HPLC法测定注射用头孢呋辛钠含量

袁 琦，郭新社，杨 浩

（河南大学药学院 药物分析教研室，河南 开封 475001）

头孢呋辛钠（Cefuroxime Sodium），又名头孢呋肟，为半合成的第二代头孢菌素类抗生素［1］。因其对革兰氏阴性菌的β内酰胺酶相当稳定，有穿透血脑屏障等特点。临床上广泛应用于敏感菌引起的呼吸道、泌尿系统、皮肤、软组织、骨关节及女性生殖器等组织器官的感染，对败血症、脑膜炎也有效［2-3］。

头孢呋辛钠的测定方法主要有微生物法、旋光法、紫外分光光度法、近红外光谱法和高效液相色谱法等［4-5］。其中大多数测定方法无分离能力，无法排除一些杂质的干扰，不利于监控注射用药物的使用安全性。我们建立了高效液相色谱法测定注射用头孢呋辛钠的含量。该方法操作简便、快速、重现性好，可作为样品的检测方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters－2695高效液相色谱仪（Waters公司）；Waters－2489可变波长紫外检测器（Waters公司）；UV－1600型紫外可见分光光度计（北京瑞利）；BP－211D电子天平（德国Sartorius）；色谱柱（大连伊利特科学有限公司）。

1.2 试药

头孢呋辛钠对照品（中国药品生物制品检定所30493－200704）；注射用头孢呋辛钠（规格：0.75g，批号：091009，091010，091011，河南帅克制药有限公司）；乙腈为色谱纯；醋酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠均为分析纯；水为重蒸水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱C18（5μm，4.6mm×250mm）；流动相为pH3.4的缓冲液（取0.1mol／L醋酸钠溶液50mL，加0.1mol／L的醋酸溶液至1000mL）－乙腈（86∶14）；流速1.0mL／min；检测波长254nm；进样量20μL；柱温：25℃。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 取对照品约50mg，精密称定，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品约50mg，精密称定，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得 。

2.3 破坏试验

取头孢呋辛钠对照品适量，加流动相溶解并稀释成每1mL中含100μg的溶液。取上述溶液适量，在60℃水浴中加热10min，冷却，使部分头孢呋辛转变为去氨基甲酰头孢呋辛，取20μL注入液相色谱仪，头孢呋辛钠峰与杂质峰的分离度为4.371。

2.4 方法学考察

2.4.1 专属性 取“2.2”项下各溶液按上述色谱条件进样测定，结果见图1。由图1可知，空白溶剂对主成分测定无干扰，头孢呋辛钠的出峰时间为8.315min。

图1 头孢呋辛钠溶液色谱图

2.4.2 精密度 精密称取本品适量，用流动相溶解并稀释制成0.5g／L的溶液，取20μL注入色谱仪，记录色谱图。重复测定6次，RSD值为0.24%。

2.4.3 检测限与定量限 取本品，用流动相溶解制成0.0001g／L的溶液，进样20μL分析，记录色谱图，本品的最小检测量为2ng。10∶1信噪比作为本品的定量限，即定量限为10ng。

2.4.4 线性与范围 精密称取头孢呋辛钠对照品适量，加流动相定量溶解，配制成浓度为0.75、0.60、0.50、0.40、0.25g／L的溶液，取20μL注入色谱仪，记录色谱图。以色谱峰面积为纵坐标，以溶液中头孢呋辛钠的浓度为横坐标，绘制标准曲线，见图2。回归方程为：Y＝19730707 X＋874894，r＝0.9991。结果表明，头孢呋辛钠在0.25～0.75g／L范围内，浓度与峰面积呈良好线性关系。

2.4.5 稳定性试验 按“2.2”项下方法配制供试品溶液（批号：091009），测定18h内供试品溶液稳定情况，重复测定6次。平均峰面积为20882496，RSD＝0.73%。以上结果表明，头孢呋辛钠在选定色谱条件下，于18h内稳定。

图2 头孢呋辛钠线性图

2.4.6 加样回收率实验 取9个10mL容量瓶，分别精密加入已知浓度供试品（批号：091009）溶液4.0mL，再分别加入3.0、4.0、5.0mL对照品溶液，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制备低、中、高3种质量浓度的供试品溶液，每种浓度制备3份样品。按样品测定项下方法测定含量，计算平均回收率为99.32%，RSD 值为0.28%。

2.5 含量测定

取“2.2”项下供试品约50mg，精密称定，置100mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图。测得的峰面积代入回归方程计算出供试品中C16H16N4O8S的含量，结果各批样品含量均符合规定，结果见表1。

表1 注射用头孢呋辛钠的含量测定结果（n＝3）

3 讨论

3.1 流动相的选择

按照《中国药典》（2010版）二部规定的流动相，头孢呋辛钠出峰时间约为35min，样品保留时间过长，色谱峰拖尾严重［6］。我们在实验中，以pH 3.4的醋酸盐缓冲溶液－乙腈（10∶1.6）为流动相，缩短了保留时间。破坏实验证实，在实验选定的色谱条件下，头孢呋辛钠与杂质峰能够完全分离［7］，大大降低了时间成本和溶剂的消耗。

3.2 柱温的选择

通过实验发现，柱温的变化，对头孢呋辛钠的出峰时间影响较大，故在测定头孢呋辛钠的含量时，虽然是在室温下测定，最好还是把色谱柱放入柱温箱中，以保证柱温的恒定和测定结果的准确性。

高效液相色谱法测量头孢呋辛钠的含量，方法简便，测量准确，能很好地控制药品质量，保证了临床用药的安全。

［1］高硕，杨错，王红.头孢呋辛钠药动学的研究进展［J］.中国药房，2012，23（1）：85－86.

［2］邓宝军，林诗贵，李蜀巍，等.头孢呋辛的临床抗感染研究进展［J］.中国临床药理学杂志，2000，16（5）：390－393.

［3］白林，王晓蕾，王璐，等.头孢呋辛钠与5种常用输液的配伍稳定性研究［J］.中国药师，2008，11（3）：335－336.

［4］谢守霞，董淳.旋光法测定注射用头孢呋辛钠的含量［J］.华西药学杂志，2003，18（3）：219－222.

［5］杜美菊，陈玲.荷移分光光度法测定头孢呋辛钠的含量［J］.商丘师范学院学报，2011，27（9）：71－73.

［6］国家药典委员会编.中国药典：二部［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：1188－1190.

［7］陈兆坤，胡昌勤，沈永嘉.头孢呋辛钠的氨解研究［J］.中国热带医学，2007，7（10）：1770－1771.