仔猪腹泻病的鉴别诊断、病毒分析及防治措施

童光志 （中国农业科学院上海兽医研究所 所长）

1 仔猪腹泻病的流行现状及特点

2010年冬季至今，我国许多猪场都发生了非常严重的仔猪腹泻，造成了较大的经济损失。该病的主要特点是：易感猪群主要为2～10日龄的新生仔猪；临床表现为严重腹泻、呕吐和脱水等，腹泻之后部分肠管充气，肠壁变薄，一些仔猪还出现了胆囊肿胀；发病率可达50%～100%，且死亡率较高；在某些猪场会反复发作，间隔时间约20天；持续时间较长，可达数月甚至半年；传统的腹泻病主要发生在较寒冷的冬季，而2012年炎热的7～8月仍有很多腹泻病发生。

2 猪腹泻病的鉴别诊断

引起腹泻的原因分为非传染性因素和传染性因素。非传染性因素包括营养性腹泻、应激、卫生条件、环境因素、母猪无乳或减食等，其中营养性腹泻主要由换料、霉菌毒素超标、生熟料交替等原因引起。传染性因素包括病毒、寄生虫、细菌和真菌等。

由于腹泻疾病的种类较多，每种病的病因和表现都有所不同 （表1），可参考流行特点、临床症状和病理变化进行初步诊断，同时结合实验室检测作出全面诊断。

3 仔猪腹泻病的病毒分析

3.1 主要病毒

目前检测到感染率较高的腹泻病毒有3种，即流行性腹泻病毒 （PEDV）、传染性胃肠炎病毒 （TGEV）和轮状病毒（RV）。

多次病料检测结果显示PEDV是腹泻的主要致病原因。2010年12月至2012年3月，使用PCR方法检测了我国部分省市71个猪场的送检病料，TGEV阳性率为50.7% （36/71），PEDV为74.6% （53/71），RV为19.7% （14/71）， 库布病毒为28.2% （20/71），其中PEDV阳性率最高，其次是TGEV和RV，库布病毒的检出率虽然很高，但健康猪群中的检出率也很高。2011年2月至2012年4月，对来自4个直辖市和23个省的119个猪场442份病料进行检测，TGEV检出率为29.2% （129/442）， PEDV为73.7% （326/442）， RV为6.8%（30/442）。通过对病毒全序列的比对，发现新流行PEDV的S基因与参考毒株存在5个不连续氨基酸的插入突变和2个连续氨基酸的缺失突变，该特征与韩国近年来流行毒株的特征相一致。因此，可以推测，国内目前的流行性病毒可能来自于韩国。虽然流行性病毒腹泻被普遍认为是此次腹泻流行的主因，但由于未分离到病毒，无法进行回归验证。

表1 猪常见腹泻病的临床鉴别诊断

进一步应用病毒宏基因组学理论，结合454高通量测序和生物信息学以研究潜在的致病因素。虽然该方法不能真实反应某一类病毒的真实感染率，但能筛选到很多未知的病原，其原理是将病料中所有病毒的序列都扩增出来，利用454进行大量测序，将序列结果在genebank中进行比对。结果显示，发病猪的病料中发现了多种病毒，来自6个省15个猪场的98份腹泻粪便样品中阳性率较高的三种病毒分别是库布病毒 （56.12%）、星状病毒 （53.06%） 和肠道病毒 （39.79%）。这三种病毒在正常猪群中都不是致病明显的病毒，但有报道称它们都可以引起腹泻。由于没有健康猪群的数据对比，无法肯定这三种病毒就是致病菌。2012年对来自河南、山东、上海、广西4个省8个猪场的20份发病猪和9份健康猪的粪便样品进行宏基因组学方法分析，结果见表2。从表中可以看出，腹泻病猪的粪便中流行性腹泻病毒是优势病毒；库布病毒在发病猪和健康猪的粪便中均可检出，且检出率相当高；X病毒是以前从未检测到的一种DNA病毒，病猪和健康猪均有检出，目前此病毒已分离得到，但还未进行回归试验。

表2 腹泻仔猪病毒群落分析

3.2 小RNA病毒和DNA病毒

引起腹泻的病毒还有库布病毒、猪博卡病毒、猪杯状病毒、猪捷申病毒和星状病毒等小RNA病毒和DNA病毒，这些病毒在猪群中的感染率非常高，但单独致病力不强，可能是潜在的腹泻病原。

库布病毒于2007年在匈牙利的猪群中首次发现，我国2009年由中国疾病预防和控制中心的于杰民等首次报道 （97/322）。猪博卡病毒于2009年首次在瑞典患仔猪断奶多系统衰竭综合征的猪体内被鉴别。上海兽医研究所在2010年建立了此病毒的PCR检测方法，并进行了流行病学调查 （75/191），发现此病毒在我国猪群中感染率也很高。该病毒从细小病毒中分离得到，也会引起腹泻。猪杯状病毒包括诺如病毒和札幌病毒，属RNA病毒。诺如病毒早在1968年于美国发现，札幌病毒于1980年在日本札幌首次报道。猪捷申病毒与肠道病毒类似，可引起轻微的腹泻，2003年和2009年在我国的猪群中均分离到该病毒。该病毒分离后进行回归试验，结果显示能引起轻微的腹泻症状。星状病毒是无囊膜的单股正链RNA病毒，病毒颗粒呈圆形，具有5～6个小角，呈星状结构。1980年，首次由Bridger通过电镜在3周龄小猪的腹泻粪样中观察到。Shimizu等 （1980）报道猪星状病毒在猪群中普遍存在，而且常同冠状病毒、嵌杯状病毒、轮状病毒等混合感染造成猪急性胃肠炎。我国上海交通大学华修国 （2010）等获得一株能在PK-15细胞上生长的星状病毒，这类病毒也会引起腹泻。

4 仔猪腹泻的防治措施

4.1 切断传播途径

腹泻的传播途径有两种，即垂直传播和水平传播。垂直传播就是母猪将疾病传染给仔猪，切断此传播途径的最好方法是不给仔猪吃母乳，但是可操作性较小。水平传播是腹泻最广泛的传播方式，且传播能力很强。目前，我国的生物安全大环境水平较低，动物的异地运输和死淘动物的处理措施还不是很规范，人员流动及猪场的消毒不彻底都存在着传播疾病的隐患。产业技术体系的相关研究人员到猪场采样，猪场将样品送出检测，这些都是易出问题的环节。一些猪场使用了不合格的疫苗，免疫后反而使其他疾病如牛的病毒性腹泻的感染率升高，这可能是因为疫苗在制作过程中使用了污染的犊牛血清，引起了病毒的水平传播。

4.2 控制好圆环病毒病和蓝耳病

目前，我国一部分猪场的圆环病毒病和蓝耳病感染率较高，且蓝耳病活疫苗使用较多后，也可能导致猪群的免疫力低下，引起潜在细菌和其他病毒的继发感染。猪感染这两种病毒后，也会发生腹泻，使腹泻的临床表现更加复杂。因而，控制好蓝耳病和圆环病毒病可间接提高猪群的抵抗力，减少腹泻病的发生。