E-cadherin和P120ctn在子宫颈癌发生发展中的意义

熊中堂 江庆萍 彭娟 熊汉真

[摘要] 目的 探讨E-cadherin和P120ctn在子宫颈癌中的表达及在其发生发展中的意义。 方法 采用免疫组化方法检测子宫颈癌组织中E-cadherin和P120ctn的表达情况，以正常子宫颈黏膜及子宫颈上皮内瘤变（CIN）黏膜作为对照。 结果 E-cadherin和P120ctn在子宫颈癌中的表达下调率高于二者在正常子宫颈黏膜及CIN黏膜中的表达下调率；E-cadherin和P120ctn在伴有淋巴结转移的子宫颈癌中的表达下调率高于二者在不伴有淋巴结转移的子宫颈癌中的表达下调率；E-cadherin和P120ctn在浸及深肌层的子宫颈癌中表达下调率高于二者在未浸及深肌层的子宫颈癌中的表达下调率。 结论 E-cadherin和P120ctn表达下调和子宫颈癌发生有关；E-cadherin和P120ctn表达下调促进子宫颈癌的侵袭与转移。

[关键词] 子宫颈癌；E-cadherin；P120ctn；免疫组化

[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2012）01-092-02

The Significance of E-cadherin and P120ctn Protein in the Tumorigenesis and Development of Cervical Carcinoma

XIONG Zhongtang JIANG Qingping PENG Juan XIONG Hanzhen

Department of Pathology, the Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou 510150, China

[Abstract] Objective To investigate the expression ofE-cadherin and P120ctn protein in cervical carcinoma and its significance in the tumorigenesis and development of cervical carcinoma. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression of E-cadherin and P120ctn protein in normal cervical epithelia, CIN cervical epithelia and cervical carcinoma. Results The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctn in cervical carcinoma was higher than in normal cervical epithelia and CIN cervical epithelia; The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctnin cervical carcinoma with lymph node metastases was higher than those wich without lymph node metastases; The down-regulation expression rate of E-cadherin and P120ctnin cervical carcinoma that invasive outer cervix was higher than those which invasive inter cervix. Conclusion The down-regulation expression of E-cadherin and P120ctn may promote the tumorigenesis and development of cervical carcinoma; The down -regulation expression of E-cadherin and P120ctn may promote the invasion and metastasis of cervical carcinoma.

[Key words] Cervical carcinoma; E-cardherin; P120ctn; Immunohistochemistry

1 资料与方法

1.1临床资料

收集广州医学院第三附属医院病理科2008~2011年存档的子宫颈癌标本58例和CIN黏膜40例，并与39例正常的子宫颈黏膜做对照。子宫颈癌中，年龄27～81岁，中位年龄48岁；高-中分化鳞癌13例，低-未分化鳞癌45例；伴淋巴结转移18例，不伴淋巴结转移40例。所有子宫颈癌患者手术前均未接受过放化疗及其它针对肿瘤的治疗。

1.2 方法

鼠抗人E-cadherin单克隆抗体（即用型）购自北京中杉金桥生物技术公司；鼠抗P120ctn单克隆抗体（浓缩型）及Max Vision试剂盒均购自福州迈新公司。

所有标本均用4%的中性甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋，切片厚4 μm，行HE和免疫组化染色。免疫组织化学标记采用Max Vision二步法，高温高压抗压修复，DAB显色。

1.3 结果

E-cadherin及P120ctn蛋白阳性为鳞状上皮细胞膜线性棕黄色颗粒沉着，根据着色强度及显色细胞比例将染色结果分-，+，++和+++级：① 按切片中细胞显色有无及深浅评分：无显色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；② 根据显色细胞的比例计分：<25%为0分，20%～50%为1分，50%～75%为2分，>75%为3分。每例结果的积分=（1）×（2）。按积分高低分为：0分为阴性(-)，1~3分为弱阳性（+），4~6分为中等阳性（++），7~9分为强阳性（+++）。

1.4 统计学处理

采用SPSS12.0统计软件进行χ2检验和等级相关分析。

2 结果

2.1 E-cadherin和P120ctn的表达情况

在正常子宫颈黏膜组织中，E-cadherin和P120ctn均呈连续线性定位与上皮细胞膜，低表达率分别为5.23%、2.56%；CIN病理中二者的表达定位与在正常黏膜中的定位模式相同，呈线性定位于细胞膜，低表达率均为2.50%；在子宫颈癌中，E-cadherin和P120ctn低表达率分别为63.79%、60.34%。E-cadherin呈线性定位于细胞膜，但P120ctn有47.37%的病例异位表达于细胞浆。两两比较发现，E-cadherin和P120ctn在子宫颈癌中的低表达率高于二者在正常子宫颈黏膜及CIN中的低表达率，二者在正常和CIN中的低表达率之间无明显差别。

2.2 E-cadherin和P120ctn蛋白表达与子宫颈癌临床病理特征的关系

分析E-cadherin和P120ctn表达与临床病理特征发现，E-cadherin在年龄大于50岁的患者中的低表达率高于在年龄小于或等于50岁中的低表达率，P120ctn的表达情况与年龄无关。E-cadherin和P120ctn在伴有淋巴结转移的子宫颈癌中的低表达率高于在不伴有淋巴结转移的子宫颈癌中的低表达率。本研究还发现E-cadherin和P120ctn表达和肿瘤侵袭深度有关，侵袭深度越深低表达率越高。E-cadherin和P120ctn表达与肿瘤的分化无关。

2.3 E-cadherin和P120ctn在子宫颈癌中表达的相关性

在子宫颈癌中，E-cadherin低表达与P120ctn低表达呈显著正相关（P<0.05）。

3 讨论

P120ctn是链蛋白家族中重要成员，定位于上皮细胞膜连接处，它与E-cadherin胞内肽段胞膜端（the juxtamen brane domain，JMP）结合构成黏蛋白-链蛋白复合体（cadherin catenin complex,CCC），其在上皮细胞间粘附、结构完整性、极性及信号转导中起重要作用[1]。诸多研究发现CCC 成员之一表达异常将引起功能改变而促进肿瘤的发生及发展。

研究发现E-cadherin及P120ctn在肿瘤中表达异常，如胃癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠癌[2]。欧海玲[3]等也发现E-cadherin和P120ctn在鼻咽癌中异常表达明显高于正常鼻腔黏膜上皮。这些结果提示E-cadherin和P120ctn的异常表达可能破坏上皮细胞的正常结构及细胞间粘附而促进癌的发生。本研究通过免疫组织化学方法研究E-cadherin、P120ctn在正常子宫颈黏膜、CIN黏膜及子宫颈癌中的表达，结果显示在子宫颈癌中，二者表达较正常子宫颈及CIN黏膜中的表达下调；二者在正常子宫颈及CIN黏膜中的表达没有差别。说明P120ctn、E-cadherin表达下调并非子宫颈肿瘤发生的早期事件；二者表达下调促进子宫颈CIN发展为子宫颈癌。其原因可能是P120ctn, E-cadherin表达异常影响CCC的正常结构，破坏了子宫颈瘤变细胞间的粘附而突破基底膜发展为癌。Bellovin等发现P120ctn在早期结肠癌细胞中表达和定位发生改变，并且与E-cadherin表达及定位异常相关[4]。本研究也发现同样现象，在47.37%的子宫颈癌中P120ctn出现了胞浆表达。有的学者认为其原因可能是E-cadherin首先表达缺失，P120ctn无法与E-cadherin结合，导致P120ctn异位表达于胞浆[5]。据此推测P120ctn表达异位可能影响CCC的正常结构及功能而引起子宫颈癌的发生。

宫颈癌的侵袭与转移是患者致死的首要原因，而上皮细胞间质转化（EMT）是上皮细胞获得运动和转移的重要原因[6]。子宫颈癌细胞侵袭与转移首先必须脱离癌细胞之间的粘附膜，而E-cadherin及P120ctn形成CCC对维持细胞间粘附及抑制EMT起重要作用。Pavis等认为P120ctn的表达改变会导致细胞黏附与增殖失调，从而诱发肿瘤侵袭与转移 [7]。研究发现在肺癌中P120ctn异常表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关[8]。本研究发现P120ctn、E-cadherin表达下调与宫颈癌的侵袭与淋巴结转移相关。二者在伴淋巴结转移及侵及深肌层病例中的低表达率分别显著高于在不伴淋巴结转移及侵及浅肌层的子宫颈癌。提示E-cadherin、P120ctn表达下调的子宫颈癌细胞间黏附失去稳定性，可能导致癌细胞间粘附力下降或发生EMT，进而促进癌细胞侵入子宫颈壁及转移至淋巴结。有研究发现E-cadherin表达缺失导致P120ctn在胞浆中异位表达，通过调节Rho-GTPases的活性而促进肿瘤的转移[9]。可见E-cadherin与P120ctn表达异常可能促进了宫颈癌的侵袭与转移。

本研究结果显示P120ctn异位表达与E-cadherin异位