蜈蚣、地龙、地鳖虫镇痛作用比较的实验研究*

汪梅姣 谢志军 谷焕鹏 温成平

（浙江中医药大学，浙江 杭州 310053）

虫类入药，历史悠久，其研究与应用前景广阔，比如蜈蚣、地龙、地鳖虫在镇痛方面具有明显优势。本研究拟通过动物实验比较蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物的镇痛作用，为临床合理选择用药提供实验依据。

1 材料与仪器

1.1 药物 蜈蚣（产地：浙江）、地龙（产地：上海）、地鳖虫（产地：山东），由浙江中医药大学饮片厂提供。美洛昔康，上海勃林格殷格翰药业有限公司（国药准字H20020217）。取干燥的蜈蚣、地龙、地鳖虫药材切碎，分别用去离子水煎1 h，去渣后使用旋转蒸发仪浓缩，得水提物的生药浓度为0.10 g/mL。美洛昔康溶液：去离子水配制药物浓度为15 mg/mL。

1.2 动物 实验用清洁级ICR小鼠，体质量（20±2）g，由浙江中医药大学动物中心提供。

1.3 仪器与试剂 YLS-6B智能热板仪，济南益延科技发展有限公司；电子分析天平，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司（型号：00000246）。旋转蒸发仪，电炉等实验室常用设备。冰醋酸，杭州化学试剂有限公司（批号：20041201）。

1.4 热板法疼痛实验 调节职能热板仪温度在（55±0.5）℃，热板预热10 min。取雌性ICR小鼠，放在热板上，小鼠自放上热板到出现舔后足或抬后足并回头所需时间（s）作为该鼠的痛阈值。凡舔后足或抬后足时间＜5 s或＞30 s或跳跃者，弃之不用。取合格的小鼠40只，分为空白对照组（蒸馏水灌胃）、蜈蚣组（蜈蚣水提物灌胃，剂量1.12 g/kg，相当于人体用药 6 g/60 kg）、地龙组（地龙水提物灌胃，剂量1.12 g/kg）、地鳖虫组（地鳖虫水提物灌胃，剂量1.12 g/kg）、美洛昔康组（美洛昔康溶液灌胃，剂量1.4 mg/kg，相当于人体用药7.5 mg/60 kg），每组8只。其中空白对照组、蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组均灌胃给药7 d，末次灌胃后0、30、60、90、120 min分别用智能热板仪测小鼠痛阈值。美洛昔康组只在测定当天灌胃，实验步骤同前。如60 s小鼠仍无反应，取出小鼠停止实验，以免烫伤，其痛阈值以60 s计算。

1.5 醋酸致小鼠扭体反应实验 取ICR小鼠40只，雌雄各半，分为空白对照组（蒸馏水灌胃）、蜈蚣组（蜈蚣水提物灌胃）、地龙组（地龙水提物灌胃）、地鳖虫组（地鳖虫水提物灌胃）、美洛昔康组（美洛昔康溶液灌胃），每组8只。空白对照组、蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组均灌胃给药7 d，末次灌胃给药50 min后，各小鼠均腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/10 g。美洛昔康组只在当天灌胃，实验步骤同前，观察15 min内各组小鼠出现扭体反应（腹部内凹、伸展后肢、颠部抬高）次数，计算镇痛百分率，公式为：镇痛百分率=（对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数）/对照组平均扭体次数×100%。

1.6 统计学处理 应用SPSS16.0统计软件。计量资料以（±s）表示，方差齐性检验采用Levene检验，多组间方差齐性时采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t法，所有假设检验均采用双侧检验。P≤0.05者将被认为有统计学意义。

2 结 果

2.1 热板法疼痛实验 见表1。给药前各组小鼠添足反应时间差异无统计学意义（P＞0.05）。给药后与给药前比较：蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组小鼠舔足时间明显延长，其中，在30、90、120 min时蜈蚣组与空白对照组比较差异有统计学意义 （P＜0.05）；在120 min时，地龙组与空白对照组比较差异有统计学意义 （P＜0.05），地鳖虫组与美洛昔康组比较差异有统计学意义 （P＜0.05），其余时间段差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表1 各组给药后不同时点痛阈（舔足反应时间）比较（s，±s）

表1 各组给药后不同时点痛阈（舔足反应时间）比较（s，±s）

与美洛昔康组比较，*P＜0.05；与空白对照组比较，△P＜0.05。下同。

组 别 n 0 min 30 min 60 min 90 min 120 min空白对照组 8蜈蚣组 8 11.75±1.53 13.26±2.59 38.94±30.80△ 38.43±31.19△地龙组 8 10.68±5.91 23.20±21.99 14.36±8.10 31.16±22.43 38.81±23.92△地鳖虫组 8 7.70±2.08 13.56±11.59 19.15±12.06 22.61±20.51 20.80±20.64*10.74±5.64 11.90±1.71 12.01±2.51 10.74±4.92 30.41±15.58△ 17.26±6.37美洛昔康组 812.92±5.86 21.75±10.03 37.47±16.6527.95±23.04 36.16±23.33

2.2 醋酸致小鼠扭体反应实验 见表2。给药前各组小鼠添足反应时间没有显著差异（P＜0.05）。蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组与空白对照组比较，小鼠扭体次数明显减少，其中蜈蚣组、地鳖虫组与空白对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。各组与美洛昔康组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。蜈蚣组、地龙组、地鳖虫组3组间差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表2 各组给药前后扭体次数与镇痛率比较（±s）

表2 各组给药前后扭体次数与镇痛率比较（±s）

组 别 n 小鼠扭体次数 疼痛率（%）空白对照组 8蜈蚣组 8 33.0±6.5 —14.0±10.9△ 57.6地龙组 8 28.0±14.1 15.2地鳖虫组 8 27.0±13.6△ 18.2美洛昔康组 813.0±7.9 60.6

3 讨 论

虫类药用于镇痛治疗历史悠久，《千金要方》、《外台秘要》都有用虫类药治疗痹证的记载。宋代治疗痹证的医方中较前人更多使用了虫类药，如：蜈蚣、地龙、乌蛇、白花蛇、全蝎之类，代表方如《圣惠方》的原蚕蛾散（地龙、原蚕蛾、僵蚕、蝉蜕），蛜螂丸（蛜螂即全蝎）。目前，虫类药亦广泛用于治疗风湿痹病，如益肾蠲痹丸（含蜈蚣、地龙等）有搜风剔邪，蠲痹通络之功，临床用于治疗类风湿关节炎、强直性脊柱炎等风湿痹症具有较好的疗效［1］。腰痛宁胶囊（含土鳖虫等）具有消肿止痛，疏散寒邪，温经通络作用，常用于治疗腰腿痛、风湿性关节痛等［2］。蚁参蠲痹胶囊（复方蚂蚁丸）（含蜈蚣等）临床上用于治疗类风湿性关节炎［3］。

蜈蚣功能息风镇痉，通络止痛，攻毒散结，可用于治疗风湿顽痹等；地龙功能清热定惊，通络，平喘，利尿，可用于关节痹痛，肢体麻木，半身不遂等；地鳖虫功能破瘀血，续筋骨，可用于筋骨折伤，瘀血经闭，癓瘕痞块。研究表明，蜈蚣醇提物、水提物均有明显的镇静、镇痛、解痉和抗炎作用［4］，对热板法刺激引起的疼痛有显著镇痛作用，且小剂量优于大剂量；对二甲苯引起的小鼠耳廊炎症也有显著的抑制作用［5］；地龙具有溶栓、降压、镇静、镇痛、杀精子等作用［6-7］；杨耀芳研究发现土鳖虫呈现较强的镇痛作用［8］。

本研究表明，蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物对热板、醋酸导致的疼痛有明显的缓解作用；其中，蜈蚣在热板、醋酸导致的疼痛实验中表现出最强的镇痛作用，在热板法疼痛实验中地龙的镇痛作用强于地鳖虫，但是在醋酸致小鼠扭体反应实验中结果相反，表明地鳖虫短效镇痛作用较好，而地龙有长效的镇痛作用。本文仅比较了蜈蚣、地龙、地鳖虫水提物的镇痛作用，对于其醇提物及其他虫类药的镇痛作用比较还有待深入研究。

［1］畅金剑，王增慰，黄巧智.强督通痹汤联合益肾蠲痹丸治疗强直性脊柱炎 35 例［J］.中医研究，2011，24（3）：29-31.

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［3］刘书堂，刘井利，郭金甲，等.动物药治疗风湿病的作用和应用［J］.中国中医骨伤科杂志，2007，15（7）：83-84.

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