银杏叶片的粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱分析

杨天鸣，马雯婷，付海燕，郑岸冰，吴 燕

(中南民族大学药学院，湖北 武汉 430074)

银杏叶片是以我国特有的珍稀植物银杏叶(GinkgobilobaL.)为原料制成的薄膜衣片，主要含银杏总黄酮和银杏萜内酯，具有活血化瘀通络之功效。临床上主要用于治疗动脉硬化及高血压所致的冠状动脉供血不足、心肌梗塞、脑栓塞、脑血管痉挛等疾病[1，2]。

目前，国内外对于银杏叶片剂成分的测定大多是直接测定槲皮素、山奈酚、异鼠李素等的含量，然后经转换因子计算间接得到总黄酮苷的含量[3]，此法也是目前我国制药工业认可的评价标准。然而银杏叶片剂中含有多种有效成分，仅以总黄酮含量作为指标不能从整体上反映其内在质量。粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱法[4，5]对样品只需进行物理(粉碎)加工，不需要任何化学处理，保持了样品组成全貌，能反映样品所含各种化学组分的整体特征。作者在此应用粉末X-射线衍射法对7个厂家的银杏叶片粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱进行分析，以鉴定其质量。

1 实验

1.1 样品来源

银杏叶提取物，编号G，自制；银杏叶片：编号G-1(批号060204)，广西金嗓子药业有限公司；编号G-2(批号050602)，桂林红会制药厂；编号G-3(批号050301)，广西半宙制药股份有限公司；编号G-4(批号050601)，宁波立华制药有限公司；编号G-5(批号040522)，扬子江药业集团有限公司；编号G-6(批号040501)，山西瑞福莱药业有限公司；编号G-7(批号050501)，浙江康恩贝制药股份有限公司。

将上述样品粉碎，研磨后过200目筛，供粉末X-射线衍射分析用。

1.2 衍射实验条件

采用D8-Advance Powder型X-射线衍射仪(德国 Bruker公司)进行衍射指纹图谱分析。衍射实验条件:Cuκα1辐射，石墨单色器，管压40 kV，管流40 mA，2θ扫描范围3°～70°，扫描速度2.4°·min-1；步长0.02°，万特探测器。

2 结果与讨论

2.1 银杏叶片的粉末X-射线衍射图谱分析

在衍射实验条件下，获得银杏叶提取物和银杏叶片共8个样品的粉末X-射线衍射图谱，如图1所示。

图1 银杏叶提取物和银杏叶片样品的粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱

由布拉格公式[5]2dsinθ=λ(λ=1.5406 Å)可计算出d。实验数据以晶面间距d(Å)和相对强度(I/I0)表示，记为d/(I/I0)。

银杏叶提取物G，共59个衍射峰：15.063/100，7.494/39，7.113/48，6.686/35，6.138/34，5.633/91，5.210/37，5.033/42，4.965/39，4.759/44，4.600/44，4.513/37，4.245/36*，4.128/49，3.959/39，3.723/33，3.535/78，3.283/23，3.241/25，3.161/20，3.051/20*，2.893/49，2.867/20*，2.774/27*，2.647/16*，2.618/20，2.564/16*，2.505/16，2.444/31*，2.369/20*，2.357/16*，2.308/42*，2.249/15*，2.223/23*，2.110/13*，2.078/13*，2.041/23*，1.998/12*，1.947/19*，1.937/13*，1.905/19，1.882/11*，1.847/10*，1.819/15，1.806/11，1.768/16，1.728/9，1.713/14*，1.695/8*，1.629/7*，1.581/7*，1.552/7*，1.517/7*，1.498/6*，1.473/6*，1.452/5*，1.413/5*，1.376/6*，1.366/5*。经统计分析，确定其中32个特征衍射峰为特征共有峰，标记“*”。

银杏叶片G-1，共52个衍射峰：16.529/80，7.684/31，7.363/41，7.013/28，6.412/27，5.875/95，5.395/24，4.921/27，4.710/22，4.627/45，4.363/19，4.288/27*，4.137/18，3.968/24，3.786/18，3.614/15，3.549/37，3.427/61，3.159/11，3.094/12*，2.971/95，2.914/12，2.784/100*，2.535/9*，2.461/11，2.439/8*，2.372/8*，2.329/16*，2.276/8*，2.252/12*，2.186/8，2.169/12，2.144/8，2.123/23*，2.028/6*，1.991/8*，1.971/6*，1.950/6*，1.898/12*，1.867/7*，1.837/44，1.766/5，1.736/5，1.686/20*，1.619/4*，1.562/3*，1.553/4*，1.504/3*，1.481/3*，1.410/3*，1.390/3*，1.367/3*。其中与银杏叶提取物特征衍射峰一致的峰标记“*”(即特征共有峰)，共25个，约占银杏叶提取物特征衍射峰的78.12%。

银杏叶片G-2，共51个衍射峰：16.380/73，9.978/43，9.280/100，6.566/24，5.977/92，5.486/21，4.934/24，4.843/22，4.619/19，4.562/27，4.353/23，4.091/18，4.002/19，3.621/15，3.461/60，3.164/12，3.069/13*，2.997/91，2.902/10，2.806/81*，2.677/9*，2.595/12*，2.551/8，2.477/15*，2.365/7*，2.339/13*，2.309/7*，2.236/8*，2.180/11，2.164/7，2.134/22*，2.037/6*，1.998/8*，1.952/5*，1.906/11，1.880/6*，1.846/39*，1.771/4，1.755/5，1.732/9，1.712/5*，1.693/17*，1.617/4*，1.585/4*，1.542/4*，1.526/9*，1.492/3*，1.453/4*，1.431/3*，1.411/4*，1.369/3*。其中与银杏叶提取物特征衍射峰一致的峰标记“*”(即特征共有峰)，共26个，约占银杏叶提取物特征衍射峰的81.25%。

银杏叶片G-3，共45个衍射峰：16.529/41，9.851/25，9.218/69，7.941/18，7.515/100，6.084/13，5.964/14，5.481/11，5.094/12，4.881/13，4.596/11，4.543/17，4.255/83*，3.857/9，3.781/21，3.509/7，3.456/8，3.219/6，3.191/6，3.052/57*，2.930/6，2.861/33*，2.731/5*，2.711/5，2.673/23*，2.540/5*，2.486/14*，2.301/4*，2.266/4*，2.212/12*，2.162/4*，2.079/13*，1.965/3*，1.934/3*，1.895/10*，1.825/3，1.807/9，1.748/2，1.628/3*，1.603/2，1.542/2*，1.480/2*，1.468/2*，1.405/2*，1.375/2*。其中与银杏叶提取物特征衍射峰一致的峰标记“*”(即特征共有峰)，共21个，约占银杏叶提取物特征衍射峰的65.62%。

银杏叶片G-4，共49个衍射峰：16.479/56，7.884/25，7.383/90，6.330/21，6.201/22，5.763/24，5.627/23，5.389/20，5.038/24，4.359/17，4.210/100*，3.937/16，3.748/28，3.522/12，3.454/20，3.201/10，3.029/67*，2.986/10，2.950/10，2.842/48*，2.726/9*，2.657/34*，2.532/8*，2.509/8，2.471/16*，2.362/7*，2.309/9*，2.242/6*，2.200/16*，2.148/6*，2.094/7*，2.068/20*，1.957/5*，1.916/6*，1.886/14*，1.818/5，1.801/12，1.715/4*，1.690/4*，1.656/8，1.627/4*，1.613/9，1.599/4*，1.535/3*，1.530/4*，1.471/3*，1.445/3*，1.404/3*，1.370/3*。其中与银杏叶提取物特征衍射峰一致的峰标记“*”(即特征共有峰)，共27个，约占银杏叶提取物特征衍射峰的84.37%。

银杏叶片G-5，共41个衍射峰：16.580/79，7.303/37，6.622/36，5.776/56，5.497/52，4.662/40，4.573/43，3.882/100，3.099/23，3.064/24*，2.937/21，2.936/23，2.738/19*，2.686/20*，2.575/29*，2.537/25，2.344/19*，2.324/21*，2.291/19*，2.258/20*，2.213/18，2.154/20，2.114/19*，2.048/17*，2.004/18*，1.971/17*，1.963/17*，1.892/15*，1.882/16*，1.710/11*，1.698/12*，1.663/10，1.624/9*，1.587/9*，1.529/8*，1.504/8*，1.469/8*，1.450/7*，1.415/7*，1.409/7，1.363/7*。其中与银杏叶提取物特征衍射峰一致的峰标记“*”(即特征共有峰)，共25个，约占银杏叶提取物特征衍射峰的78.12%。

银杏叶片G-6，共42个衍射峰：16.429/100，8.180/55，7.839/55，7.150/60，7.049/57，5.751/84，5.448/71，4.847/87，4.569/68，4.387/74，4.165/66，3.873/96，3.067/37，3.056/39*，2.976/36，2.905/39，2.773/35*，2.708/35，2.613/40，2.564/39*，2.388/31*，2.342/34*，2.296/31*，2.289/32*，2.186/27，2.151/29，2.110/27*，2.076/27*，2.047/25*，1.995/27*，1.986/24*，1.944/24*，1.927/25，1.708/16，1.706/18*，1.583/13*，1.565/13*，1.487/12*，1.435/11*，1.403/11*，1.371/11*，1.364/11*。其中与银杏叶提取物特征衍射峰一致的峰标记“*”(即特征共有峰)，共21个，约占银杏叶提取物特征衍射峰的65.62%。

银杏叶片G-7，共54个衍射峰：15.021/99，7.884/52，7.546/53，7.085/63，6.769/56，5.616/82，5.290/71，4.746/86，4.710/85，4.458/66，4.226/75*，4.088/67，3.951/73，3.807/100，3.064/39*，3.042/42，2.962/38，2.813/42*，2.778/38*，2.768/41，2.758/37，2.637/38*，2.622/42，2.543/42*，2.375/33*，2.338/32*，2.309/36*，2.293/36*，2.173/29，2.168/31，2.105/28*，2.103/31，2.072/28*，2.035/29*，1.991/26*，1.963/29*，1.936/25*，1.913/28，1.880/24*，1.870/26*，1.704/17*，1.680/20*，1.613/15*，1.612/17，1.588/14*，1.571/16*，1.550/14*，1.536/13，1.486/12*，1.456/12*，1.433/12*，1.408/12*，1.391/11*，1.371/11*。其中与银杏叶提取物特征衍射峰一致的峰标记“*”(即特征共有峰)，共30个，约占银杏叶提取物特征衍射峰的93.75%。

2.2 讨论

(1)按中国药典一部(2010年版)[6]所列处方及工艺，银杏叶片为银杏叶提取物加适量辅料制成颗粒，压制成片(包糖衣或薄膜衣)，所以银杏叶提取物的粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱的几何拓扑图形和32个特征衍射峰(标记*)可作为评价银杏叶片质量的参考鉴别标准。

(2)G-1、G-2、G-3、G-4银杏叶片样品与银杏叶提取物的粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱几何拓扑图形相似，有尖锐的衍射峰，部分新峰的出现是因为生产过程中所加辅料而致。

(3)G-5、G-6、G-7银杏叶片样品的粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱几何拓扑图形相似，与银杏叶提取物的粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱几何拓扑图形不同，没有尖锐的衍射峰出现，主要表现为弥散峰，可能是加入了大量的粘合剂(如微晶纤维素)、崩解剂(如交联羧甲基纤维素钠)、硬脂酸镁等辅料成分引起了峰的重叠。

3 结论

粉末X-射线衍射通过对中成药中各种成分衍射谱的叠加，形成具有指纹性和图形拓扑的专属指纹图谱。根据银杏叶提取物的粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱的几何拓扑图形和32个特征共有峰，分析了7个厂家银杏叶片的粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱，与银杏叶提取物粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱相比，特征共有峰所占比例均超过65%，说明7个厂家生产的银杏叶片含有的主要成分与银杏叶提取物是相同的。粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱出现的差异，则源于药材产地、处方、工艺流程等的不同。不同厂家若采用相同来源药材并按药典处方比例与工艺条件控制生产，其X-衍射Fourier指纹图谱的几何拓扑规律及特征共有峰应与银杏叶提取物粉末X-射线衍射Fourier指纹图谱基本一致。

参考文献：

[1] 田季雨，刘澎涛，李斌.银杏叶提取物化学成分及药理活性研究进展[J].国外医学中医中药分册，2004，26(3)：142-145.

[2] 曹京梅.银杏叶片的药理及临床应用研究概况[J].现代中西医结合杂志，2005，14(23):3171-3172.

[3] 徐亚萍,姚彤炜,江君微.银杏叶片剂指纹图谱分析方法的建立[J].浙江大学学报(医学版)，2004，33(1)：24-30.

[4] 郑岸冰,杨天鸣,孙晓露.板蓝根颗粒的X-射线衍射Fourier指纹图谱分析[J].化学与生物工程,2007,24(6)：75-78.

[5] 田金改，王钢力，陈德昌，等.中国茜草与欧茜草的X-射线粉末衍射分析[J].分析测试学报，1999，18(1)：38-41.

[6] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)(2010年版)[M].北京：中国医药科技出版社，2010：1079-1080.