高原玉树地区药食两用植物芜菁的抗衰老作用

王 花 吴 萍 文绍敦

(青海卫生职业技术学院，青海 西宁 810000)

延缓衰老和探讨衰老的机制是当前医学研究的热点，而寻找天然、有效、安全、高质量，可长期服用，具有“食医同源”、“医膳同功”、延缓衰老功能的食品是如今医药领域研究方向之一。高原植物“芜菁”，是生长在海拔3 800 m以上的一种药食两用特有经济植物，有利五脏，轻身益气，常食通中，令人肥健，消食下气。日常生活观察有抗衰老作用。本文主要探讨芜菁的抗衰作用。

1 材料与方法

1.1 动物 健康清洁级小鼠140只，体重(22±2)g，雌雄各半，由青海地方病病研究所实验动物中心提供，生产许可证SCXK(青)20050001。在温度为(22±2)℃、湿度适宜、12 h光照交替的环境中饲养。自由进食标准饲料、摄水，水源为自来水。随时添加饲料，垫料为干燥洁净的细刨花，每天换水1次，2 d换垫料1次。

1.2 药物与试剂 芜菁由青海大学医学院药学系生药实验室提供;维生素E胶丸由青岛双鲸药业有限公司生产，国药准字H37023086;D-半乳糖由上海制药厂生产，批号:101016;0.9%生理盐水由山东齐都药业有限公司生产，国药准字H37020764;丙二醛(MDA)，超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒，考马斯亮蓝组织蛋白检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.3 实验样品来源及处理 实验样品为青海高原玉树地区当年产植物芜菁干燥块根，洗净、晾干、捣碎，研末，依次用水、95%乙醇、石油醚进行提取，重复回流提取2次，残渣用水煮45 min，滤取水提取液与前2次提取液合并，减压浓缩后分别将上述提取物配制成浓度为5 mg/ml的溶液，避光低温保存。

1.4 方法

1.4.1 动物分组 根据成组比较均数所需样本的公式，估计样本大约20只。将140只小鼠，雌雄各半，适应性喂养 1 w后，将小鼠雌雄分别编号，应用随机数字表分配为7组:空白对照组(空白组)、维生素E阳性对照组(VE组)、衰老模型对照组(衰老组)、芜菁水提组(水提组)、芜菁乙醇提组(醇提组)、芜菁石油醚提组(醚提组)、芜菁水醇醚混合提组(混合组)，各组20只。

1.4.2 造模 按文献〔1〕方法操作，采用 D-半乳糖皮下注射法制备小鼠亚急性衰老模型。除空白组外，其余各组小鼠每日颈背部皮下注射5%D-半乳糖生理盐水溶液，注射容量为10 ml/kg。每天1次，连续6 w，制备亚急性衰老小鼠模型。空白组颈背部皮下注射同等容量的生理盐水。动物每周称一次体重，根据体重变化调整药量。

1.4.3 给药 造模的同时，水提组、醇提组、醚提组、混合提组以每日400 mg/kg提取物灌胃，空白组、衰老组以同等容量生理盐水灌胃，VE组以VE 0.5 ml/d灌胃，连续给药42 d。每周称体重一次，根据体重调整用药量。

1.4.4 标本采集与制备 末次给药后，禁食不禁水24 h，将小鼠摘除眼球取血，取血量大约为 0.5 ml。血液肝素抗凝静置30 min，在4℃下3 000 r/min离心10 min，常规分离血清，取上层血清备用。用于血清中SOD、MDA的测定。最后断头处死小鼠。于无菌条件下迅速取出肝、胸腺、脾，用冰生理盐水冲洗后，用滤纸吸干水分，称重，部分肝制备成10%的肝组织匀浆用于GSH-Px的测定。

1.5 血清中SOD、MDA、GSH-Px的测定 参照南京建成生物工程公司试剂盒说明书的方法步骤测定。

1.6 小鼠免疫器官重量指数之测定 各组小鼠处死前称重，处死后分别取出胸腺、脾脏剥离干净后于电子天平上称重，计算各免疫器官重量的指数。

1.7 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析，两组间比较采用 LSD-t检验，数据以x±s表示。

2 结果

2.1 动物体重与外观特征的变化 实验开始前，衰老组小鼠与正常小鼠体重无差别，动物毛色白，有光泽，精神状态良好。随着实验的进展，各组小鼠体重逐渐增加，实验18 d后造模小鼠均出现皮毛稀疏，毛色无光泽，形体消瘦，反应迟缓，摄食量减少。实验结束时，空白组小鼠活泼好动，毛色光泽，饮食如常，大便为正常褐色软便。衰老组小鼠明显出现皮毛稀疏，毛色无光泽，形体消瘦，反应迟缓，摄食量减少。醚提组、醇提组和VE组小鼠外形基本无变化，活动频率如常，摄食尚可，大便为深褐色软便。混合提组、水提组小鼠毛色较暗，反应略显迟缓，少数小鼠大便稀。上述结果表明醚提组、醇提组和VE组小鼠的一般状况好于其他组小鼠。

2.2 免疫学指标脾和胸腺重量指数的影响 见表1。芜菁不同提取物组间比较，对脾指数的影响，除水提组与混合组外，各组均有统计学意义(P＜0.05)，醚提组、醇提组和混合组作用优于VE;对胸腺指数的影响，醚提组和水提组有统计学意义(P＜0.05)，芜菁不同提取组作用优于VE组。

表1 芜菁对D-gal诱导的亚急性衰老小鼠脾胸腺指数的影响(x ± s，n=20)

2.3 自由基指标的比较 对血清SOD、MDA和肝组织中GSH-Px含量的变化，见表2。芜菁不同提取组组间比较，对血清SOD、MDA和肝组织中GSH-Px含量的影响，除水提组与混合组外，各组相互之间均有统计学意义(P＜0.05)，醇提、醚提组疗效优于VE组。

表2 各组小鼠治疗后血清SOD、MDA含量、肝组织GSH-Px活力变化比较(x ± s，n=20)

3 讨论

高原植物“芜菁”是一种药食两用特有经济植物。据《晶珠本草》记载:芜菁味辛，性温;治培根病、隆病，生赤巴。《本草纲目》记载:它出自西番土谷浑。根叶苦温无毒，利五脏，轻身益气，常食通中，令人肥健，消食下气。现代医药研究表明:芜菁肉质根中含有大量的VA、VB、VC及多种糖类、氨基酸、钙、铁、磷等矿物质，具有抗缺氧、抗氧化、护肝和增强免疫功能的作用。杨红等〔2〕对新疆芜菁的初步营养分析表明，其含有丰富的维生素和微量元素，如 β-胡萝卜素、Cu、Zn、Se、Fe、Mn。黄酮类物质是芜菁茎叶中主要成分，含2.537%以上。芜菁又是十字花科植物，十字花科植物因富含营养素及多种具抗突变、抗癌活性的物质而被营养学家们所推崇。人们已从十字花科类蔬菜白菜、甘蓝等中提取出了具明显抗突变、抗癌、抗氧化作用的活性物质，如3-吲哚、萜类、单萜烯、三萜烯、亲核素等〔3〕。马龙等〔4〕研究表明新疆的芜菁可能有抗衰老的作用。因此，本文结果表明衰老小鼠的抗氧化指标的SOD和GSH-Px活性均有明显降低，MDA含量明显升高，脾和胸腺指数降低，说明衰老小鼠模型造模成功，芜菁不同提取物和VE能提高衰老小鼠抗氧化能力，且芜菁不同提取物具有直接或间接地降低机体内脂质氧化程度，增强机体清除自由基的能力，保护细胞的结构和功能的作用，从而达到改善机体物质代谢紊乱及延缓机体衰老的功效。说明芜菁对于D-半乳糖诱发的亚急性衰老模型有明显的延缓衰老作用，其具体机制有待我们进一步深入研究。将为早期预防衰老，延缓衰老提供客观的理论基础和试验依据，为临床开发研制新的延缓衰老中藏药产品奠定初步基础。

1 徐叔云，卞如镰，陈 修.药理实验方法学〔M〕.第3版.北京:人民卫生出版社，2001:1465-7.

2 杨 红.芜菁茎叶中黄酮类物质初探〔J〕.西昌高等专科学校学报，2003;15(2):118-9.

3 Wattenberg LW.Inhibition of carcinogenesis by minor dietary constituents〔J〕.Cancer Res，1992;52:2083.

4 马 龙，屈卫东，邓淑文，等.新疆芜菁抗衰老作用的实验研究〔J〕.新疆医学院学报，1998;21(1):34-7.