飞龙掌血石油醚部位的化学成分研究Δ

石磊，王微，姬志强，康文艺#（.解放军第55中心医院，河南开封475003；.河南大学中药研究所，河南开封 475004）

飞龙掌血Toddalia asiatica（Linn）Lam.为芸香科飞龙掌血属（Toddalia）植物，该属植物只有飞龙掌血1种。飞龙掌血分布于亚洲东及东南部、非洲东及东南部[1]，在中国是传统的活血化瘀中草药[2]。许多文献报道了飞龙掌血提取物的药理作用：胡兴尧等[3]研究了飞龙掌血乙醇提取物的镇痛抗炎作用；郝小燕等[4]发现飞龙掌血总碱具有镇痛抗炎的作用；王秋静等[5]发现飞龙掌血的水提取物具有镇痛抗炎的作用；栗世铀等[6]的研究表明，飞龙掌血乙醇提取物具有抗A型流感病毒活性。

近年来的研究表明，飞龙掌血主要含有香豆素类、生物碱类、萜类等成分[7]。本课题组对飞龙掌血进行了持续研究，采用气相色谱-质谱（GC-MS）联用法研究证明其脂溶性成分主要为烃类和酯类[8]。药理学研究发现，飞龙掌血石油醚部位具有止血活性[9]。为此，本试验对该植物的石油醚部位进行了系统的化学成分分析，通过理化方法和波谱数据确定了6个化合物的结构。

1 仪器与试药

UV-2000紫外-可见分光光度计（上海尤尼可仪器有限公司）；旋转蒸发仪（东京理化器械株式会社）；电子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；Avance-400MHz核磁共振（NMR）仪（瑞士Bruker公司）；EZ-中压制备液相色谱仪（上海利穗公司）。

飞龙掌血于2008年9月采集于贵州都匀市，经黔南民族师范学院郭治友教授鉴定为真品。硅胶（200～300目）、硅胶H与GF254（烟台江友硅胶开发有限公司）；进口硅胶（美国Merck公司）；Sephadex LH-20（英国Amersham公司）；ODS（美国Daiso公司）。

2 提取与分离

取飞龙掌血根1.3kg，以甲醇冷浸3次，每次7d，将滤液浓缩后与80目进口硅胶拌样，分别以石油醚、乙酸乙酯和甲醇洗脱，得到石油醚、乙酸乙酯和甲醇部位。取石油醚部位113g上硅胶200～300目色谱柱，以石油醚-丙酮溶液（100∶1→8∶2，V/V）梯度洗脱，薄层色谱（TLC）检测，浓缩、合并，得洗脱组分13份。

取其中第5份与第6份合并拌样，干法上硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯溶液为洗脱剂，反复经减压柱、凝胶柱纯化，得化合物1（7.8mg）和化合物2（10.8mg）；取洗脱馏分第7份上硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯溶液为洗脱剂，反复经减压柱、进口硅胶柱、丙酮凝胶柱纯化，得化合物3（80mg）；取洗脱馏分第9份上硅胶柱，以石油醚-丙酮溶液为洗脱剂，反复经减压柱、进口硅胶柱、丙酮凝胶柱纯化，得化合物4（100mg）；取洗脱馏分第10份上硅胶柱，以石油醚重结晶4次，经减压柱、凝胶柱纯化，得化合物5（81.4mg）；取洗脱馏分第11份上硅胶柱，以石油醚-丙酮溶液为洗脱剂，经减压柱、凝胶柱纯化，得化合物6（46.1mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色固体，化学式为C18H36O2。EI-MS（m/z）：284[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：2.31（2H，J＝7.4Hz，H-2），1.58（2H，J＝7.2Hz，H-3），0.85（3H，t，J＝6.9Hz，H-18）；13C-NMR（CDCl3，400Hz）δ：179.5（C-1），34.1（C-2），31.9（C-3），30.1～27.4（C-4～15），24.8（C-16），22.7（C-17），14.2（C-18）。以上数据与文献[10]报道一致，故鉴定化合物1为十八酸。

化合物 2：浅黄色油状物。EI-MS（m/z）：282[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：5.34（2H，H-9，10），2.35（2H，J＝7.6Hz，H-2），2.05（4H，H-8，11），1.63（2H，m，H-3），0.87（3H，H-18）；13C-NMR（CDCl3，400Hz）δ：179.8（C-1），130.0（C-10），129.7（C-9），34.1（C-2），31.9（C-16），27.3（C-8，11），24.7（C-3），22.6（C-17），14.2（C-18）。以上数据与文献[11]报道一致，故鉴定化合物2为油酸。

化合物3：白色粉末，硫酸喷雾显紫色。EI-MS（m/z）：280[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：5.34～5.41（4H，H-9，10，12，13），2.80～2.82（2H，H-11），2.34～2.38（2H，H-2），2.06～2.10（4H，H-8，14），1.64（2H，H-3），1.28～1.35（14H，H-4～7，15～17），0.89（3H，t，J＝6.2Hz，H-18）；13C-NMR（CDCl3，100MHz）δ：179.5（C-1），34.3（C-2），32.1（C-3），29.2～29.9（C-4～7，15），27.5（C-8，14），128.2（C-9），130.3（C-10），25.8（C-11），130.3（C-12），128.4（C-13），24.7（C-16），22.9（C-17），14.1（C-18）。以上数据与文献[12]报道一致，故鉴定化合物3为亚油酸。

化合物4：白色晶体，其TLC与β-谷甾醇标准品的Rf值一致，且混合后熔点不下降。EI-MS（m/z）：413[M-1]+。13C-NMR（CDCl3，400MHz）δ：37.3（C-1），31.7（C-2），71.8（C-3），42.3（C-4），140.8（C-5），121.7（C-6），31.9（C-7），31.9（C-8），50.2（C-9），36.5（C-10），21.1（C-11），28.3（C-12），42.4（C-13），56.8（C-14），24.3（C-15），39.8（C-16），56.1（C-17），11.9（C-18），19.1（C-19），36.2（C-20），18.8（C-21），34.0（C-22），26.2（C-23），45.9（C-24），29.2（C-25），19.4（C-26），19.8（C-27），23.1（C-28），12.0（C-29）。以上性质和数据与文献[13]报道一致，故鉴定化合物4为β-谷甾醇。

化合物5：淡黄色针晶。EI-MS（m/z）：246[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：4.0（3H，s，OCH3），4.15（3H，s，OCH3），6.31（1H，d，J＝9Hz，C3-H），8.03（1H，d，J＝9Hz，C4-H），7.03（1H，d，J＝2Hz，C4′-H），7.59（1H，d，J＝2Hz，C5′-H）。以上数据与文献[14]报道一致，故鉴定化合物5为茴芹内酯。

化合物6：淡黄色粉末。EI-MS（m/z）：333[M]+。1H-NMR（CDCl3，400MHz）δ：9.73（1H，s，H-6），8.71（1H，s，H-4），8.36（1H，d，J＝3.9Hz，H-10），8.33（1H，d，J＝3.9Hz，H-11），7.83（1H，d，J＝9.0Hz，H-12），7.58（1H，d，J＝9.0Hz，H-9），7.25（1H，s，H-1），6.12（2H，s，H-13），4.11（3H，s，7-OMe），4.04（3H，s，8-OMe）；13C-NMR（CDCl3，400MHz）δ：146.5（C-6），127.1（C-12），118.3（C-10），118.2（C-11），104.4（C-1），102.1（C-4），101.3（C-13），61.9（7-OMe），56.8（8-OMe）。以上数据与文献[15]报道基本一致，故鉴定化合物6为去甲白屈菜红碱。

4 讨论

本研究采用硅胶柱色谱法对飞龙掌血的石油醚部位进行分离纯化，通过波谱分析鉴定了6个化合物的结构，分别为3个脂肪酸、1个甾体、1个内酯和1个生物碱类化合物。脂肪酸类化合物（化合物1～3）为首次从飞龙掌血中分离得到，其中油酸和亚油酸是人体必需的不饱和脂肪酸，对高血压、高胆固醇有明显疗效[16]。因此，本研究可对开发利用飞龙掌血资源在创制中成药新品种及综合利用等方面提供科学依据。

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