复方中草药对西伯利亚鲟亲鱼血清生化指标的影响

齐 茜，刘晓勇，刘红柏，张 颖，张永旺，张洪玉，彭 翔，孙大江

（1.中国水产科学研究院鲟鱼繁育技术工程中心，北京 100070；2.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，哈尔滨 150070；3.中国水产科学研究院，北京 100141）

鲟鱼属亚冷水性鱼类[1-2]。我国的鲟鱼养殖业发展迅速，随着养殖规模的扩大，夏季高温季节亲鱼发病率升高，保护亲鱼安全度夏显得尤为重要。中草药相对于抗生素与化学药物，具有毒副作用小、无残留、安全性好、不会造成环境污染等特点，逐渐成为预防和治疗动物疾病的理想选择[3]。采用中草药作为饲料添加剂增强鲟亲鱼免疫力和抗病力，最大限度地减少鱼病发生，是生产绿色无公害水产品发展的需要，也是养殖户为保证养殖效益经常采取的措施。现已发现200多种中草药具有免疫促进作用[4]，关于中草药促进鲟鱼机体免疫力提高的研究较多，刘红柏等针对施氏鲟(Acipenser schrenkii)进行多种复方及单方研究[5-8]，但此方面未见西伯利亚鲟的相关研究报道。本文基于生产实际，针对夏季养殖户可能采取的鲟亲鱼疾病预防措施，以我国重要的繁殖养殖品种之一西伯利亚鲟（Acipenser baeri）为研究对象，初步研究常用清热解毒类中草药板蓝根和甘草复方对西伯利亚鲟亲鱼血液生化指标的影响，旨在为高温季节鲟亲鱼的疾病预防提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

实验用中草药来自北京鑫洋水产高新技术有限公司。健康非免疫状态下的西伯利亚鲟亲鱼来自中国水产科学研究院鲟鱼繁育技术工程中心，鱼龄为7+龄，平均体重为9～11 kg。

1.2 方法

1.2.1 中草药方剂及添加方式

复方中草药由甘草和板蓝根原材料微粉按照1:1的比例组成，以1%的剂量用520淀粉粘合剂添加入全价配合饲料，对照组投喂普通全价配合饲料。

1.2.2 试验鱼的养殖

试验在生产条件下进行，试验用池为4个半径4 m的圆形水泥池，每组2个平行，每组120尾。养殖水源为河水、井水混合水，水温25～28℃，pH 7.8。每天按鱼体重的0.5%投喂，一天2次。试验期为24 d。

1.2.3 样品采集

投喂24 d后，分别在对照组和试验组随机挑选雌雄鱼各6尾于尾动(静)脉处采集肝素抗凝血，4℃下以3 500 r·min-1离心20 min，取血清。将血清立即置-40℃保存。

1.2.4 生化指标的检测

白蛋白、溶菌酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、丙二醛、过氧化氢酶、谷草转氨酶和谷丙转氨酶检测采用南京建成生产的试剂盒，总胆固醇和甘油三脂检测采用长春回力生产的试剂盒。

1.2.5 数据的统计处理

试验数据采用SPSS11.5统计软件中的单因子方差分析进行统计。

探索建立积极有效的质量标准研究激励机制，充分调动和发挥药品生产企业和科研机构的积极性，有效借助各方力量、鼓励多方投资参与，加大药品标准的研究力度，促进药品标准提高和药品质量提升。

2 结果与分析

2.1 死亡率

试验期间，西伯利亚鲟亲鱼的死亡率为0。

2.2 中草药对血清ALB、TG和CHOL含量影响

由表1可知，试验组西伯利亚鲟雌、雄亲鱼血清ALB、CHOL和TG较对照组差异不显著（P＞0.05）。

2.3 中草药对血清LSZ及AKP活性变化影响

由表2可知，试验组西伯利亚鲟雌、雄亲鱼血清溶菌酶和碱性磷酸酶较对照组显著升高（P＜0.05），LSZ分别升高71.80%、459.28%，AKP升高62.61%、33.33%。

2.4 中草药复方对血清MDA、SOD和CAT含量影响

由表3可知，试验组西伯利亚鲟雌、雄亲鱼血清中SOD含量较对照组稍有降低，差异不显著；血清MDA含量较对照显著升高（P＜0.05）；血清CAT含量较对照组显著降低（P＜0.05）。

表1 中草药对血清白蛋白、甘油三酯和总胆固醇含量的影响Table 1 Effects of Chinese herb on the ALB、TG and CHOL contents in serum of Acipenser baeri

表2 中草药对血清溶菌酶和碱性磷酸酶含量的影响Table 2 Effects of Chinese herb on the LSZ and AKP contents in serum of Acipenser baeri

表3 中草药对血清丙二醛、超氧化物歧化酶及过氧化氢酶含量的影响Table 3 Effects of Chinese herb on the MDA、SOD and CAT contents in serum of Acipenser baeri

2.5 中草药复方对血清GOT和GPT含量的影响

结果见表4。

由表4可知，试验组雌、雄西伯利亚鲟亲鱼血清中的GOT和GPT较对照组显著升高（P＜0.05），雄鱼较对照组分别升高了144.79%、47.95%，雌鱼较对照组分别提高了76.07%、18.20%。

表4 中草药对血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶含量的影响Table 4 Effects of Chinese herb on the GOT and GPT contents in serum of Acipenser baeri

3 讨论与结论

生物体内血液生理指标与鱼体的新陈代谢、营养状况以及疾病有密切关系，当鱼体受到外界因子影响而发生生理生化或病理变化时，必定会在血液生理生化指标中反映出来[9-10]。研究表明，板蓝根含有吲哚类生物碱、芥子苷类化合物等化学成分，具有抗菌、抗病毒、抗内毒素、免疫促进等作用，甘草含有100多种化学成份，可以调和诸药，具有抗炎症、抗病毒、解毒等功效[11-12]。本试验选取甘草和板蓝根作为复方添加剂预防夏季疾病，结果显示1%的甘草和板蓝根对机体血液生化指标具有一定的调节作用。

3.1 中草药复方对血清免疫指标的影响

溶菌酶在鱼类的非特异性免疫中起着重要的作用，对革兰氏阴性菌有强烈的杀菌作用[1]。本研究中，试验组的溶菌酶较对照组显著提高，在一定程度上增强了机体的免疫力，这与刘红柏等对施氏鲟[7]、梁拥军等对宝石鲈（Scortum barcoo）[14]、周显清等对中华鳖（Pelodiscus sinensis）[15]研究一致，中草药成份增强了细胞分泌溶菌酶的能力，进而提高了血清溶菌酶活力。碱性磷酸酶是高等动物体内巨噬细胞溶酶体的标志酶，在体内直接参与磷酸基团的转移和代谢，是机体生长代谢，维持内环境稳定，维持机体健康所必需的酶，受营养状况、环境变化、疾病及生长状况的影响[16]。本研究中，试验组碱性磷酸酶活性较对照组升高，进一步在一定程度说明受中草药复方影响机体的免疫力提高。板蓝根具有增强免疫力的作用[11]，因此本试验中机体免疫力的提高可能主要与板蓝根有关，具体机理需要进一步试验验证。

3.2 中草药复方对血清抗氧化能力的影响

机体的抗氧化能力强弱与健康程度存在着密切关系。超氧化物歧化酶（SOD）能清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受损伤，对机体的氧化与抗氧化水平起至关重要作用。丙二醛（MDA）是机体被自由基氧化后的产物。在正常生理状态下，机体自由基的产生和清除处于动态平衡。因此，动态检测SOD、MDA能比较准确地反映机体内自由基的代谢状况，对判断鱼体健康状况具有重要价值[14]。本试验表明，试验组西伯利亚鲟亲鱼血清的SOD均值较对照组降低，差异不显著，MDA较对照组升高，差异显著，二者在一定程度反映机体抗氧化能力的下降。

CAT广泛存在于需氧微生物和动植物细胞中，在细胞内主要与线粒体及过氧化物结合，是一种与D-氨基酸氧化酶等一系列需氧脱氢酶相偶联的酶，它能将细胞代谢产生的毒性物质分解为水和氧。在健康的鱼体内，当CAT活性降低时，鱼体内自由基过多，可破坏体内一些重要生化过程，导致代谢混乱[17]。本试验中，CAT的含量较对照组显著降低，这和MDA含量升高的结果一致，进一步说明机体的抗氧化能力下降。

3.3 中草药复方对血清生化指标的影响

血浆中白蛋白、甘油三酯、总胆固醇等的含量反应机体营养和代谢状态。有研究表明甘草具有减少甘油三酯积聚，降低胆固醇作用[11]。但是本试验中，甘草和板蓝根复方对西伯利亚鲟亲鱼血浆中白蛋白、甘油三酯和总胆固醇含量的影响不显著，一方面可能和试验周期及试验品种的生长阶段有关，另一方面可能和中草药的使用方法有关，本实验采用微粉直接添加，不利于有效药物发挥作用，同时可能和鲟鱼肠道较短有关，不利于有效药物的吸收利用，具体机理需进一步单方试验。

3.4 药物副作用评价

谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）等血清中的酶类主要分布于机体的肝和肾等组织细胞，在正常情况下，血清中这些酶活性低而且含量相对稳定，而患病鱼血清中的含量则显著高于健康鱼。一般认为，这是病鱼的肝、肾等组织受到损伤的表现[18-21]。本试验中，试验组这两种酶较对照组相比显著升高，与刘红柏等对大黄加甘草的复方研究结果一致[9]，说明某些中药会对肝功能产生负面影响，但是具体作用机理尚需进一步深入研究。这与吉红等对黄芩素对鲤鱼健康及生长的研究一致[22]。

综上，中草药并非绝对安全，其作用可能是双向的，在增强免疫力的同时，也会给肝脏造成一定负担。因此在使用中草药时一定要慎重，以免使用不当造成危害。本试验对于夏季鲟亲鱼疾病防控和生产指导具有重要意义。

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