益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊应激和免疫的影响

李 敏 吕 凯 侯生珍 郭远玉 刘阳梅

（1.青海贵南县过马营镇兽医站，青海 贵南 813101；2.青海大学农牧学院，青海 西宁 810016）

青海牧区地处高寒地带，独特的气候条件和极其严酷的自然环境，致使牧草生长期短，枯草期长达8个月之久，冬春枯草季节营养物质的匮乏严重制约着该地区畜牧业的发展，特别是藏母羊产羔期，正处于天然草场的枯草期。由于受自然环境和饲养条件等因素的制约，羔羊断奶日龄延长到5～6月龄。实施藏羔羊早期断奶，受母子隔离、食物、哺喂方式等方面的变更，容易引起藏系羔羊较强的应激反应，主要表现在食欲差、采食量下降、营养消化吸收不良，机体免疫力和抗病力下降等，部分羔羊变成僵羊，甚至死亡[1]。因此，为了挖掘藏羔羊生长潜力，满足其营养需求，设计合理藏羔羊饲料配方，促进胃肠道功能的健康发育，有效地减轻断奶应激反应,同时，人们对无公害食品、绿色食品和有机食品呼唤中，兼顾抗生素类饲料添加剂对动物和人类健康造成的危害[2-5]，应用其替代品——益康XP。益康XP中含有酶、维生素和其它营养物质及一些重要的辅助因子，可以调节和维护瘤胃内微生物生态环境，刺激体内免疫系统发育，减小应激，并对提高畜产品的品质有较好的作用，能提高动物生长性能及其生长率、采食量和饲料转化效率。

1 材料与方法

1.1 试验藏羔羊的选择与分组设计

试验选择（55±2）日龄断奶（体重 7.91±0.83 kg）藏羔羊42只，随机分为3组（每组14只，公母各半），饲喂基础日粮为粗蛋白和能量水平分别为18.02%和12.95 MJ/kg开口料。试验Ⅰ组为基础日粮，试验Ⅱ组为基础日粮+1%益康XP，试验Ⅲ组为基础日粮+0.03%莫能菌素。试验期21 d，试验设计见表1。

表1 试验设计

1.2 试验的时间与地点

试验时间：饲养试验进行于2012年3月18日～2012年4月8日。

试验地点:海北州刚察县那仁牛羊专业育肥合作社。

1.3 藏羔羊开口料组成及配方

试验根据羔羊体重和营养需要特点，参照中国肉用山羊饲养标准(2004)配制藏羔羊开口料，基础日粮配方见表2。

表2 羔羊开口料组成及营养水平

1.4 藏羔羊饲养管理

羊舍为半开放式，避风、向阳、干燥、通风良好。试验羔羊进圈舍前对圈舍进行消毒处理，以后每天进行清扫，隔天进行消毒；所有试验羔羊按常规的免疫程序进行免疫注射，并使用伊维菌素进行内寄生虫防治，使用溴氰菊酯淋浴进行外寄生虫防治。各组饲喂制度（每天饲喂羔羊 3 次 8：30、13：00 和 17：00）和方式相同，自由采食、饮水自由。

1.5 测定项目与分析方法

1.5.1 藏羔羊血样的采集

血液采集当天(55、65、75 d)，早上饲喂前，由颈静脉采血，将羔羊侧卧保定，采血部位剪毛，用75%酒精消毒，用手指压迫颈静脉，待血管怒张后刺入一次性采血器采血约5 ml。血液采集后，管口向上，垂直放置,避免振荡而造成的溶血。在室温条件下放置30～60 min，待析出血清，3500 r/min离心 15 min，收集血清，于低温-20℃冷冻，待测。

1.5.2 藏羔羊应激酶类活性的测定

血清皮质醇（Cor）：生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA酶联试剂盒)；

肌酸激酶（CK）：酶标仪法[肌酸激酶（CK）测试盒，批号 20120305]；

乳酸脱氢酶（LDH）：酶标仪法[乳酸脱氢酶（LDH）测试盒，批号20120305]；

天门冬氨酸转氨酶（AST）：赖氏法[天门冬氨酸转氨酶（AST/GOT）测试盒，批号 20120305]；

碱性磷酸酶(ALP)：酶标仪法[碱性磷酸酶（ALP）测试盒，批号20120305]。

指标按照试剂盒操作说明进行测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.5.3 藏羔羊免疫指标的测定

IgA、IgM、IgG：生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA酶联试剂盒)。

指标按照试剂盒操作说明进行测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.5.4 藏羔羊生长发育测定

早期断奶藏羔羊55、65、75 d日采食量；

早期断奶藏羔羊55、65、75 d体重,并计算日增重；

记录腹泻藏羔羊的只数,记录治疗持续时间及恢复情况。

1.6 数据处理

对试验数据采用Excel2003进行初步处理，然后用SAS 9.1软件进行统计分析，并对试验数据进行方差分析和DUNCAN法多重比较，结果均以平均数±标准差（）表示。

2 试验结果与分析

2.1 益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊应激的影响（见表 3）

表3 各组藏羔羊血清中应激酶类活性

由表3可见，在55、65、75 d时试验Ⅲ组Cor与试验Ⅰ组相比有所上升，试验Ⅱ组与试验Ⅰ组相比有所下降，各组差异不显著（P>0.05）；从 55、65、75 d，试验Ⅱ、Ⅲ组的CK、AST、LDH都有先上升后下降的趋势，CK、AST、LDH 各试验组没有显著性差异（P>0.05），但试验Ⅱ组和Ⅲ组CK在75 d时小于试验Ⅰ组，AST在

65 d时试验Ⅱ组显著低于试验Ⅲ组、LDH在75 d时试验Ⅲ组小于其它两组，ALP各试验组有先下降后上升的趋势，75 d时试验Ⅰ组和Ⅱ组大于试验Ⅲ组（P>0.05）。

2.2 益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊免疫的影响（见表 4）

表4 各组藏羔羊血清中免疫球蛋白含量

由表 4 可见,从 55、65、75 d 看各试验组 IgG、IgA、IgM 差异不显著（P>0.05），但试验Ⅱ组 IgG、IgA、IgM高于试验Ⅰ组和试验Ⅲ组。

2.3 益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊采食量的影响(见表5)

由表5可见，55～65日龄，试验Ⅰ组藏羔羊采食量最高，高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组；65～75日龄，试验Ⅱ组藏羔羊采食量最高，高于试验Ⅰ组和试验Ⅲ组。

2.4 益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊体重及日增重的影响（见表6）

由表6可见，各试验组在55日龄、65日龄和75日龄时体重没有显著性差异（P>0.05）。55～65日龄，试验Ⅰ组藏羔羊日增重显著高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组（P＜0.01）；而 65～75日龄，试验Ⅱ组藏羔羊日增重显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅲ组（P＜0.01）。

表5 藏羔羊各阶段的日采食量

2.5 益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊腹泻率的影响（见表7）

由表7可见，试验Ⅱ组藏羔羊全程腹泻率最低（14.29%），低于试验Ⅰ组（28.57%）和试验Ⅲ组，试验Ⅲ组最高(38.64%)；各试验组藏羔羊腹泻发病率最高均出现在55～65日龄,各组腹泻数（率）分别为2(14.29%)、2(14.29%)和 3（21.43%）；65～75 日龄，试验Ⅱ组藏羔羊已没有羔羊腹泻，试验Ⅰ组和试验Ⅲ组藏羔羊仍然有腹泻，腹泻数（率）分别为 2（14.29%）和 2（14.29%）。但全程各试验组均没有藏羔羊的死亡。

表6 藏羔羊各阶段的体重及日增重

表7 藏羔羊腹泻情况

3 讨论

3.1 益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊应激的影响

酶类研究应用于兽医临床,对动物疫病的诊断和愈后判断起了重要作用。研究表明血清中相关酶类测定也可作为判定应激状态的指标[1]。Moss[6]认为检验血清中一些酶活性可作为应激指标。Becker[7]等指出皮质醇在应激反应、物质代谢及维护机体内环境稳定方面起重要作用,各种应激源均可提高血清皮质醇水平,通常把它作为应激反应判定的敏感指标之一。碱性磷酸酶(ALP)是广泛分布于肝脏、骨骼、肠和肾等组织经肝脏向胆外排出的一种酶，与肝脏和骨骼的代谢密切相关。血清ALP活性的高低反映了动物的生长状况，因其是具有遗传标记的同工酶，其活性的高低可以反映生长速度和生长性能[8]。朱年华[9]、唐晓玲[10]研究表明碱性磷酸酶活性与猪的日增重呈显著正相关，AST几乎存在于所有组织中,但肝和肌肉中含量最高，肌肉、心肌和肝脏损伤，AST会升高[8]，当早期断奶幼畜应激时,会造成ALP、AST在血清中的含量和活性升高；CK是一种器官特异性酶,以骨骼肌含量最多，LDH是糖酵解途行中的重要酶,早期断奶幼畜应激腹泻时,采食量降低,肌肉能量供应不足,易造成CK与LDH从肌细胞逸出,致使CK和LDH含量升高[9-10]；周向梅等[11]研究认为血清中AST、CK、LDH酶活性,可作为判断应激状态的指标,当畜禽受到应激时，血清中这三种酶的含量和活力会升高；Janezic和Presahn等[12-13]研究发现猪应激前后CK可上升1.5～13.0倍。试验中，各试验组早期断奶藏羔羊Cor、CK、LDH、AST都有升高，说明早期断奶的藏羔羊受到一定断奶应激，但试验Ⅱ组 Cor、CK、LDH 小于试验Ⅰ组(P>0.05)，Cor、AST小于试验Ⅲ组（P>0.05），说明早期断奶藏羔羊日粮中加入益康XP可以减小应激。

3.2 益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊免疫的影响

IgG是血清中一种主要的免疫球蛋白，其含量反映机体的免疫状况，起着抗体的作用，主要在畜禽肠道中发挥功效。早期断奶的畜禽消化与免疫功能尚未发育成熟，最易受日粮中抗原与微生物抗原的刺激产生应激。免疫球蛋白在畜禽肠道中可特异性地结合细菌抗原，弱化或破坏其毒性和刺激作用，从而防止畜禽腹泻，改善生长状况[14]；IgM在大多数家畜的血清中的含量仅次于IgG,也是固定补体和增强吞噬细胞吞噬作用最有效的Ig分子，也具有肠黏膜保护作用；IgA肠道免疫系统中起核心作用，肠道分泌物中含量最丰富的免疫球蛋白。IgA与细菌结合形成抗原抗体复合物，并刺激肠道黏液的分泌，加速黏液在黏膜表面的移动，从而有助于细菌和内毒素随粪便排出。防止病原微生物等的入侵，是构成肠道黏膜免疫的重要物质基础[1，14]。试验中，各试验组 IgG、IgA、IgM 有所上升，各试验组 IgG、IgA、IgM 差异不显著（P＞0.05），但试验Ⅱ组IgG、IgA、IgM高于试验Ⅰ组和试验Ⅲ组，说明早期断奶藏羔羊日粮中加入益康XP可以提高免疫。

3.3 益康XP替代抗生素对早期断奶藏羔羊生长发育的影响

早期断奶藏羔羊与藏母羊隔离、由母乳到固体饲料的改变，羔羊易表现食欲差采食量下降，营养消化吸收不良、生长缓慢受阻，加之胃肠道尚未发育完善，容易造成腹泻[1]。陈国胜等[15]、张丽萍等[16]研究益康XP（酵母培养物）对早期断奶仔猪生长性能的影响，研究表明益康XP，能显著提高早期断奶仔猪采食量，促进动物胃肠道有益微生物生长繁殖,提高动物对饲料的消化能力,增强动物的抗病力,提高生长速度和饲料转化效率；Hughes等[17]在16头早期断奶犊牛的日粮中添加酵母培养物（2 g/kg日粮），试验84 d，试验组犊牛采食量和增重显著高于对照组（P＜0.05）；Titi等[18]、寇慧娟等[19]研究酵母培养物对羔羊生产性能的影响，酵母培养物能显著（P＜0.05）提高羔羊平均增加体质量、平均日增重，极显著(P＜0.01)提高干物质采食量。益康XP(一种酵母培养物)中含有酶、维生素和其它营养物质及一些重要的辅助因子，可以改善胃肠环境和菌种结构，促进动物胃肠道有益微生物的生长繁殖,提高饲料的利用率。本试验添加益康XP的试验组，藏羔羊采食量有所提高，日增重高于其它试验组，腹泻率明显小于其它试验组，说明益康XP能提高家畜采食量和饲料转化效率，提高其生产性能。

4 结论

通过对早期断奶藏羔羊血清中酶类活性变化分析和免疫球蛋白含量分析表明,早期断奶藏羔羊日粮中加入益康XP可以减小藏羔羊早期断奶应激，提高其免疫力；羔羊的健康与体重、日增重密切相关，尤其是羔羊腹泻，严重阻碍羔羊的生长，试验添加益康XP减小了早期断奶藏羔羊的腹泻率，提高了藏羔羊的采食能力，提高藏羔羊的日增重，因此益康XP是抗生素的一种优良的替代品。

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