饲料中不同蛋白和钙对鸡肾脏影响的研究

晁利刚 臧猛 高倩

（河南新正好生物工程有限公司，河南 郑州 450011）

鸡尿酸盐沉积症,是一种由蛋白质及嘌呤核苷酸代谢障碍引起的高尿酸血症、肾功能损害性疾病，是家禽的常见病，不同季节，不同日龄的各种家禽均可发生。尿酸盐沉积的原因有：传染病因素如肾型传染性支气管炎、传染性法氏囊病、包涵体肝炎等；营养因素如蛋白含量或钙含量过高，钙磷比例失衡，维生素缺乏等；管理因素如温度高、饮水不足，鸡舍通风不良，空气中氨气含量过高等。尿酸盐沉积症常引起鸡饮水量、采食量下降，血液中尿酸含量升高，关节肿大，行动迟缓，严重的鸡肾脏呈花斑状，内脏、关节表面及其它间质组织有大量白色尿酸盐结晶。患鸡不仅生长缓慢，生产性能降低，而且死亡率有的高达30%。

本试验通过人工试验出鸡尿酸盐沉积模型，观察肾脏临床病理变化，旨在探究禽尿酸盐沉积的机制，为开发治疗尿酸盐沉积病的新药提供指导，并为其预防提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物与分组

8日龄AA鸡60只，分为健康对照组（15只）、44%高蛋白组（15只），高钙组（15只，0.5%钙饮水）、44%高蛋白高钙组（15只，0.5%钙饮水）等4组。

1.1.2 饲料配制

鱼粉（蛋白含量 60%，product of Peru）,饲料（郑州市红门饲料有限责任公司提供），健康组喂普通肉鸡饲料，高蛋白组饲喂总蛋白为44.0%的含鱼粉饲料，高钙组饮水0.5%的钙，高蛋白高钙组饲喂总蛋白为44.0%的鱼粉饲料和钙含量0.5%的饮水。

1.1.3 试剂

钨酸钠（成都市科龙化工试剂厂，20081121）,碳酸锂（天津市风船化学试剂科技有限公司，20090511），柠檬酸钠 (天津市科密欧化学试剂开发中心，20090310），浓磷酸（天津市凯通化学试剂有限公司，20090612），浓硫酸（天津市凯通化学试剂有限公司，20070516）,乙二醇(天津市凯通化学试剂有限公司,20081106),碳酸钙(天津市科密欧化学试剂开发中心，20090925），碳酸钠(天津市科密欧化学试剂开发中心，20090416），氯化钙(天津市科密欧化学试剂开发中心，20090628）。

1.1.4 药物

尿酸对照品（北京中西远大科技有限公司生产）。

1.1.5 仪器

TU-1810紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任有限公司），TL80-1型离心沉淀机（江苏姜堰市天力医疗机械有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 体重变化计算

先随机取20只小鸡，称取每只鸡的体重，取平均值,看鸡的体重在什么数值范围内最多,平均值±5.0 g。每组鸡为15只，每组鸡体重之间的平均值差异不能超过0.5 g。

1.2.2 水重、料重的计算

鸡自由饮水和采食，记录24 h的总饮水量和总采食量，计算每只鸡每天平均的饮水量和采食量。

1.2.3 死亡率的统计

记录小鸡在造模试验中，每天死亡的只数，观察鸡死亡的高峰期。

1.2.4 血液中尿酸盐含量的测定

每组鸡采血1 ml,放入1 ml含有3.8%的草酸钠液体里面,混合均匀,12 h内测定。4组鸡血混合物样品、尿酸对照品和空白对照(蒸馏水)各组取0.5 ml，放入离心管中，加钨酸试剂4.5 ml，静止6 min，4000 r/min离心10 min,每离心管取上清液2.5 ml放入试管中,每管加0.5 ml的1 mol/l碳酸钠溶液,混匀后,放置10 min,加入0.5 ml磷钨酸应用液，混匀后室温放置20 min，用分光光度计在波长660 nm，以空白对照调零，记录各管的吸光度（λ），血清尿酸（μmol/l）=（测定管吸光度/标准管吸光度）×300×2。

1.2.5 鸡生理、病理变化

解剖小鸡，观察小鸡的消化系统、泌尿系统（特别是肾脏的变化）有什么病理变化。

2 结果与分析

2.1 试验前后鸡体重的变化（见表1）

表1 各组鸡试验前后体重变化

从表1可知：试验前每组鸡的平均体重在81.1～81.5 g,平均体重最大相差0.4 g；饲养5 d，每组鸡的体重在134.6～204.9 g，平均体重最大相差70.3 g，体重差别明显,高蛋白组每只鸡平均增重68.0 g，高钙组每只鸡平均增重58.8 g，高蛋白高钙组每只鸡平均增重53.5 g，健康对照组每只鸡平均体重增重123.7 g，这些数据说明：高蛋白和高钙影响鸡的正常生长发育，0.5%的钙比44.0%的高蛋白对鸡的生产性能影响更大，两者联用，进一步降低生产性能。从增重率上可以看出来，高蛋白高钙组增重率最低，不及健康组的一半，其生产性能明显受到抑制。

2.2 试验前后鸡饮水量和采食量的变化(见表2、表3)

表2 试验中鸡每天平均的饮水量（g）

从表2可知：给水第1 d，各组每只鸡平均饮水量变化不是很大,在56.4～68.3 g；第5 d时,饮水量最少的高钙组为30.2 g，饮水量最大的高蛋白组为116.8 g,高蛋白组是高钙组的3.9倍,是高蛋白高钙组的2.7倍,各组鸡平均饮水量差异比较显著。高蛋白组和健康对照组的鸡平均饮水量从第1 d到第5 d是逐渐增加的,高蛋白组增加了53.7 g,健康对照组增加了47.6 g；而高钙组则是逐渐递减，从第1 d的56.4 g，减到第5 d的30.2 g；高蛋白高钙组先增加再减少，但总体还是在减少。

表3 试验中鸡每天平均的采食量（g）

从表3可知：第1 d各组每只鸡的平均采食量在32.5～34.3 g，相差不超过 2.0 g，第 5 d 时，高蛋白组每只鸡的平均采食量为53.1 g，健康对照组为46.9 g，而高钙组为17.3 g，高蛋白高钙组为16.9 g，高蛋白组的每只鸡平均采食量是高蛋白高钙组的3.1倍多，是高钙组的近3.1倍。各组每只鸡的平均采食量和其饮水量呈同一趋势，即高蛋白组和健康对照组的采食量每天逐渐增加，而高钙组逐渐减少，高蛋白高钙组还是先增加后减少。

2.3 鸡死亡率的统计

模型试验中，每组鸡共15只，在5 d的试验中，高蛋白组未见死鸡，高钙组在第4 d、第5 d各死一只，高蛋白高钙组在第3 d、第4 d各死一只，第5 d死两只。高钙组的死亡率为13.33%，高蛋白高钙组的死亡率为26.67%，与有关报道相符合。

表4 试验中鸡的死亡率

2.4 试验鸡血清中尿酸盐含量的测定

用磷钨酸还原法测定血清尿酸的含量，各组鸡取1 ml鸡血于含有1 ml草酸钠试管中，经过处理，用紫外分光光度计在660 nm处测定其吸光度，并计算含量（见表 5），高蛋白尿酸含量为 297.90 μmol/l，较健康对照组 268.53 μmol/l高 29.37 μmol/l。试验几组鸡中，高蛋白高钙组血清尿酸含量最高为423.78 μmol/l，是健康对照组血清尿酸含量的1.6倍。试验各组鸡血清尿酸的含量测定结果与黎晓敏等鸡血清尿酸测定结果比较接近，与李荣誉等鸡血清尿酸测定结果相比偏低。

2.5 解剖死鸡和健康对照鸡比较病理变化

试验结束后，记录试验数据。对比各组鸡的精神状态，从健康组中解剖一只鸡，观察其肾脏变化，肾脏结果见图1，肾脏表面光滑，有光泽，颜色鲜润，块状结构分布明显，血液颜色鲜红；从高蛋白高钙组中，找一个精神萎靡的鸡，解剖并观察肾脏变化，其结果见图2，肾脏表面无光泽、发干，颜色暗淡，肾脏肿大，块状结构分布不明显，肾脏内部结构呈不规则的花纹状，血液颜色变深。

表5 尿酸含量计算

图1 健康鸡肾脏

图2 模型鸡肾脏（花斑肾）

3 讨论

3.1 尿酸盐沉积机理

一方面生物沉积，自身免疫反应，体内抗原抗体反应沉淀物在肾脏蓄积，如：当病原体(如细菌、病毒、寄生虫等)侵入鸡体后，体内的防御系统就产生抵抗这些病原体的物质，称之为抗体。在抗体抵抗抗原的过程中，抗体战胜了入侵的病原体，使疾病得以痊愈；同时也破坏自身组织，从而引发疾病，另外，抗原抗体在竞争的过程中形成抗原抗体复合物，这些已形成的复合物可在肾脏内沉积；另一方面物理沉积，是由肾功能损伤（肾炎等），导致物质不能更好的代谢，在肾脏沉积，如：钙过高或钙磷比例失调，超出机体的吸收和排泄能力。大量的钙盐就会从血液中析出，沉积在肾脏，引起肾肿。饲料配制不合理或选择原料使用不当，造成钙、磷比例增大，就会促进血钙升高，而增加肾脏排泄的负担，长时间下去会因钙盐沉积于输尿管内而引起肾脏发生病变，如肾结石和痛风病等；再一方面化学沉积，体内代谢的CO2、尿酸等物质在肾脏内与代谢的钙、镁等离子发生化学反应，形成碳酸盐或尿酸沉淀，如：饲喂高蛋白饲料造成鸡尿酸盐沉积。由于家禽摄入蛋白质的代谢终产物是尿酸 (家畜是尿素)，若血液中尿酸增多，当超出肾脏的排泄限度时，则引起尿酸在体内的蓄积；同时，由于尿酸长期和过度地刺激肾小管上皮细胞，引起黏膜变性，致使肾脏排泄障碍，又加重尿酸盐在体内的沉积。试验选用高蛋白和高钙饲料进行人工试验得出鸡尿酸盐沉积模型，可有上述理论作为依据。

3.2 尿酸盐沉积模型

试验采用高蛋白和高钙的饲料，饲喂小鸡，造成尿酸盐沉积。建立的尿酸盐沉积模型，主要通过小鸡的增重率、采食量、饮水量、死亡率、血清尿酸盐含量测定、肾脏病理变化等指标进行考察。小鸡的增重率是考察尿酸盐沉积模型的重要指标之一，小鸡分组前，体重有一定的差异，有的差异甚大，试验去除体重大、小两端的鸡，8日龄的小鸡体重平均为81.0 g，以(81.0±5.0)g选鸡分组，一方面每组鸡整体体重差异不大，另一方面每只鸡个体差异也不大，这样试验数据更科学。采食量、饮水量主要考察高蛋白、高钙对鸡生产性能的影响。死亡率和鸡临床病理变化的考察，主要更接近市场上鸡发生的尿酸盐沉积症，一方面鸡饮水采食量下降，精神萎靡，鸡排出粪便尿酸盐过多，肾脏肿大，呈花斑状等，另一方面发生尿酸盐沉积症会导致一定数量的鸡死亡，有报道称尿酸盐沉积症死亡率可达40%以上。

3.3 尿酸盐沉积模型的建立，对养禽业有重大的指导意义，在养鸡饲料配制中，注意蛋白和钙的比例，高蛋白易引起尿酸盐沉积症，影响鸡的生产性能；高钙不仅能引起尿酸盐沉积症，严重的还能引起鸡成批量死亡，即使钙磷比例适当，钙的含量也不能超过1.0%。尿酸盐沉积模型的建立，为新药的研究与开发，提供了试验依据。

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