不同影响因素下杜仲叶中绿原酸含量变化特征研究

2012-09-08张正香莫开林付卓锐

四川林业科技 2012年1期

杨凌，张正香，莫开林，付卓锐

(1.四川大学化工学院，四川成都 610065;2.四川省林业科学研究院，四川成都 610081)

杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)属杜仲科植物，为我国特有的单科目、单属科、单种属植物。四川是我国杜仲发源地及主产区之一，省内大部分县市均有分布。仅广元市旺苍县现有杜仲面积就超过2万hm2，早在1998年国家林业局就将旺苍县命名为“中国名特优经济林杜仲之乡”。杜仲性味甘、微辛、温，无毒，有很多保健功能，如作强壮剂、安胎药、降血压药等［1］。长期以来，杜仲仅以皮入药，杜仲资源综合利用率很低。经过国内外学者近20多年的大量研究表明:杜仲叶与皮化学成分，特别是有效成分基本一致，且杜仲叶中绿原酸的含量还高于杜仲皮。绿原酸是一种具有利胆、抗菌、降压、抗肿瘤、降脂、清除自由基等多种药理作用的物质［2］。基于绿原酸已知的药理作用、广泛的应用前景及我国我省杜仲叶资源的极其丰富，将杜仲叶提取绿原酸产业化具有很好的社会效益和经济效益。为了解不同生境，不同树龄，不同季节杜仲叶中绿原酸含量变化状况，为工业化生产时杜仲叶的采收提供科学依据，本研究分别在四川广元、蒲江杜仲基地采集杜仲叶样品，进行了不同影响因素下杜仲叶中绿原酸含量的变化特征研究［3～5］。

1 研究区域概况

研究区域主要为广元市和蒲江县。广元市属于亚热带湿润季风气候，年降雨量800 mm～1000 mm，日照数1300 h～1400 h，年平均气温17℃左右。年平均气温16.1℃，7月份气温26.1℃，1月份气温4.9℃。年平均降雨108 mm，日照1398.0 h，无霜期264.5 d，四季分明，适宜生物繁衍生息。蒲江属亚热带湿润季风气候，冬无严寒，夏无酷暑，气候温和，雨量充沛，宜种性广。年平均气温16.4℃，日照1122 h，降雨1280 mm，相对湿度84%，常年无霜期302 d。

2 材料与方法

2.1 试剂与仪器

原料:杜仲叶采自四川省蒲江县、广元市等几大杜仲基地

试剂:绿原酸标准品(中国药品生物制品检定所);其他试剂均为AR级;

仪器:紫外分光光度计(上海精密仪器厂生产的752N型)。

2.2 分析方法

目前，绿原酸的测定方法较多，本文采用紫外可见分光光度法测定杜仲叶中的绿原酸的含量。该法操作简单，相对标准偏差较小，测定结果重复性好，所得数据精确［6］。

2.2.1 最大吸收峰的确定

精确称取绿原酸标准品10mg，用纯净水稀释定容于10 ml的容量瓶中，摇匀。吸取上述标准液1 ml，用0.2 M的盐酸稀释至10 ml，以0.2 M的盐酸为空白，采用岛津UV－251紫外可见分光光度计于200 nm～400 nm波长范围扫描，结果表明该标准液在328 nm处有最大吸收峰，故选择328 nm为测定波长。

2.2.2 标准曲线制作

分别精密称取0.020 g绿原酸标准品，用纯净水稀释至 50 ml，分别取 0 ml、0.4 ml、0.8 ml、1 ml、1.2 ml、1.6 ml上述标准液，放入25 ml容量瓶中，用0.2 M的盐酸稀释至25 ml，在328 nm处测吸光度A。

通过数据处理得回归方程为:C=19.049x－0.0744，线性相关系数R=0.999。

绿原酸的含量(%)=(A×25×50)/(514×W)

式中 W——样品的重量(g);

A——吸光值。

2.2.3 样品处理及含量分析

图1 绿原酸标准曲线

每次采集的杜仲叶样品阴干后，准确称取5 g杜仲叶粉放入250 ml磨口瓶中，加入40%乙醇溶液100 ml后密闭，于80℃水浴加热提取25 min，放冷后过滤，用40%乙醇20 ml洗渣，合并提取液和洗涤液。取0.2 ml于25 ml容量瓶中，用0.2 M的盐酸稀释至刻度。在328 nm处测定吸光度A，然后求出绿原酸的含量，同时测样品的水分，然后换算出绝干叶中绿原酸的含量。