阿魏酸钠对大鼠胸主动脉的非内皮依赖性血管舒张作用

何志鹏 吴琪 章顺安（等）

[摘要] 目的 研究阿魏酸钠对离体大鼠胸主动脉的影响。 方法 以等长张力的形式记录鼠主动脉及去内皮鼠主动脉对去氧肾上腺素和高钾的反应，以及阿魏酸钠对鼠主动脉及去内皮鼠主动脉的舒张作用。 结果阿魏酸钠（0.1～30 mmol/L）能使预先用浓度为（2.73±0.02）的去氧肾上腺素和浓度为（2.57±0.06）的高钾预收缩的离体主动脉环舒张（P < 0.05）；机械去除内皮后，阿魏酸钠对主动脉环的舒张效应没有明显改变。 结论 阿魏酸钠是一种非内皮依赖性的血管平滑肌细胞松弛剂。

[关键词] 阿魏酸钠；主动脉；血管舒张

[中图分类号] R961[文献标识码] A[文章编号] 1673—9701（2012）25—0021—02

Endothelium—independent vasorelaxant effect of sodium ferulate on rat thoracic aorta

HE Zhipeng WU Qi ZHANG Shunan TANG Yantian HU Ze SHI Peijia

Department of Cardiology， the Peoples Hospital of Beilun District， Ningbo 315800， China

[Abstract] Objective To investigate the effects of sodium ferulate （SF） on rat isolated thoracic aortas. Methods Isometric tension was recorded the reaction that rat aorta and endothelium—denuded aorta response to phenylephrine and high potassium， and the effect of sodium ferulate on rat aorta and de—endothelialized rat aortic diastolic function. Results SF （0.1—30 mmol/L） relaxed the isolated aortic rings precontracted with phenylephrine（PE） and high—K+ in a concentration—dependent manner with respective pD2 of 2.73±0.02 and 2.57±0.06（P < 0.05）. Mechanical removal of endotheliumdid not significantly modify the SF—induced relaxation. Conclusion These results indicate that SF acts directly as a non—selective relaxant to vascular smoothmuscle.

[Key words] Sodium ferulate；Aorta；Vasorelaxation

阿魏酸钠（SF），即3—甲氧基—4—羟基肉桂钠（C10H9O4Na），是阿魏酸（FA）的一种钠盐。体外和体内研究表明，阿魏酸钠或阿魏酸具有有益的药理作用，包括其较强的抗氧化、抗炎、抑制血小板聚集、清除自由基作用[1]。近年来，有报道阿魏酸通过提高NO的生物利用度来修复自发性高血压大鼠主动脉的内皮功能，从而降低其血压[2]，对于阿魏酸钠对血管是否有此作用报道不多，本文对此进行探讨。

1 材料与方法

1.1 主要材料

①阿魏酸钠（SF，纯度99.54%）由中国的香气化工（中国杭州）提供。去氧肾上腺素（phenylephrine，PE），乙酰胆碱（acetylcholine， ACh）购自美国Sigma公司（St Louis， MO，USA）。②SD大鼠，雄性，体重250～300 g，购自中国科学研究院（中国上海）动物实验中心。研究的程序和协议按照我们的制度指南进行。动物房里温度恒定在（23±2）℃和湿度（55±5）%，暴露12 h光照、黑暗交替周期，喂食标准饮食，不限制饮水。

1.2 方法

1.2.1 胸主动脉环的制备分离出胸主动脉，并放置在4℃ Krebs—Henseleit液（K—H，mmol/L：Nacl 118.3，KCl 4.7，MgSO4 1.2，KH2PO4 1.2，NaHCO3 25.0，CaCl2 1.25，葡萄糖11.0）。小心除去脂肪和结缔组织，将主动脉切成3～4 mm宽的环。据实验需要，采用棉签磨擦血管环内表面的方法制备去内皮血管环。

1.2.2 等距血管张力的测量在37℃装有5 mL K—H溶液的器官浴槽中，主动脉环水平悬挂于两根不锈钢丝上。用压力移动传感器连接医学实验室的6.0的多道记录仪（中国南京制造）记录等距离的张力。主动脉环被2.0 g的静息张力拉长，并允许其平衡保持60～90 min，在每个实验之前用氯化钾（60 mmol/L）刺激环至少3次直到获得可重现的最大收缩反应。初步评定现有内皮功能：用氯化钾60 mmol/L重复刺激3次，以诱发血管的最大收缩幅度。待血管环重新稳定后，用去氧肾上腺素1 μmol/L收缩血管环达峰值，加入ACh 10 μmol/L检验血管内皮完整性。若加ACh后使PE预收缩的血管环舒张80%以上认为内皮完整，舒张10%以下则认为内皮去除。

1.2.3 阿魏酸钠对去氧肾上腺素和氯化钾诱导的收缩的影响在标准K—H溶液中进行两种不同的实验设计。第一个实验：用去氧肾上腺素（1 μmol/L）和高钾（60 mmol/L）对主动脉环进行预收缩处理，一旦达到停滞期，往浴槽中加入阿魏酸钠，剂量由0.1 mmol/L逐渐增加到30 mmol/L，就可以得到阿魏酸钠诱导松弛的浓度—效应曲线。第二个实验：将（1，3，10 mmol/L）阿魏酸钠加入浴槽中，培养10 min后，将氯化钾（0～60 mmol/L） 或去氧肾上腺素1 nmol/L～10 μmol/L加入浴槽中可以得到高钾或去氧肾上腺素的浓度—效应曲线。在这两组实验中采用的都是内皮完整的主动脉环，采用去氧肾上腺素或氯化钾诱导收缩的百分比表示张力。

1.2.4 内皮细胞在阿魏酸钠诱导的松弛中的作用为了阐明内皮细胞在阿魏酸钠诱导松弛中的作用，我们研究了阿魏酸钠对用去氧肾上腺素（1 μmol/L）或氯化钾（60 mmol/L）预收缩的内皮完整的主动脉环和去内皮的主动脉环的浓度—效应关系。

1.3 统计学方法

数据采用（x±s）表示。阿魏酸钠使预收缩环达到最大松弛的50%时的浓度定义为半最大有效浓度（EC50）。由非线性回归的浓度效应曲线（曲线拟合）计算出pD2（EC50值的负对数）。采用SPSS 13.0统计软件处理数据，用两组非配对Student t—检验进行比较，P < 0.05为有统计学意义。

2 结果

阿魏酸钠（直到剂量达30 mmol/L）对大鼠主动脉环的基础张力没有影响。数据没有显示，见图1、2。阿魏酸钠对去氧肾上腺素和氯化钾诱导的收缩的影响见表1、图1A、图1B、图2A及图2B。内皮细胞在阿魏酸钠诱导的松弛中的作用见表1和图1。

表1 阿魏酸钠对去氧肾上腺素和氯化钾诱导的收缩的影响（x±s）

3 讨论

扩血管药物可分为内皮依赖和非内皮依赖两类。内皮依赖性血管扩张剂如乙酰胆碱引起血管舒张，需要内皮层的存在及它分泌的一氧化氮、前列环素、内皮依赖性超极化因子的作用[3，4]。内皮细胞功能障碍主要表现为舒张和收缩因子、促凝和抗凝物质、生长抑制和生长促进物质的生成释放不平衡，引起生理系统多方面的变化，是多种血管性疾病的关键环节[5]。研究表明，吸烟、缺乏运动、年龄增加、雌激素减少、动脉硬化、高血压、糖尿病、血脂异常、冠心病、心力衰竭、血管外科与介入治疗等多种因素，均可造成内皮细胞损伤[6]。内皮素是血管内皮释放的肽类物质，具有很强烈的收缩血管作用。过量内皮素释放可引起冠状动脉痉挛，促进心肌收缩，加重心肌缺血和心肌再灌注损伤，导致冠心病心绞痛的发生，冠状动脉痉挛还与心肌梗死和猝死的发生高度相关[7]。有研究显示，SF在改善心肌缺血的同时，可明显降低内皮素释放，增加体内一氧化氮含量，维持心血管系统恒定舒张，调节冠状动脉基本张力，保持心肌血流灌注[8]。王怡练等[9]在常规治疗不稳定型心绞痛基础上加用SF，结果该组心脏事件发生率显著降低，心电图改善和减少含服硝酸甘油例数均优于加用其他药物组（P < 0.05）。有研究显示，应用SF静脉注射2周后，心绞痛的发作次数明显少于对照组（P < 0.05），心电图缺血性ST—T改善优于对照组，且不影响心率、血压等指标，对改善不稳定型心绞痛有良好的效果，尤其是与硝酸酯类、β受体阻滞剂等合用可以增强这些药物的抗缺血作用[10]。本实验显示，阿魏酸钠呈剂量依赖性的舒张去氧肾上腺素和高钾预收缩的内皮完整的主动脉环，且机械的去除内皮后，阿魏酸钠对去氧肾上腺素和氯化钾的预收缩主动脉环的舒张作用没有明显的降低，提示阿魏酸钠的舒血管作用是非内皮依赖性的，是通过阿魏酸钠直接作用于血管平滑肌细胞实现的。

[参考文献]

[1]Wang BH，Ou—Yang JP. Pharmacological actions of sodium ferulate in cardiovascular system[J]. Cardiovascular Drug Reviews，2005，23（2）：161—172.

[2]Suzuki A，Kagawa D，Fujii A，et al.Short— and long—term effects of fer＼

[3]Vane JR，Botting RM. Secretory functions of the vascular endothelium[J].Journal of Physiology and Pharmacology，1992，43（3）：195—207.

[4]Nagao T，Vanhoutte PM. Endothelium—derived hyperpolarizing factor and endothelium—dependent relaxations[J]. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology，1993，8 （1）：1–6.

[5]Drexler H. Endothelial dysfunction：clinical implications[J]. Prog Cardiovasc Dis，1997，39（4）：287—324.

[6]叶林书. 血管内皮细胞功能紊乱研究进展[J]. 疑难病杂志，2004，3（4）：247—249.

[7]Maseri A，Davies G，Hackett D，et al. Coronary artery spasm and vasoconstriction：The case for a distrinction[J]. Circustation，1990，81：1983—1991.

[8]魏彤. 阿魏酸钠对冠心病心绞痛病人内皮素、一氧化氮的影响[J]. 医学理论与实践，2005，18（6）：627—628.

[9]王怡练，周新华，左逸夫. 阿魏酸钠治疗不稳定型心绞痛的疗效观察[J].华北煤炭医学院学报，2002，4（4）：458.

[10]纪文新，王赫楠，翟羽佳. 阿魏酸钠治疗不稳定型心绞痛疗效分析[J]. 中国误诊学杂志，2006，6（16）：3105—3106.

（收稿日期：2012—05—03）