6份样品中，分别照供试品溶液制备方法制备待测溶液，按拟订的色谱条件进样测定。结果见表1。