ELISA 和CLIA检测梅毒螺旋体抗体的临床评价

刘美玲 彭慧敏 郭旭光 陈 琼

广州医学院 第三附属医院检验科，广东 广州 510150

苍白密螺旋体苍白亚种 (Treponema.pallidumsubsp.pallidum，Tp)俗称梅毒螺旋体，是人类性传播疾病(STD)梅毒 (syphilis)的病原体。梅毒是一种严重危害人类健康的性传染性疾病，其不仅严重损害人体的多个器官从而引起全身性损害［1］。梅毒主要经性接触、血液和母婴垂直途径传播，传染性强。其实验室检测是诊断和发现梅毒的主要手段［2］。当人体感染梅毒螺旋体后4～10周，血清中可产生抗类脂抗原的非特异性抗体和抗梅毒螺旋体特异抗原的抗体［3］。本文对5928份标本用酶联免疫吸附试验(enzyme－linked immunoadsordent assay;ELISA)和化学发光分析 (chemiluminescence immunoassay，CLIA)检测方法进行测定，并比对分析如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源。标本为某院2011年12月至2012年5月5928份血清标本。其中男性患者2951例，女性患者2977例，年龄0～88岁，平均年龄32.4±5.5岁。

1.2 试剂。化学发光试剂购自雅培公司，ELISA检测试剂盒购自北京华大吉比爱生物技术有限公司。

1.3 仪器。ABBOTT AXSYM Plus全自动化学发光免疫分析仪购自美国雅培公司。

1.4 方法。所有血清标本分别用ELISA法和化学发光法进行梅毒螺旋体特异性抗体血清学检测。操作严格按照试剂盒说明书进行。

2 结果

表1 ELISA和化学发光检测梅毒螺旋体抗体的结果

在5928份血清标本中，ELISA法检测阳性151例，阳性率2.55%，化学发光法检测阳性198例，阳性率3.34%，两者相比差异有统计学意义 (χ2=6.52，P＜0.05)。

3 讨论

人体感染梅毒螺旋体后机体产生两类抗体，一类是梅毒螺旋体破坏患者组织后释放一种抗原物质刺激机体产生的具有抗体物质的反应素 (非特异性梅毒螺旋体抗体，)，另一类是抗梅毒螺旋体的特异性抗体，在梅毒感染的潜伏期即产生，感染2～4周即可检出，治愈后相当长的时间内仍然存在较高的阳性率，甚至终生阳性。

临床应用中，梅毒反应素的检测 (如RPR、USR和TRUST等)一般用于观察梅毒的治疗效果、判断复发及现行感染。因检测易出现假阳性，并且在疾病非活动期和治疗后容易消失，对Ⅰ期、Ⅲ期梅毒和治疗后梅毒的检出率低，晚期梅毒时又可以转阴，因此不适用于一期梅毒早期、三期梅毒的诊断。此类试验结果必须结合梅毒螺旋体特异性抗体检测。目前梅毒螺旋体特异性抗体常用的筛查方法有酶联免疫吸附试验 (ELISA)与化学发光分析 (CLIA)等。必要时加做梅毒螺旋体抗体确证试验。

本世纪70年代中期Arakawe首次报道用发光信号进行酶免疫分析，利用发光的化学反应分析超微量物质，特别是用于临床免疫分析中检验超微量活性物质［4］。目前，这一技术已从实验室的稀有技术过渡到临床医学的常检测手段［5］。化学发光免疫分析 (Chemiluminescence Immunoassay，CLIA)是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。其检测原理与放射免疫 (RIA)和酶免疫 (EIA)相似，不同这处是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物，并借助其自身的发光强度直接进行测定［6］。

化学发光免疫分析既具有放射免疫的高灵敏度，又具有酶联免疫的操作简便、快速的特点，易于标准化操作。且测试中不使用有害的试剂，试剂保持期长，应用于生物学、医学研究和临床实验诊断工作，成为非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。国内近年来新开发的CLIA梅毒特异性抗体检查方法，采用仪器进行检测分析，结果客观准确，数据保存方便，同时也有利于对实验室进行质量控制等规范操作［7］。有报道认为，其敏感性和特异性与梅毒的确诊试验梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验 (TPPA)相当，可作为其替代试验，在临床中广泛应用［8，9］。

综上所述，与ELISA法相比，CLIA法检测梅毒螺旋体抗体操作较规范，易批量操作，漏检率低，是较为理想的梅毒筛查方法。

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［6］Yu F，Wu Y，Yu S，et al.A competitive chemiluminescence enzyme immunoassay for rapid and sensitive determination of enrofloxacin.Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc.2012.93:164－8.

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