醇提蛋黄油治疗烫伤的药效学探讨

谢欣梅，庞晓斌

（河南大学药学院 药物研究所，河南 开封 475004）

醇提蛋黄油治疗烫伤的药效学探讨

谢欣梅，庞晓斌＊

（河南大学药学院 药物研究所，河南 开封 475004）

目的观察醇提蛋黄油促进烫伤创面愈合的作用及其抗炎、抑菌效果。方法选用健康昆明种小鼠随机分为烫伤对照组、湿润烧伤膏对照组、干馏蛋黄油治疗组和醇提蛋黄油治疗组，建立小鼠背部Ⅱ度烫伤模型，观察药物对烫伤的愈合时间，考察药物的治疗效果；通过对二甲苯所致小鼠炎性耳肿实验和体外抑菌实验考察药物的抗炎效果和抑菌作用。结果与烫伤对照组相比，醇提蛋黄油能明显减少创面渗出、缩短结痂时间和愈合时间（P＜0.01），作用效果与干馏蛋黄油相近，并优于湿润烧伤膏（P＜0.05）；与对照组相比，醇提蛋黄油具有显著抗炎作用（P＜0.01），其作用效果类似干馏蛋黄油（P＞0.05）并优于湿润烧伤膏（P＜0.05）；醇提蛋黄油的体外抑菌作用明显优于其他组，尤其对金黄色葡萄球菌抑制作用明显。结论醇提蛋黄油具有明显促进实验动物烫伤创面愈合的作用。

醇提蛋黄油；烫伤；动物模型；抗炎；体外抑菌

蛋黄油（又称蛋黄脂质）是雉科动物家鸡的鲜卵经分离提取而得到的卵黄提取物，主要含有卵磷脂、脂肪酸、胆甾醇、叶酸、胡萝卜素、钙、磷、铁、锌等多种药用和营养成分［1－2］。蛋黄油具有清热解毒消肿、滋阴养血润燥、敛疮生肌长肉之功效［3－6］。蛋黄油用于治疗烧烫伤最早见于北周《集验方》治烫火烧疮方。外用或内服蛋黄油治疗疮、瘘、痢等疾的疗法，《日华子本草》、《本草纲目》、《医林纂要》、《本草品汇精要》等历代专著中屡有记载［5，7－8］。现代医药学对蛋黄油的临床应用、提取工艺、质量控制等方面均有一定的研究，对蛋黄油的临床应用报道［9－12］很多，其临床疗效是显著而确切的。但文献所指蛋黄油绝大多数为干馏法制品，醇提蛋黄油的药效学如何未见报道。我们实验分别以传统干馏法、乙醇渗漉法提取蛋黄油，通过观察药物对烫伤的治疗效果、药物的抗炎效果和抑菌作用，比较醇提蛋黄油与传统干馏蛋黄油在烧烫伤方面的疗效区别，研究醇提蛋黄油对烧烫伤创面愈合的影响和治疗作用。

1 资料

1.1 实验动物

健康昆明种小鼠，雌雄不限，体质量18～22g，由河南省实验动物中心提供。实验动物饲养在清洁级动物房。

1.2 实验药物

蛋黄油制品为实验室自行提取产物；美宝湿润烧伤膏（汕头市美宝制药有限公司产品，批号：20060502）；其他试剂均为国产分析级。

1.3 实验菌种

金黄色葡萄球菌（标准型 ATCC25923）、铜绿假单胞菌 （标准型 ATCC27853）、大肠埃希氏菌（标准型ATCC25922），由河南大学生命科学学院生物学实验室提供。

1.4 仪器

多功能渗漉提取器（上海顺义实验设备有限公司，EX－TE－03）；电子天平（北京赛多利斯仪器有限公司，型号BS224S）；电热恒温培养箱（上海益恒实验仪器有限公司，DHP－9272型）。

2 方法

2.1 蛋黄油的制备

2.1.1 干馏法制品 将煮熟后的蛋黄于坩埚内先小火后大火加热，至蛋黄变为沥青状黏稠物，有青褐色油状液体析出时，将油及时倾出。经消毒灭菌后装瓶备用，常温下保存。该制品为深褐色油状液体。

2.1.2 乙醇提取蛋黄油（渗漉法）［12－13］取鸡蛋煮熟去壳，剥取蛋黄，捣碎，用乙醇湿润装入渗漉提取器，加乙醇使其液面高出蛋黄粉2～3cm静置36h，加适量乙醇进行渗漉，回收乙醇即得蛋黄油。经消毒灭菌后装瓶备用，常温下保存。此制品为橘黄色透明油状物，味芳香。

2.2 动物烫伤模型的制备及处理

选取昆明种小鼠80只，随机分为4组：烫伤对照组、湿润烧伤膏对照组、干馏蛋黄油治疗组、醇提蛋黄油治疗组，每组20只。于实验前24h用硫化钠脱毛剂脱毛后，生理盐水洗净，用直径1.2cm、高4cm的塑料无底圆筒于脱毛处90℃水停留5s，造成Ⅱ度烫伤（病理切片证实）。烫伤后肉眼可见皮肤较白或棕黄。于烫伤0.5h后分别在烫伤部位涂抹药物2mL（2g）／只，每天给药2次，烫伤对照组不予给药。以结痂全部脱落为愈合标准，观察创面结痂时间、愈合时间及愈合动物数，进行统计学检验。

2.3 二甲苯所致小鼠炎性耳肿的实验

选取健康雄性小鼠40只，随机分为对照组、湿润烧伤膏组、干馏蛋黄油组和醇提蛋黄油组，每组10只。实验当日给小鼠左右耳前后两面涂以相应药物0.02mL／只，30min后再在右耳前后两面涂以二甲苯致炎，左耳作对照，致炎40min后处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm的打孔器打下双耳同一部位圆片，称重，以左、右耳片重量之差为肿胀程度，计算各组肿胀度，求出肿胀抑制率（%）。将对照组和给药组的肿胀程度进行统计学处理。肿胀度（mg）＝右耳片重－左耳片重；肿胀抑制率（%）＝（对照组肿胀度－给药组肿胀度）／对照组肿胀度×100%。

2.4 体外抑菌实验

2.4.1 菌液准备 取实验菌种接种到培养基中培养，取第3代营养琼脂培养基新鲜培养物（18～24h），将制成的菌悬液用细菌浓度比浊法使其菌浓度稀释至1×106CFU／mL。

2.4.2 抑菌圈直径测定（琼脂扩散法） 取直径为12cm的平皿，倾入琼脂培养基15mL，冷凝后用灭菌的棉球蘸取供试菌液，均匀涂布于培养基表面，待培养基表面干燥后用直径为6mm的打孔器在琼脂平皿上打孔，除去孔内琼脂。每种药液设5孔，药液分别为生理盐水、湿润烧伤膏、干馏蛋黄油、醇提蛋黄油，每孔加15μL药物。于37℃培养24h后取出，测定抑菌圈直径，并求出每种药液5个孔抑菌圈直径的平均值。

2.5 数据统计分析

3 结果与分析

3.1 药物对小鼠实验性烫伤的影响

药物实验表明，造模后多数动物出现不同程度全身颤抖现象，涂抹蛋黄油2min后全身颤抖现象渐减弱至停止，表明蛋黄油有明显的止痛作用。实验结果表明，与烫伤对照组相比，醇提蛋黄油组结痂时间、愈合时间有显著差异（P＜0.01），与干馏蛋黄油组无明显差异（P＞0.05），其烫伤创面愈合速度优于湿润烧伤膏组（P＜0.05），表明醇提蛋黄油具有明显促进烫伤创面愈合的作用，见表1。

表1 药物对小鼠实验性烫伤的影响（，n＝20）

表1 药物对小鼠实验性烫伤的影响（，n＝20）

注：与烫伤对照组比较，＊P＜0.01；与湿润烧伤膏对照组比较，＃P＜0.05。

组别 结痂时间／d 愈合时间／d烫伤对照组7.7±0.6 18.9±0.9湿润烧伤膏对照组 5.7±1.4＊ 15.4±1.3＊干馏蛋黄油治疗组 4.1±0.5＊＃ 14.0±1.5＊＃醇提蛋黄油治疗组 3.9±0.6＊＃ 13.3±1.1＊＃

3.2 药物对二甲苯所致小鼠炎性耳肿作用的影响

与对照组相比，醇提蛋黄油、干馏蛋黄油、湿润烧伤膏对二甲苯所致小鼠炎性耳肿均有明显抑制作用（P＜0.01），醇提蛋黄油抗炎效果优于湿润烧伤膏（P ＜0.05），与干馏蛋黄油无显著性差异（P＞0.05），见表2。

表2 药物对二甲苯引起小鼠耳肿的影响（，n＝10）

表2 药物对二甲苯引起小鼠耳肿的影响（，n＝10）

注：与对照组比较，＊P＜0.01；与湿润烧伤膏组比较，＃P＜0.05。

组别 剂量／（g／只） 肿胀度／mg 抑制率／%对照组 — 124.80±10.895—湿润烧伤膏组 0.02 63.60±8.99＊ 49.04±6.58＊干馏蛋黄油组 0.02 42.80±7.01＊＃ 65.71±8.97＊＃醇提蛋黄油组 0.02 53.00±14.22＊＃ 57.53±4.54＊＃

3.3 体外抑菌实验

实验结果表明，醇提蛋黄油、干馏蛋黄油、湿润烧伤膏对3种致病菌均有抑制作用，三者对金黄色葡萄球菌的抑制作用均强于铜绿假单胞菌和大肠杆菌；并且醇提蛋黄油对金黄色葡萄球菌显示了较其他2种药物更强的抑制作用，见表3。

表3 体外抑菌实验结果（，n＝5）

表3 体外抑菌实验结果（，n＝5）

注：△抑菌圈直径≥8.0；△△抑菌圈直径≥10.0。

组别抑菌圈直径／mm金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 大肠杆菌生理盐水组 － － －湿润烧伤膏组 9.5±0.1△ 7.5±0.2 7.1±0.1干馏蛋黄油组 8.0±0.4△ 7.0±0.2 7.3±0.4醇提蛋黄油组 12.3±0.3△△ 9.2±0.1△7.2±0.3

4 讨论

蛋黄油用于治疗烧烫伤古已有之，即使在现代也是人们用于治疗烧烫伤的良方，在临床获满意疗效［3－6］。现代生物化学实验测出蛋黄油含有蛋白质、维生素A、核黄素、卵磷脂、油酸、亚油酸、脂肪、锌、铁等多种成分，这些成分在损伤修复中发挥重要作用。如蛋白质参与细胞的生长和生化过程，具有生物膜的功能；维生素A能促进黏膜上皮组织的生长；锌与人体免疫功能有关，可增加机体抗感染的能力，加速创伤组织的愈合；脂肪、油酸、亚油酸具有疏水性，可隔绝外来刺激，减轻局部疼痛。

蛋黄油提取方法有多种，目前临床使用最多的仍然是干馏法，但此法出油率低，环境污染严重，产品质量不易控制，难以大规模生产，而其他方法制得的蛋黄油疗效鲜有报道。由于蛋黄油的成分较多，不同的提取方法对成分的含量变化又有一定的影响，所以关于蛋黄油的药理研究难度相对较大。

实验比较了醇提蛋黄油和传统干馏蛋黄油的疗效作用。结果显示，醇提蛋黄油与干馏蛋黄油对烫伤小鼠皮肤均有明显的治疗作用（P＜0.01），疗效优于湿润烧伤膏，且差异显著（P＜0.05），说明蛋黄油可明显促进烫伤创面愈合。在动物实验观察中还发现，经蛋黄油治疗的烫伤小鼠，创面可迅速形成完整的药痂，此药痂具有暂时代替皮肤的屏障作用，为防止创面的继发感染创造了条件。

烧烫伤后微循环通透性增加可导致体液渗出和组织水肿，导致烧伤后皮肤的屏障功能被破坏，体内的水分、蛋白质、电解质等可经烧烫伤创面损失，微生物可经烧烫伤创面侵入，引起局部或全身感染。微循环障碍的转归，决定着烧烫伤局部损伤程度。如果微循环淤滞加重，血栓形成增多，造成局部组织缺血缺氧，影响细胞代谢，加重组织损害，则创面加深；如果微循环得到改善，则可减轻局部损伤。故减轻烧烫伤后局部组织水肿，对促进创面早期愈合有重要意义。我们实验中的由二甲苯所致小鼠炎性耳肿实验显示，醇提蛋黄油具有减轻炎症部位水肿的作用，对促进创面愈合有重要意义。

调查研究结果显示，烧烫伤患者感染的致病菌主要以金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌为主。我们的实验结果可见，在体外抑菌实验中，醇提蛋黄油对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌有一定的抑菌效果，尤其对金黄色葡萄球菌抑菌效果较为明显。醇提蛋黄油的抑菌作用表明其可有效预防烧烫伤创面的感染。通过以上烫伤药效学实验，证明了醇提蛋黄油具有抗炎、镇痛、抑菌和促进烫伤创面愈合等作用，表明醇提蛋黄油在治疗烧烫伤方面与传统干馏制品均有良好的治疗作用和抗感染、抗炎消肿效果。

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［责任编辑 姬 荷］

Pharmacodynamic study on scald wound of egg yolk oil by ethanol extract

XIE Xin－mei，PANG Xiao－bin＊（Institute of Chinese Material Medical，Pharmaceutical College of Henan University Kaifeng，Henan 475004，China）

ObjectiveTo study the effect of egg yolk oil by ethanol extract on scald wound and its anti－inflammation and its anti－bacteria effect in vitro.MethodsHealthy Kunming mice of second degree scald were divided into the scalding control group，moisture burn ointment positive control group，dry distilled egg yolk oil treatment group and ethanol extracted egg yolk oil treatment group.The mice model with the grade II burn on the back were established，the healing time，the change of scald surface and the effects were observed.The experiment of inflammation caused by dimethyl－benzene on the ears of mice was carried out to observe the effect on anti－inflammation.The anti－bacteria effect of the sample was studied in vitro.ResultsCompared with that of negative control group，the egg yolk oil by ethanol extract could apparently decreased the wound extravasation and shorten healing time.It had the similar effect with that of dry distilled egg yolk oil，was better than that of moisture burn ointment.Compared with that of the control group，the egg yolk oil by ethanol extract had the significant anti－inflammatory effects（P ＜0.01）.It had the similar effect with that of dry distilled egg yolk oil（P ＞0.05），was better than that of moisture burn ointment（P ＜0.05）.and inhibitory effect on bacteria was better than that of other groups，especially on Staphylococcus aureus.ConclusionEthanol extract of egg yolk oil has obvious effect on promoting scald wound healing.

Egg yolk oil by ethanol extract；Scald；Animal Model；Anti－inflammation；Anti－bacteria in vitro

R644

A

1672－7606（2012）02－0098－04

2012－02－12

河南大学校内项目（07YBZR040）。

谢欣梅（1973－），内蒙古乌兰浩特人，讲师，从事药物评价的教学及科研工作。

＊通讯作者：庞晓斌（1973－），男，河南洛阳人，博士，副教授，从事微生物药物、药物筛选的教学及科研工作。