葛根素对短暂性前脑缺血大鼠学习能力及神经干细胞增殖的影响

陕西省人民医院神经内科（西安710068） 李志伟 穆 英 郭荷娜 郭生龙 杨 谦

神经干细胞用于治疗缺血性脑血管病已成为近年研究热点，外源性神经干细胞移植存在伦理障碍、取材不足等确定，影响其应用。研究发现雌激素能够促进内源性神经干细胞增殖和分化［1］。但长期应用雌激素存在致癌可能，制约其临床应用。葛根素临床应用广泛，且具有一定的雌激素样活性［2］，且对缺血性脑血管病有较明确的治疗效果。本研究探讨了葛根素对前脑缺血大鼠空间学习能力及神经干细胞增殖的影响。

材料和方法

1 材 料 健康雌性SD大鼠60只，体重240～260g（由西安交通大学医学院动物实验中心提供），均行双侧卵巢切除术。随机分为A、B两组。

2 方 法 Aa组为空白对照组：予腹腔注射生理盐水；Ab组为阳性对照组：予腹腔注射葛根素注射液。2周后，两组参照Edward Preston低血压联合双侧颈总动脉夹闭10min法造短暂性前脑缺血模型，术后比较两组大鼠Morris水迷宫找到平台的潜伏期时间及双侧SVZ区BrdU阳性细胞数。

B组均造前脑缺血模型，术后分两组：Ba组：空白对照组：腹腔注射生理盐水；Bb组：阳性对照组：腹腔注射丹参酮注射液。2周后比较两组大鼠Morris水迷宫找到平台的潜伏期时间双侧SVZ区BrdU阳性细胞数。

3 统计学分析 所得数据用SPSS统计软件进行两样本t检验，检验标准α＝0.05。

结 果

A组中腹腔注射葛根素组大鼠在脑缺血后Morris水迷宫找到平台的潜伏期时间较生理盐水组明显缩短，且双侧SVZ区BrdU阳性细胞数也明显增多，具有显著性差异（P＜0.001），见表1。

表1 A组两个亚组大鼠缺血后学习能力及BrdU阳性细胞数比较

B组中腹腔注射葛根素组大鼠在干预2周后Morris水迷宫找到平台的潜伏期时间较腹腔注射生理盐水组明显缩短，双侧SVZ区BrdU阳性细胞数也明显高于生理盐水组，具有显著性差异（P＜0.001），见表2。

表2 三组两个亚组大鼠缺血后学习能力评分及BrdU阳性细胞数比较

讨 论

葛根素是从豆科植物野葛根的干燥根中提取的单体－异黄酮化合物的主要成分［3］。本研究发现在大鼠脑缺血前后应用葛根素处理均能缩短Morris水迷宫找到平台的潜伏期时间，并增加其双侧SVZ区BrdU阳性细胞数。

神经干细胞具有增殖和分化为神经细胞的能力，外源性神经干细胞移植可以改善缺血后大鼠神经功能［4］。但该方法存在神经干细胞的提纯、移植排斥反应、伦理道德问题等，限制其广泛临床应用。内源性神经干细胞的增殖和分化受多种因素影响，既往研究发现雌激素能激活脑内神经干细胞，促进其增殖和分化［1］。脑缺血本身也可以促进内源性神经干细胞的增殖，既往研究发现短暂性全脑缺血和局灶性缺血都能促进SVZ区神经干细胞的增殖。葛根素为临床上广泛应用的中成药物，具有明确的雌激素样活性［2］。在缺血性脑血管病急性期葛根素对脑组织有较好的保护作用［5］，而在急性期过后葛根素可以明显改善缺血性脑血管病的预后［6］。本研究发现葛根素预处理能改善缺血后大鼠学习能力及增加双侧SVZ区神经干细胞的增殖；去卵巢大鼠脑缺血后双侧SVZ区神经干细胞明显增多，与既往研究结果相同。缺血后应用葛根素也能显著改善其学习能力，同时能进一步促进双侧SVZ区神经干细胞的增殖。认为葛根素能通过促进内源性神经干细胞增殖从而达到改善大鼠脑缺血后神经功能的作用。

［1］ Tanapat P，Hastings NB，Rees AJ，et al .Estrogen stimulates a transient increase in the number of new neurons in the dentate gyrus of the adult female rat［J］.J Neurosci，1999，19：8792－5801

［2］ 郑高利，张岳信，郑经伟.葛根素和葛根总异黄酮的雌激素样活性［J］.中药材，2002，25（8）：566－568.

［3］ 赵 凯，葛根素治疗脑梗赛41例［J］.陕西中医，2011，32（10）：1367－1368.

［4］ 刘继云，魏会平，李继红.骨髓间充质干细胞诱导为神经样细胞后对大鼠脑缺血模型修复的研究［J］.陕西医学杂志，2007，8：949－952.

［5］ 潘洪平，杨嘉珍.葛根素注射液对急性脑缺血模型大鼠脑细胞损伤的保护作用［J］.中国中药杂志，2005，30）：457－459.

［6］ 武祥顺，倪崇松.葛根素治疗缺血性脑卒中临床观察［J］.现代中西结合杂志，2003，（21）：2295.