氟环唑30%悬浮剂在葡萄和土壤中的残留动态研究

兰腾芳　郑尊涛　李俊凯　陈立　方祖凯　杜铁钢

摘要：分析了氟环唑（Epoxiconazole）30%悬浮剂在不同地区葡萄中的残留消解动态以及收获期葡萄中的最终残留量，为制定氟环唑在葡萄上合理使用提供科学依据。建立了乙酸乙酯或乙腈超声提取，经弗罗里硅土柱净化，采用反相高效液相色谱法分析氟环唑残留的方法。该悬浮剂在葡萄和土壤中的半衰期分别为15.9 ～17.2 d和21.2～32.5 d；在最后一次施药后30 d和40 d时葡萄中的残留量为0.05 ～0.33 mg/kg。结果表明，按推荐剂量施药，每季最多使用3次，距最后一次施药30 d时葡萄中的残留量低于0.5 mg/kg，推荐氟环唑在葡萄上的最高残留限量为 0.5 mg/kg。

关键词：氟环唑（Epoxiconazole）；消解动态；葡萄；土壤

中图分类号：S482.2；O657.7文献标识码：A文章编号：0439-8114（2012）20-4613-03

氟环唑（商品名：欧博；英文通用名：Epoxiconazole），是一种内吸性三唑类杀菌剂，由德国巴斯夫公司1983年开发[1]。它可抑制病菌麦角甾醇的合成，阻碍病菌细胞壁的形成，提高几丁质酶活性，导致真菌吸器的收缩，抑制病菌侵入。对一些禾谷类作物病害具有较好防效[2]，可用于防治香蕉、芹菜、韭菜的叶斑病，瓜类豆类的白粉病，葡萄的炭疽病、白腐病、立枯病等[3]。目前，已有氟环唑残留分析的报道。孙海滨等[4]研究了氟环唑在香蕉和土壤中的消解动态，气相色谱-氮磷检测器进行定量分析。汪红等[5]使用乙腈进行提取，弗罗里硅土固相萃取小柱进行净化及GC-ECD检测，该方法的回收率高，重现性好。沈伟健等[6]报道了气相色谱-负化学离子源质谱测定大豆和玉米中氟环唑等12种三唑类杀菌剂的残留量。关于氟环唑在葡萄上的消解动态研究目前国内尚未见到报道。本研究选择北京和杭州进行两年田间试验，采用超声波辅助提取，弗罗里硅土小柱净化，高效液相色谱-紫外检测器，建立了氟环唑的液相色谱分析方法，为准确分析葡萄中的氟环唑残留提供参考。

1材料与方法

1.1仪器与试剂

Agilent 1200型HPLC仪（美国Agilent公司，配紫外检测器），KQ-600型超声波清洗器（昆山市超声仪器公司），OSB-2000型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司），TDL-40B型离心机（江苏瑞江离心机厂），PICO-17型离心机（美国Thermo Fisher科技公司），弗罗里硅土小柱（艾杰尔 1 000 mg/6 mL）。

纯度≥99%的氟环唑标准品由上海市农药研究所提供；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯试剂。

1.2方法

1.2.1氟环唑在葡萄上残留消解动态试验葡萄生长至半果大时，以375 mg.a.i/kg（制剂800倍稀释）的剂量喷雾1次，于施药后0、1、3、5、7、10、14、21、30和45 d，采集葡萄样品，测定氟环唑在葡萄上的残留消解半衰期。

1.2.2氟环唑在土壤中残留消解动态试验选15 m2白地，以200 mg.a.i/m2喷雾施药1次，于施药后0、1、3、5、7、10、14、21、30、45和60 d，采集0～10 cm表层土，测定氟环唑在土壤中的残留消解半衰期。

1.2.3最终残留的田间试验在葡萄幼果期以后，以100.0～187.5 mg.a.i/kg（制剂333.3～625.0 mg/kg，3 000～1 600倍稀释），喷雾2～3次，施药间隔10 d，于施药后30 d和40 d采收葡萄样品。

1.2.4标准曲线的制作称取氟环唑标准品于25 mL容量瓶中，乙腈溶解，配制成1 000 mg/L母液，并稀释成不同浓度的标准工作液，4 ℃保存待用。

1.2.5葡萄样品的提取与净化 准确称取10.00 g葡萄样品于50 mL塑料离心管中，加入20 mL乙酸乙酯，涡旋1 min，超声提取10 min，3 500 r/min离心3 min，取上清液10 mL于100 mL 茄形瓶中，旋蒸近干；过弗罗里硅土小柱净化。小柱分别先用5 mL 重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）和5 mL石油醚淋洗，再用15 mL重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）溶解残渣，收集洗脱液，浓缩近干，乙腈定容至2.5 mL，过膜，待测。

1.2.6土壤样品的提取与净化准确称取10.00 g 样品于50 mL离心管中，加20 mL乙腈，涡旋1 min，超声10 min提取，准确加入5 g NaCl，手摇1 min，3 500 r/min 离心3 min，取上清液10 mL于100 mL 茄形瓶中，减压旋蒸近干；过弗罗里硅土小柱净化，小柱先用5 mL重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）活化，5 mL石油醚淋洗，再用重蒸石油醚∶丙酮（7∶3，V/V）15 mL 溶解残渣，收集洗脱液，浓缩近干，乙腈定容至2.5 mL，过膜，待测。

1.2.7测定条件色谱柱Agilent HC-C18 4.6 mm×250.0 mm，5 μm ，流动相为乙腈∶水=55∶45（V/V），流速为0.8 mL/min；检测波长215 nm；进样量20 μL，柱温为室温。

2结果与分析

2.1检测方法的回收率、最小检出限及线性范围

分别在空白葡萄及土壤样品中加入氟环唑标准样品，添加浓度分别为0.05、0.50和2.00 mg/kg，设3个平行，色谱图见图1，3个添加水平氟环唑的回收率为81%～101%，变异系数<9.98%（表1）。氟环唑的最小检出限为0.005 mg/kg。

在该色谱条件下，对0.05～5.00 mg/L的标准溶液进行测定，氟环唑峰面积与进样浓度间呈良好线性关系，在葡萄和土壤基质中标准样品的线性方程分别为：y=87.843x+16.457；y=89.361x+12.205，相关系数分别为0.999 2和0. 999 3，保留时间约为13.8 min。

2.2氟环唑在葡萄和土壤中的残留消解动态

氟环唑在北京和杭州两地葡萄中的原始沉积量分别为0.97和1.42 mg/kg，在两地土壤中的原始沉积量分别为2.48和0.41 mg/kg。数据显示随着时间的延长氟环唑的残留量逐渐下降。药后间隔期与葡萄和土壤中残留量呈指数关系，根据残留动态曲线方程Ct=C0e-kt得到列于表2的消解动态回归方程。

2.3氟环唑在葡萄和土壤中的最终残留量试验

经2011年两地试验，氟环唑按推荐剂量和高剂量施药2和3次，间隔30和40 d采收，检测结果如下：间隔30 d的葡萄中的残留量为0.06～0.33 mg/kg，间隔40 d为0.05 mg/kg。土壤中氟环唑残留量间隔30 d为0.21～0.52 mg/kg，间隔40 d为 0.06～0.25 mg/kg。

3结论

田间试验结果表明，氟环唑在葡萄中的半衰期分别为17.2 d（北京）和15.9 d（杭州），与在香蕉（半衰期为7.2～9.9 d）、苹果[7]中（半衰期为8.2～11.5 d）相比，半衰期相对较长，主要原因可能与试验期间降雨量大小、次数以及光照条件等环境因素有关。

目前，日本规定谷类中氟环唑最高残留限量值为0.5 mg/kg；澳大利亚规定梨中氟环唑最高残留允许量值为0.5 mg/kg，香蕉中氟环唑最高残留允许量值为1.0 mg/kg；新西兰规定水果中氟环唑最高残留允许量值为0.1 mg/kg；中国尚未制定氟环唑在葡萄中的最高残留允许量值。因此，在本试验的基础上，参考世界各国对氟环唑的最高残留允许量值，建议设立葡萄上氟环唑的最高残留限量为0.5 mg/kg。

参考文献：

[1] 刘丽秀，张鲁新，张亚敏.氟环唑的合成工艺与研究进展[J].山东化工，2009，38（4）：28-30.

[2] 江才鑫，陈祖伟，杨琳荣.氟环唑的合成综述[J].浙江化工，2006，37（10）：9-10.

[3] 张秀珍.氟环唑在我国的登记情况[J].山东农药信息，2012（2）：10.

[4] 孙海滨，刘艳，刘景梅.氟环唑在香蕉和土壤中的残留消解动态[J].农药，2011，50（3）：206-208.

[5] 汪红，李瑾，许超，等.气相色谱测定蔬菜水果中氟环唑的残留量[J].食品工业科技，2009，30（12）：270-275.

[6] 沈伟健，桂茜雯，余可垚，等.气相色谱-负化学离子源质谱测定大豆和玉米中12种三唑类杀菌剂的残留量[J].色谱，2009，27（1）：91-95.

[7] 刘良柱，许应明，黄永春，等.氟环唑在苹果及土壤中的残留动态研究[J].现代科学仪器，2007（1）：61-63.