沙眼衣原体感染患者的衣原体抗体和热休克蛋白60抗体的测定

赵晓岚 何聚莲 林日华 李嘉彦

（1广东省广州市皮肤病防治所，广州510030；2广东省广州市人口和计划生育技术服务指导所，广州510410）

沙眼衣原体感染患者的衣原体抗体和热休克蛋白60抗体的测定

赵晓岚1何聚莲2林日华1李嘉彦1

（1广东省广州市皮肤病防治所，广州510030；2广东省广州市人口和计划生育技术服务指导所，广州510410）

目的探讨衣原体IgG抗体（CT-IgG）和衣原体热休克蛋白60的IgG抗体（C-HSP 60 IgG）与生殖道沙眼衣原体感染（GCI）的关系，探求更为准确的GCI初筛指标及其组合。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测40例GCI患者和40例健康体检者的CT-IgG和C-HSP 60 IgG的表达，并对实验结果进行单个指标和联合指标的分析。结果GCI患者组的40例患者的CT-IgG阳性为30例（75%），C-HSP 60 IgG阳性为23例（57.50%），与对照组的40例健康体检者比较，对照组的CT-IgG阳性为2例（5%），C-HSP 60 IgG阳性为5例（12.5%），2组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。CT-IgG+C-HSP 60 IgG联合组合的临床诊断价值最高，该组合的敏感度达82.5%。结论CT-IgG和C-HSP 60 IgG可用于GCI患者的临床检测，联合检测可提高CT检测的敏感度。

沙眼衣原体（CT）；生殖道沙眼衣原体感染（GCI）；衣原体IgG抗体（CT-IgG）；衣原体热休克蛋白60（C-HSP 60）

生殖道沙眼衣原体感染（genital chlamydial infections，GCI）是我国常见的性传播疾病，由沙眼衣原体（CT）感染所致，其发病率高，流行广泛，对人体的健康造成危害，已成为较为严重的公共卫生问题[1]。我们采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测GCI患者衣原体抗体（CT-IgG）、衣原体热休克蛋白抗体（C-HSP 60 IgG）的表达，了解CT-IgG和C-HSP 60 IgG在GCI中的作用及其关联性。

1 资料与方法

1.1 一般资料GCI患者组为2011年1月至2011年12月在我科就诊的GCI患者40例，用细胞培养法检测CT为阳性，结合临床症状和实验室检测均符合GCI的诊断标准；年龄19～50岁，平均年龄为29.32岁。对照组为我科就诊40例健康体检者，与对照组年龄，性别差异无统计学意义。

1.2 试剂及仪器CT-IgG试剂盒由德国wirion-serion公司提供，批号SMZ.BQ。C-HSP 60 IgG试剂由美国RB公司提供，批号15091005。实验仪器为美国ELX-800绘图酶标仪、THERMO Wellwash 4MK2洗板机。

1.3 方法分别抽取40例GCI患者和40例健康体检者外周血3ml，离心后提取上清液-20℃冷藏备用。标本均采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测，严格按操作说明进行。

1.4 检测结果分析方法

1.4.1 平行联合检测判定原则为几种检测方法中任一阳性即判断为阳性。

1.4.2 诊断检测评价指标敏感度（Se）=a/(a+c)× 100%，特异度（Sp）=d/(b+d)×100%，约登指数(youden's index)=a/(a+c)+d/(b+d)-1即灵敏度和特异度之和减1，阳性预测值（+PV）=a/(a+b)×100%，阴性预测值（-PV）=d/(c+d)×100%。其中a为各检测方法检测GCI患病组的阳性例数，b为各检测方法检测对照组的阳性例数，c为各检测方法检测GCI患病组的阴性例数，d为各检测方法检测对照组的阴性例数。

1.5 统计学方法采用χ2检验。统计软件应用SPSS 11.0软件包进行分析。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1GCI患者的CT-IgG和HSP60-IgG的阳性表达对GCI患者组和对照组的CT-IgG和C-HSP 60 IgG进行分析，经χ2检验。以P＜0.05为差异有显著性意义。在患病组中，40例GCI患者中CT-IgG阳性为30例（75%）；在对照组中，40例健康体检者中，CT-IgG阳性为2例（5%），差异有显著性意义（P＜0.05）。在患病组中，40例GCI患者中C-HSP 60 IgG阳性为23例（57.50%）；在对照组中，40例健康体检者中C-HSP 60 IgG阳性为5例（12.5%），差异有显著性意义（P＜0.05）。结果见表1。

表1GCI患者的CT-IgG和HSP 60-IgG的阳性表达[n(%)]

2.2CT-IgG和C-HSP 60 IgG在GCI患者中的检测效能综合评价分别计算CT-IgG、C-HSP 60 IgG的单项、两项平行试验的敏感度、特异度、约登指数、阳性预测值和阴性预测值。为提高试验方法的敏感度，采取两项联合起来做平行试验，即任一阳性即判断为阳性。从表中可以看出，CT-IgG+C-HSP 60 IgG联合组合的临床诊断价值最高。该组合的敏感度达82.5%。结果见表2。

表2 两种衣原体指标及联合的组合（平行试验）检测GCI患者的评价（%）

3 讨论

GCI近几年有逐年上升的趋势，国外报道为2%～47%，国内报道CT感染率为1%～34%[2]。GCI在临床上多呈隐匿发展，可无症状或出现轻微症状而不为病人所重视。在女性，CT最常侵犯宫颈上皮，其次是输卵管上皮，所以易引发宫颈炎，尿道炎，可并发输卵管炎，进而导致异位妊娠、不孕等后果。在男性，可引起尿道炎和附睾炎。男女两性均可发生衣原体直肠炎，由于生殖道感染引发的反应性关节炎（Reiter病）。CT也可导致母婴传播，感染的母亲所生婴儿可无症状，亦可发生衣原体性眼炎和衣原体性肺炎[3]。据估计，无症状感染者可能比有症状者更多，无症状感染可持续一年至数年[4-5]。沙眼衣原体无症状是沙眼衣原体迅速传播和形成慢性感染并进一步发生不可逆的纤维化而导致严重后果的主要原因。CT的致病机制是抑制宿主细胞代谢，溶解破坏细胞，并导致溶酶体酶的释放，而代谢产物的细胞毒作用，可引起变态反应和自身免疫反应。CT膜上的脂多糖（LPS）具有抗原性，在致病机制中具有重要意义。研究表明，40例CT感染的患者有30例CT-IgG阳性（75%），与正常对照组，2例CT-IgG阳性（5%），有明显统计学差异（P＜0.05），可见GCI患者感染与CT-IgG有一定的关联性。对照组中有2例CT-IgG阳性，考虑可能是临床取样或检测的误差导致假阳性。血清CT-IgG的检测，可提高临床GCI的检测阳性率，及早进行有效的治疗，减少相关的并发症及传染性。

有文献报道，CT感染所致女性宫颈炎，盆腔炎及男性的尿道炎等与其热休克蛋白的产生及其免疫学效应密切相关[6]。根据分子量的不同，热休克蛋白主要划分为HSP 70、HSP 60、HSP 90和smHSP 4个家族，其中HSP 70和HSP 60具有高度的物种保守性[7]。HSP 60存在于所有的原核及真核生物的某些细胞器中如线粒体和叶绿体、细菌或寄生物等病原体传染过程中产生的病原体衍生热休克蛋白是一种优势抗原，C-HSP 60是衣原体属特异蛋白，CT的传染过程中会经过一次热休克反应，能引起热休克蛋白含量增加[8-9]。研究表明，CT感染的患者C-HSP 60-IgG明显升高，阳性率为57.5%，而正常对照组C-HSP 60-IgG的阳性率为12.5%，2组有明显的统计学差异（P＜0.05）。C-HSP 60与人HSP 60氨基酸顺序的同源性为48%。研究发现，感染组患者中部分CT-IgG阳性者无C-HSP 60 IgG抗体产生，且对照组中也有5例出现C-HSP 60 IgG抗体阳性，这可能与C-HSP 60及人同源物所产生的自身免疫反应具有个体差异有关，以及可能与遗传因素有关。若炎症无有效的治疗方法，病情可持续发展成生殖道的纤维化，导致生殖道的梗阻、堵塞，继而导致不孕不育，对患者造成很大的生理及心理的困扰。

PCR等检测，费用较高，病人负担大，且敏感性较高，容易出现假阳性。CT-IgG的检测，费用低廉，简单快捷，值得临床推广使用。研究表明，联合CT-IgG和C-HSP 60 IgG的检测，提高了CT的阳性检测率，敏感度为82.5%，优于单纯检测CT-IgG或C-HSP 60 IgG，联合检测将有助于及早诊治GCI，减少并发症的发生。而且可以辅助从大面积人群中筛查出GCI患者，避免病人进行不必要的检查，减轻患者的痛苦和经济负担，同时也是一种简便、准确的方法，将对GCI的早期诊断和病情监测具有重要的临床意义，且卫生、经济、效益最佳，具有较强的推广价值。

[1]王千秋.重视生殖道沙眼衣原体感染的防治[J].中华皮肤科杂志,2007, 40(5):257-259.

[2]Foulds G.The phanoacokinetics of arithromycin human serum and tissuse[J]. Antimicrob Chemothber,1990,(25):73-82.

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[6]Kinnumen A,SurcelHMD.Chlamydiatrachomatis heat shockprotein-60 inducedinterferon-gammaandinterleukin-10pro-ductionininferile women[J].Clin Exp Immunol,2003,131(2):299-303.

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[8]Young RA.Stress proteins and immunology[J].Ann Rev Immunol,1990, 8(3):401-420.

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Detection of Chlamydia IgG and Chlamydial Heat Shock Protein 60 in Patients with Genital Chlamydial Infections

Zhao Xiaolan1He Julian2Lin Rihua1Li Jiayan1
(1.Guangzhou Institute of Dermatology,Guangzhou 510030,China;2.Guangzhou Institute for Population and Family Planning,Guangzhou 510410,China)

ObjectiveTo study the effects of the Chlamydia IgG(CT-IgG)and Chlamydia heat shock protein 60 IgG(C-HSP 60 IgG)in patients with genital chlamydial infections(GCI).MethodsCT-IgG and C-HSP 60 IgG were detected from 40 cases who have been diagnosed as genital chlamydial infections(GCI),and 40 cases as normal(control group)by ELISA.The results were analyzed by single test and parallel combination of two tests.ResultsThe frequency of CT-IgG dectection was significiantly higher in GCI group than in control group(75%vs 5%,P＜0.05).The frequency of C-HSP 60 dectection was significiantly higher in GCI group than in control group(57.5%vs 12.5%,P＜0.05). The sensitivity of parallel combined test of CT-IgG with C-HSP 60 IgG were 82.5%.ConclusionCT-IgG and C-HSP 60 IgG could be applied in clinical test of GCI,The sensitivity of the combination of CT-IgG+C-HSP 60 IgG were 82.5%,and it was the more precise test for GCI.

Chlamydia trachomatis(CT);Genital chlamydial infections(GCI);Chlamydia IgG(CT-IgG);Chlamydial heat shock protein 60(C-HSP 60)

10.3969/j.issn.1672-2779.2012.08.108

1672-2779（2012）-08-0155-02

：苏玲

2012-03-04）