复发性口腔溃疡与幽门螺杆菌的相关性研究

张俊祥 陈康

复发性口腔溃疡(recurrent oral ulcer，ROU)是一种长期反复发作的口腔感染性疾病之一，近年来国内外有不少学者报道，ROU的发病与幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，Hp)有一定的关联性［1］，Hp是一种革兰氏阴性微需氧菌，是消化道溃疡的重要致病因子，而口腔粘膜与胃粘膜有相似的组织学特征，因此ROU的发病与口腔内HP的感染日益引起人们的关注。为了进一步证实其相关性，笔者在常规治疗ROU的同时，利用三联法治疗HP的感染，使ROU的复发率下降，取得了较好的疗效。

临床资料与方法

1.临床资料:选取我院口腔门诊自2010年2月～2011年7月就诊的RAU患者40例作为治疗组，所有患者均HP阳性，诊断标准参照口腔内科学第4版。男27例，女13例;年龄15～56岁，平均年龄(42.4±18.7)岁。纳入标准:所有患者均有口腔溃疡病史1年以上，病程反复1年以上，至少每6周发作1次。排除标准:患其它确诊的口腔粘膜病者及较严重的系统性疾病者;不能遵医嘱用药者;有长期皮质类固醇或免疫抑制剂使用者;治疗2周内有其它抗生素使用者。随机分为治疗组与对照组，每组各20例患者，两组患者在性别、年龄，病程，治疗经过及基础性疾病差异无统计学意义，具有可比性。

2.治疗方法:对照组患者给予RAU常规治疗2周，甲硝唑0.4g/次，每日3次，局部用口腔溃疡散涂布(规格3g，北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂国药准字Z11020184)，治疗组用三联疗法治疗:枸橼酸铋钾胶囊(丽珠得乐)(0.3g×20s丽珠集团丽珠制药厂，国药准字 H10920098)饭前半小时110mg/次，每日4次;阿莫西林胶囊(0.25g×24s珠海联邦制药股份有限公司H44021351)1.0g/次，每天3次;甲硝唑0.4/次，每日3次。连续两周，局部给以溃疡散涂布。半年后复查，统计RAU复发率，半年内只要有过一次RAU，即为复发。于治疗结束后检测患者口腔中HP。治疗后半年统计两组患者的复发率。

3.HP的检测:所有患者取样前用无菌生理盐水漱口，然后用棉签蘸取RAU患者溃疡面假膜及其周围唾液1ml用无菌刮匙取溃疡，置于含生理盐水的同一试管内，液氮速冻保存待二氧化硅微粒法提取DNA。将冻存标本自液氮中取出后立即放在冰上，加标本体积3倍的结合液A及10/A玻璃奶，置于55℃恒温器上5分钟并每分钟摇动一次，以促进DNA和玻璃奶的结合。然后用离心机10000rpm离心20秒，弃上清，再加入洗涤液0.5ml，用震荡器使玻璃奶重悬。如此重复洗涤共3次，短暂离心后吸尽洗涤液，放在55℃恒温器上至完全干燥。再加入TE缓冲液30ml，混匀后在55℃恒温器上放置2分钟，12000rpm离心3分钟，小心吸出上清，4℃保存。然后进行PCR扩增，引物根据尿素酶C基因和CagA基因进行设计。最后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，凝胶中的DNA片段用银染方法显色。

4.统计学处理:采用SPSS13.0统计分析软件进行处理，阳性率的比较采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

治疗结束后，治疗组中有4例出现HP阳性，阳性率为20%，对照组有7例出现HP阳性，阳性率35%，二者差异有统计学意义，P＜0.05;治疗后半年复查，所有患者均到访，治疗组患者中有9例复发，复发率45%，对照组患者中有13例复发，复发率65%，二者差异有统计学意义(P＜0.05)。

讨 论

HP是一种革兰氏阴性、微需氧菌，它的稳定生长需要微环境中含5% －8%氧气，能够活动，特别适合于人胃内的酸性环境，它通过产生尿素酸、磷脂酶、脂肪酶等破坏胃十二指肠黏膜表面粘液层结构，损伤屏障功能，通过破坏粘液屏障引起消化道溃疡。Hp已是公认的慢性活动性胃炎的致病菌，是消化性溃疡的重要致病因子，并与胃癌及胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤密切相关。ROU是当前一种非常普遍的口腔粘膜病，发作有自限性和周期性，间歇期几天或2～3个月不等，好发于青壮年，女性多见。病因尚不十分清楚。口腔黏膜与胃黏膜同属消化系统.均来自于外胚层，其结构、功能、生理、病理有许多相似之处，其组织表面可能存在共同的抗原成分，ROU与上消化道疾病的共同病理基础，使得Hp可能是耳腔黏膜病共同的致病菌。大量研究证实ROU患者口腔中(HP的检出率明显高于正常人群，而且随着溃疡程度的加重HP的感染率明显上升［2－3］。龙宝军等［4］研究发现与其它检测技术相比，二氧化硅微粒法提取DNA具有灵敏度高，特异性好的特点。对HP的检测技术本次研究应用二氧化硅提取DNA，然后再应用PCR技术及银染色，提高了本次研究结果的可信度。我们在ROU常规治疗的同时，应用三联法治疗HP的感染，因为三联法是目前公认的治疗HP的最佳方法，患者的HP阳性率明显减低，取得了较好的疗效，使ROU的复发率明显下降，这从另一个方面说明了ROU和HP的相关性，但尚需进一步研究证明。

1 张荣.复发性口腔溃疡与幽门螺杆菌相关性的研究分析［J］.中国社区医师，2009，11(19):149.

2 张国华.抗幽门螺杆菌治疗对复发性口腔溃疡复发率的影响［J］.中外医疗，2009，(8):67.

3 孙海花，周明，马才顺，等.幽门螺杆菌在复发性口腔溃疡发病中的意义［J］.现代中西医结合杂志，2003，12(18):1936－1937，1949.

4 龙宝军，陈柯，吴补领，等.复发性口腔溃疡患者口腔幽门螺杆菌的检测［J］.南方医科大学学报，2007，27(4):477－478.