益气滋阴法治疗慢性特发性血小板减少性紫癜的临床疗效及对FAS影响的研究

孙凤，郝晶，王金环，尚溪瀛，雍彦礼，田飞，孙莹

(黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040)

特发性血小板减少性紫癜(Idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP)是一因血小板免疫性破坏，导致外周血中血小板减少的出血性疾病。以皮肤粘膜及内脏出血、血小板减少、骨髓巨核细胞发育成熟障碍、血小板生存时间缩短及抗血小板抗体出现为特征，临床上分为急性型和慢性型。近年来研究认为，CITP发病机制可能与T细胞凋亡异常有关，进而导致B细胞分泌抗体过多所致［1］。CITP以起病隐袭，症见皮肤紫斑，鼻衄，齿衄，月经淋漓不断为特点，常表现为气阴两虚之征象［2］，因而我们以益气滋阴法为治则，自拟中药方剂治疗CITP，取得了较好的临床疗效，并应用流式细胞术测定CITP患者治疗前后Fas的表达水平，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 所有患者皆来源于2008年1月～2010年4月在黑龙江中医药大学附属第一医院血液科门诊和住院的CITP患者，共30例，均符合CITP的诊断标准。30例CITP患者中男10例，女20例;年龄在11～61岁，中位年龄(29.23±18.14)岁，病程在0.5年～15年之间，血小板计数在2×109个/L～27×109个/L，平均(10.83±8.33)×109个/L。正常对照组15例。

1.2 治疗方法 给予自拟益气滋阴为主中药方剂，每日1剂，水煎服，早晚分服。药物组成为:黄芪、党参、生地黄、旱莲草、女贞子、紫草、茜草、赤芍、鸡血藤、当归、锁阳、白花蛇舌草、连翘、甘草等，并随症加减。2个月为1个疗程，2个疗程后判断疗效。

1.3 观察指标

将CITP患者的症状和体征根据《中药新药临床研究指导原则》，按无、轻、中、重分级，并给予量化处理。无症状记0分，轻度记1分，中度记2分，重度记3分。外周血血小板计数。观察CITP患者治疗前后外周血Fas的表达水平。

2 疗效判定标准

临床痊愈:中医临床症状、体征消失或基本消失，证候积分减少≥95%;显效:中医临床症状、体征明显改善，证候积分减少≥70%;有效:中医临床症状、体征均有好转，证候积分减少≥30%;无效:中医临床症状、体征均无明显改善，甚或加重，证候积分减少不足30%。

计算公式(尼莫地平法)为:［(治疗前积分－治疗后积分)÷治疗前积分］×100%

3 试验方法

应用流式细胞术测定CITP患者治疗前后Fas的表达水平。

4 统计学处理

组内比较采用配对t检验，两样本比较采用独立样本t检验，数据以均数±标准差(s)表示，采用SPSS 16.0分析试验结果，并以P＜0.05为差异具有显著性。

5 结果

5.1 益气滋阴法治疗CITP的临床疗效

CITP组30例，临床痊愈4例，显效11例，有效11例，无效4例，CITP组总有效率86.7%。

5.2 CITP患者治疗前后Fas的表达水平 结果见表1。

表1 CITP患者与正常对照组外周血Fas表达水平的比较(s)

表1 CITP患者与正常对照组外周血Fas表达水平的比较(s)

注:与正常组比较，△P＜0.05;组内治疗前后比较，*P＜0.05。

组别 n 治疗前 治疗后治疗组 30 10.41 ±3.76△ 32.78 ±8.05△＊15 56.36 ±10.76 56.36 ±10.76对照组

由表1可以看出，治疗前治疗组Fas表达水平低于对照组，与对照组相比有显著性差异(P＜0.05);治疗后治疗组Fas的表达水平升高，与治疗前比较有显著性差异(P＜0.05);治疗后治疗组与对照组相比仍有显著性差异(P＜0.05)。

6 讨论

根据CITP的发病特点和临床表现，该病病机以气阴两虚为主，故治疗时应以益气滋阴为主，选用黄芪、党参补气健脾，摄血止血;选用生地黄、旱莲草、女贞子滋补肝肾之阴，滋阴以降火;选用紫草、茜草、赤芍药凉血宁血，化瘀止血。此外在药物的选择上还结合了现代药理研究:黄芪对机体的免疫机能具有双向调节作用，可促进淋巴细胞转化，增强细胞免疫功能，还能激活NK细胞。党参及其多糖可使巨噬细胞的数量增加，细胞体积增大，伪足增多，吞噬能力增强。生地黄对下丘脑－垂体－肾上腺皮质系统具有较明显的保护作用，能减轻激素副作用并有止血功能。旱莲草即可增强免疫，又具止血作用。女贞子又增强网状内皮系统吞噬能力，增强细胞免疫和体液免疫作用。紫草、茜草具有调节免疫能力，提高机体免疫功能。

ITP是发病机制尚未完全明确的自身免疫病，近年来研究认为其发病机制与T细胞凋亡异常有关。目前认为T淋巴细胞凋亡异常是引发自身免疫病的一种重要机制。Fas表达在淋巴细胞凋亡中起非常重要作用，当Fas与FasL结合时，FasL可向胞内传递“死亡信号”，通过启动FADD(死亡结构域相关蛋白)及Caspase(天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶)家族在数小时内引起细胞凋亡［3］。伍昌林［4］等采用流式细胞仪检测ITP患儿血T细胞Fas/FasL蛋白表达，结果ITP患儿外周血T细胞Fas蛋白表达与正常对照相比明显降低，而FasL表达升高，提示ITP患儿外周血T细胞不能通过Fas/FasL途径正常凋亡，患儿体内活性T细胞增多，可能导致血小板大量损伤。盛光耀［5］等认为，临床上可考虑通过诱导外周血淋巴细胞凋亡，消除过多激活的淋巴细胞来治疗ITP。

在本次试验研究中，我们通过对正常组和CITP组疗前疗后外周血Fas表达水平的比较发现，治疗前CITP患者Fas表达水平明显低于正常人，提示CITP患者外周血T细胞不能通过Fas/FasL途径正常凋亡，导致T淋巴细胞亡不足和血小板破坏增多，表明CITP患者存在细胞免疫异常。而以益气滋阴法为主方剂可能是通过上调Fas的表达水平，促进CITP患者外周血T细胞通过Fas/FasL途径正常凋亡，以减少血小板的破坏，从而达到治疗CITP的目的。

［1］尹艳，王若晖，郝晶，等.桑椹三仙胶治疗慢性特发性血小板减少性紫癜患者前后调节性T细胞及GITR表达的变化［J］.中医药学报，2011，39(4):58 －60.

［2］李海昌，温成平，谢志军，等.特发性血小板减少性紫癜激素治疗不同阶段证型特点的研究［J］.中医药学报，2009，37(6):59－61.

［3］Denecker G，Vercammen D，Declercq W，et al.Apoptosic and necrotic cell death induced by death domain receptors［J］.Cell MolLife Sci，2001，58(3):256 －370.

［4］伍昌林，刘仿，肖红，等.特发性血小板减少性紫癜患儿外周血T细胞凋亡信号蛋白表达的临床意义［J］.实用儿科临床杂志，2005，20(9):885 －887.

［5］盛光耀，王春美.特发性血小板减少性紫癜发病机制研究进展［J］.实用儿科临床杂志，2010，25(3):157 －159.