波杂山羊冻精稀释液配方及其效果试验

2012-07-11徐志伟江苏丘陵地区镇江农业科学研究所

中国畜牧业 2012年24期

文│徐志伟（江苏丘陵地区镇江农业科学研究所）

为了提高江苏丘陵地区波杂山羊品质，集中饲养优良种羊进行人工授精不失为一种好办法。但是目前所用的冻精稀释液冷冻效果一般，价格昂贵。江苏丘陵地区镇江农业科学研究所自行研制的冻精稀释液获得了良好效果，可使解冻后的精子活力高，使精液能够长期保存，便于开展省际、国际交流，提高优良公畜利用率，加速品种育成和改良。同时，在优良种畜短期后裔测定以及进行血统更新、引种、保种、降低生产成本等方面具有重要意义。

一、制备配方

波杂山羊冻精稀释液的制备配方可以在不脱离原理的前提下，进行若干改进。现将笔者探索出的4组配方作详细说明。

配方1：乳糖4.6克、葡萄糖3.1克、柠檬酸钠1.8克、三羟甲基氨基甲烷（Tris）2.42克、蒸馏水100毫升、卵黄20毫升、青霉素钾10万国际单位。最后加入5毫升甘油，混合均匀，标记为A组。

配方2：葡萄糖1.6克、蔗糖2.0克、柠檬酸1.38克、三羟甲基氨基甲烷（Tris）2.42克、蒸馏水100毫升、卵黄20毫升、青霉素钾10万国际单位。最后加入5毫升甘油，混合均匀，标记为B组。

配方3：棉子糖9.9克、柠檬酸钠2.0克、蒸馏水100毫升、卵黄18.75毫升、青霉素钾10万国际单位。最后加入5毫升甘油，混合均匀，标记为C组。

配方4：乳糖5.2克、蔗糖5.6克、乙二胺四乙酸（EDTA）0.4克、蒸馏水100毫升、卵黄15毫升、青霉素钾10万国际单位。最后加入5毫升甘油，混合均匀，标记为D组。

二、效果验证实验

1.波杂山羊采精与品质鉴定。波杂山种公羊4只用于人工采精试验。精液的品质评定包括射精量、颜色、pH值、活率，精液的品质评定方法按照常规方法进行。

2.细管冻精制备。精液采出后，一步稀释法：精液与稀释液按1∶4的比例一次加入，混合均匀后装入细管，用聚烯醇粉末封口，放入冷冻架中并用8层纱布包裹，在4℃冰箱平衡1.5小时。平衡后，取出冷冻架，在液氮罐中进行冷冻。直接投入液氮法：将分装好的精液装于液氮罐的提桶内，然后将提桶慢慢浸入液氮至细管的1/2，静止后全部浸入液氮中。

3.供试母羊同期发情。选30只徐淮山羊母羊进行同期发情处理，处理起始时间设为0天上午10时上CIDR栓（阴道海绵栓，上海计生所产），上栓同时每只羊肌注PG（氯前列烯醇）0.2毫克，于第6天下午撤栓，同时肌注PMSG（孕马血清促性腺激素）300国际单位。于撤栓后1～2天观察发情，采用后腹部系试情布的种用湖羊公羊试情，经母羊个体开始接受爬跨，具有典型发情表现者判定为发情羊，记录发情开始与结束时间，统计羊群同期发情率。

4.冻精人工授精。精液于42℃水中解冻后，采用细管专用输精器对供试母羊进行细管冻精人工授精。

5.妊娠检测。连续两个情期对供试母羊进行试情，统计返情率。

6.统计方法。实验数据用SPSS11.0软件进行分析，差异显著性检验采用T检验法。

三、结果与讨论

将采集的精液分为4份，分别用A、B、C、D四组稀释液，采用两步平衡，液氮熏蒸冷冻，湿解冻，其他条件相同。在4种稀释液中，以B组解冻后精子活力最高，D组最低。4组稀释液解冻后精子活力差异显著。通过本实验选择用一步稀释法平衡，采用 B组稀释液进行的冷冻效果最佳，解冻后精子的活力最强，基本可以用于生产实践（表1）。