Survivin在胃粘膜癌变过程中的表达及与幽门螺杆菌感染关系探讨

陕西省延安市卫生学校 （延安716000） 谈晓红 马 鹏

Survivin是凋亡抑制蛋白（Inhibitor of apoptosis protein family，IAP）家族的新成员，其能促进细胞的恶性转化、抑制细胞的凋亡，在肿瘤发生、发展过程中有重要作用［1］。HP感染是胃癌病因中最重要的环境因素之一，HP感染是胃癌的重要致癌因素已得到越来越多的研究证实，但其确切的致癌机制尚不明确，我们应用免疫组化法检测凋亡抑制基因Survivin在胃黏膜癌病变过程中的表达，探讨其在胃癌前病变和胃癌发生、发展中的作用以及与幽门螺杆菌感染的关系。

材料与方法

1 材 料 选择延安大学附属医院病理科2010～2011年间胃镜室检测及病理证实慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性、伴肠化、异型性增生各30例，年龄17～75岁，平均年龄54岁。普外科手术切除并经病理确证胃癌大体标本68例，男42例，女26例，年龄23～78（平均56岁）。早期癌23例，进展期癌45例，低未分化癌中39例，高中分化癌29例，有淋巴转移38例，无淋巴转移30例。所有患者术前均未接受化放疗。

2 研究方法 应用免疫组化法（SP法）检测Survivin在胃粘膜癌变过程中的表达情况。兔抗人Survivin多克隆抗体，购自武汉博士德生物工程有限公司。SP试剂盒及（DAB）购自北京中杉生物技术有限公司。免疫组化染色严格按照SP试剂盒说明书提供操作步骤进行，阳性对照选用已知阳性胃癌切片，用PBS代替一抗作阴性对照。HP检测 采用尿素酶试验、甲苯胺蓝染色两种方法检测HP感染情况，两种方法均为阳性者判为HP感染，两种方法均阴性者判为HP阴性，单项阳性者退出试验。

3 结果判断 所有切片的病理诊断按1978年全国胃癌病理协作组制定的标准分级进行诊断。Survivin阳性染色主要定位于细胞浆，光镜下观察，阳性染色呈棕黄色细小颗粒。两位病理科医师随机选择10个高倍镜视野，每个视野计数100个细胞，计算阳性细胞的百分率。阳性细胞的百分率＜10%为阴性（—），百分率＞10%为阳性。

4 统计学处理 统计分析应用SPSS15.0统计软件包进行，对数据进行χ2检验，检验水准以P≤0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 HP根治前后Survivin在不同胃粘膜病变中的表达率：Survivin在HP根治前从慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、伴肠化到不典型增生组织中的表达率逐渐增高分别为0、16.7%、30%、46.7%；HP根治后表达率也逐渐增高后分别为0、0、3.3%、23.3%。在慢性萎缩性胃炎伴肠化的HP根除前后阳性表达率有统计学意义（P＜0.05）。Survivin在慢性萎缩性胃炎中表达率为16.7%，低于伴肠化组但无显著性差异（P＞0.05）；与不典型不典型增生组具有显著性差异（P＜0.05）；伴肠化组与不典型不典型增生组无显著性差异（P＞0.05），见表1。

表1 Survivin在HP根治前后不同胃粘膜病变中的表达率（%）

2 胃癌及癌旁组织中Survivin阳性表达情况：Survivin在胃癌组织中表达率为70.5%，癌旁组织中Survivin表达率为29.4%，可见Survivin在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P＜0.05）

3 Survivin表达与胃癌临床病理指标的关系：Survivin在胃癌中的表达与患者性别、年龄无关（P＞0.05），与组织分化程度、有无淋巴转移及临床分期相关（P＜0.05），见表2。

表2 Survivin表达与胃癌临床病理特征指标关系

4 胃癌中Survivin表达HP的关系：68例胃癌癌旁组织中HP阳性37例，HP阴性31例，胃癌病人HP感染率为54.4%，HP阳性组Survivin表达率虽然高于HP阴性组，但无显著性差异（P＞0.05）。

讨 论

Survivin是凋亡蛋白抑制因子IAP家族的新成员。Survivin主要通过抑制Caspase家族成员的蛋白水解酶级联反应过程中位于下游的Caspase 3和Caspase 7的活性而发挥作用，Survivin还可以干扰细胞周期，调节细胞分裂增殖［2］和促进血管形成［1］。

研究证实Survivin是迄今发现最强的凋亡抑制基因，与肿瘤发生、发展及预后密切相关。本研究显示：在胃粘膜癌变过程中Survivin阳性表达率逐渐升高，特别是在不典型性增生阶段增高明显，与胃癌与慢性萎缩性胃炎有显著性差异（P＜0.05），提示在胃癌的演变过程中Survivin的凋亡抑制作用逐渐增强，发展到不典型性增生阶段后凋亡机制受到限制，部分异常细胞失去Survivin介导的凋亡控制，导致细胞凋亡和增殖失衡从而导致胃癌发生。Survivin在胃癌组织中表达率为70.5%，癌旁组织中Survivin表达率为29.4%，差异具有有显著（P＜0.05），进一步说明Survivin蛋白在胃癌发生、发展中起重要作用，Survivin在胃癌中的表达与患者性别、年龄无关（P＞0.05），与组织分化程度、有无淋巴转移及临床分期相关（P＜0.05），提示Survivin的表达可能与肿瘤的增殖和侵袭转移有关，是判断胃癌生物学行为的重要指标。

HP感染是胃癌的重要致癌因素已得到越来越多的研究证实，但确切的致癌机制仍未明确。Normarks等［3］认为HP的致胃癌机制是：HP侵入宿主防御系统，引起持续HP感染和慢性炎症，激活宿主免疫系统并通过释放NO导致DNA损伤，引起上皮细胞增生和凋亡之间的平衡紊乱，从而促进癌基因激活与抑癌基因的失活，从而导致肿瘤生长。

一般认为，HP感染是胃癌发生发展进程的首要推动因子，但主要作用于癌前病变的起始阶段。本研究结果显示，Survivin在HP根治前从慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、伴肠化到不典型增生组织中的表达率逐渐增高分别为0、16.7%、30%、46.7%；HP根治后表达率也逐渐增高后分别为0、0、3.3%、23.3%。在慢性萎缩性胃炎伴肠化的HP根除前后阳性表达率有统计学意义（P＜0.05）。提示根除HP可使部分萎缩和肠化减轻，可能预防HP相关性胃癌的发生。Survivin在慢性萎缩性胃炎中表达率为16.7%，低于伴肠化组但无显著性差异（P＞0.05）；与不典型不典型增生组具有显著性差异（P＜0.05）；伴肠化组与不典型不典型增生组无显著性差异（P＞0.05），提示根除HP能有效治疗HP相关性胃炎，如果在胃粘膜炎症及肠上皮化生阶段根除HP则能使病变逆转，HP诱导的细胞凋亡早期可能依赖Survivin基因的调控。胃癌病人HP感染率为54.4%，HP阳性组Survivin表达率虽然高于HP阴性组，但无显著性差异（P＞0.05）。提示在不典型性增生及胃癌形成后HP感染已经不再发挥作用，这与王德荣［4］等研究一致。

综上所述，Survivin蛋白的表达可能与胃癌的发展、生物学行为和预后有关，HP感染能够促进其表达，是胃癌发生的早期事件，主要作用于癌前病变的起始阶段，两者在胃癌的发生发展中可能起协同作用，进一步深入研究两者的作用机制能够为临床胃癌的诊治提供一定的依据。

［1］ Rodrfguze JA，Span SW，Ferreira CG ，et al.CRM1－mediated nuclear export determinese the cytoplasmic localization of the antiapoptotic protein Survivin［J］.Exp Cell Resl，2002，275（1）：44－53.

［2］ Honda R，Korner R，Nigg EA，et al.Exploring the functional interctions between aurora B，incenp，and surviving in mitosis［J］.Mol Biol Cell，2003，14（8）：3325－3341.

［3］ Normarks S，Nilsson C.Persistent infection with Helicobater pylori and development of gastric cancer［J］.Adv Cancer Res，2003，90（6）：63－68.

［4］ 王德荣，赵幼安，丁 浩，等.胃癌发生过程中凋亡基因Survivin与Fas表达及其与幽门螺杆菌感染的关系［J］.中华消化内镜杂志，2006，23（50）：351－354.