赤水撑绿竹根腐病菌室内药剂筛选

2012-01-22任春光刘曼倪云跃向准桑维钧方洪刚

中国森林病虫 2012年2期

任春光，刘曼，倪云跃，向准，桑维钧，方洪刚

(1.贵州科学院生物研究所，贵阳 550009;2.贵州大学，贵阳 550025;3.贵州赤天化纸业公司，赤水 564700)

撑绿竹是赤水市引进的优良杂交种，出笋多，生长快，产量高，无性繁殖力强，既是纸浆材、纺织材，又是优良的笋用竹种。随着竹业生产集约化程度的逐渐提高，撑绿竹种植面积不断扩大，病害种类、发病程度也随之增多。2008年10月—2010年3月对赤水撑绿竹根腐病进行了调查和鉴定，结果表明撑绿竹根腐病是撑绿竹的重要病害，病原是尖孢镰孢菌Fusarium oxysporum Schlecht，主要危害根系，严重时引起整株枯死［1］。为了有效控制该病的发生和蔓延，作者采用生长速率法和悬滴法室内测定了8种常用杀菌剂对该病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用，筛选出控制效果较好的杀菌剂，以为田间防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 药剂对病菌菌丝生长的抑制试验［1－4］

1.1.1 供试药剂药剂共8种。每种药剂先配制好比供试浓度高10倍的母液，测定时按系列稀释法再配制成所需浓度。各种药剂剂型、生产厂家及稀释倍数见表1。

表1 供试杀菌剂及使用浓度

1.1.2 抑菌试验用8种药剂配成不同浓度的PDA平板，用打孔器将病菌菌落打成直径5 mm的菌饼，移到含药PDA平板上，25℃恒温培养。另设清水空白对照。每个处理重复3次，7 d后，用十字交叉法测量菌落直径，计算相对抑制率。

相对抑制率(%)=(对照菌落直径－0.5)－(处理菌落直径－0.5)/(对照菌落直径－0.5)×100

1.1.3 药剂对病原菌孢子萌发的抑制试验［1－7］供试菌株在PDA培养基上25℃恒温黑暗培养箱中培养，待有大量分生孢子产生时，加入4%蔗糖溶液使孢子充分悬浮并稀释(在16×40倍显微镜下每视野中有80～100个分生孢子)。分别吸取50 mL孢子悬浮液及等量的农药稀释液混合，滴在洁净的凹玻片上，将玻片放入有湿滤纸的保湿培养皿内，置于25℃恒温培养箱中，以无菌水替代农药作对照，8 h后定时在显微镜下观察对照孢子萌发情况。当对照孢子萌发率达到最大时，检查各处理孢子萌发率，每处理重复3次，每个重复检测300个孢子。按下式计算孢子萌发率和药剂对孢子萌发的抑制率。

孢子萌发率(%)=(萌发的孢子数量/300)×100

抑菌率(%)=(对照孢子萌发率－处理孢子萌发率)/对照孢子萌发率×100

1.1.4 毒力测定将抑制率换算成抑制机率值，以设定药剂浓度的对数值为横坐标，以抑制机率值为纵坐标，做回归直线，分别求出各种药剂对撑绿竹根腐病病原菌的毒力回归方程及EC50。

2 结果与分析

2.1 杀菌剂对尖孢镰孢菌丝生长的影响以第7天的菌落直径作检验，结果表明，在供试的8种杀菌剂中，以70%敌磺钠WP、3%广枯灵AS的抑菌作用最强，其次为70%甲基硫菌灵WP、10%苯醚甲环唑WG，其余4种杀菌剂抑菌效果相对较差，详见表2。

2.2 杀菌剂对尖孢镰孢菌孢子萌发的影响显微镜观察表明，在25℃黑暗条件下培养16 h后，对照分生孢子萌发率为100%;药剂处理的8种杀菌剂对孢子萌发均有不同程度的抑制作用。其中70%敌磺钠WP对孢子萌发的抑制率95%以上，3%广枯灵 AS、70%甲基硫菌灵 WP、10%苯醚甲环唑WG对孢子萌发的抑制率都在80%以上，剩余几种相对较差，详见表3。

2.3 8种药剂对尖孢镰孢菌的毒力在8种药剂中以70%敌磺钠WP对尖孢镰孢菌的毒力最高，其EC50值最小，仅为0.072 5 μg/mL;其次为3%广枯灵 AS，EC50值为0.112 6 μg/mL，50%代森锰锌 WP 毒力最低，EC50值为2 395.521 7 μg/mL，详见表4。

表2 不同药剂对病菌菌丝生长的抑制作用

3 小结与讨论

杀菌剂室内抑菌试验结果表明，供试的8种杀菌剂在不同浓度下对尖孢镰孢菌的孢子萌发和菌丝生长均有不同程度的抑制作用。其中，70%敌磺钠WP、3%广枯灵 AS对菌丝生长与孢子萌发的抑制效果都很明显;而70%甲基硫菌灵 WP、10%苯醚甲环唑 WG能影响孢子的萌发但不同时抑制菌丝的生长，这可能是病原菌在PDA平板上获得了比蔗糖溶液更好的营养，使菌丝能够生长伸长。经过进一步室内毒力测定表明，供试8种杀菌剂在一定浓度内对尖孢镰孢菌都有不同程度的抑制作用，并且随着浓度增加抑制作用加强。至于筛选的药剂对野外竹林的防效如何，有关试验正在进行中。