米醋抑菌作用的实验研究

何晓燕，聂鑫鑫，宫汝淳，苗婷婷

(通化师范学院 生命科学学院，吉林 通化134002)

米醋是我国四大名醋之一，它不仅是人们经常食用的一种调味品，而且还是中外传统的养颜、健肤、美容的保健品，其物美、价廉、有效且无副作用[1].《本草纲目》中记载醋能“消痛肿、散水气、杀邪毒、理诸药”[2-3].据资料报道，米醋中含有醋酸、乳酸、氨基酸、甘油和醛类化合物，故对人的皮肤有柔和的刺激作用，能使营养供应充足、皮肤丰润饱满[4]；同时醋能改善血液的流变性，具有很好的调节功能[5-6]；另外醋还能止痒，减轻炎性渗出浸润，从而使表皮的角质层恢复正常[7].虽然对米醋的研究已有很多报道，但对米醋的抑菌作用尚未见试验报道.人类皮肤上的菌丛有固有性和暂时性两大类，菌的种类达200余种.本实验通过观察不同浓度米醋对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌的抑制作用，以期为保健醋开发提供一定的实验依据.

1 实验材料

1.1 实验菌种

枯草杆菌(Bacillussubtilis)，金黄色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus)，酵母菌(Yeast)，以上菌种购于中国工业微生物菌种保藏管理中心.

1.2 实验药品

米醋，总酸含量9g/100mL，批号20110311，通化市祥源调味食品厂生产；牛肉膏，批号941208，北京市海淀区微生物培养基制品厂生产；葡萄糖，批号20100110，天津市科密欧化学试剂有限公司生产；蛋白胨，批号20101002，北京奥博星生物技术有限责任公司生产;琼脂粉，批号20090802，北京奥博星生物技术有限责任公司生产；浴盐，批号20100803，韩国兰蔻伊人化妆品(国际有限公司)生产.

1.3 实验仪器

生化培养箱：型号HPS-280，哈尔滨市东联电子技术开发有限公司；精密电子天平：型号JA2003SHP07003，上海恒平科学仪器有限公司；高压湿热灭菌锅:型号CN61M，西安医疗器械厂；双人水平超净工作台：型号HD-1360，北京东联哈尔仪器制造有限公司.

2 实验方法

2.1 培养基的制备及灭菌

牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，琼脂粉15～20g，水1000ml，pH:7.4～7.6.PDA培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，自然pH值[8].将实验器材和培养基用高压湿热灭菌锅灭菌.

2.2 菌种活化

用接菌环将实验室中的枯草杆菌、金黄色葡萄球菌接种在牛肉膏蛋白胨斜面培养基，酵母菌接种在PDA斜面培养基进行活化，枯草杆菌和金黄色葡萄球菌于37℃恒温培养箱中培养24h，酵母菌于28℃恒温培养箱中培养24h.

2.3 菌悬液的制备

取经培养的枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌各2mL加20ml无菌水混匀制成菌悬液备用[9-11].

2.4 供试液与滤纸片的制备

用移液管量取米醋和无菌水，分别配制成醋酸浓度为2%、4%、6%、9%的供试液，浴盐与无菌水制成饱和溶液作为阳性对照，无菌水作为阴性对照，分别置于培养皿中，将预先剪好、直径为6.5cm并灭菌的滤纸片完全浸没在不同浓度的供试液中5min.

2.5 抑菌作用测定试验

采用滤纸法测定不同稀释浓度米醋对三种菌的抑菌作用.取灭菌后、内径为120mm培养皿，在无菌室的超净工作台中操作，加入灭菌后的培养基20ml，并置于恒温培养箱培养24h后进行无菌检查.枯草杆菌和金黄色葡萄球菌用牛肉膏蛋白胨培养基，酵母菌用PDA培养基.用胶头滴管吸取0.5ml菌悬液滴于通过无菌检查的培养基上，用涂布器涂匀，将浸泡好的滤纸片放置在涂过菌的培养基上，一个培养皿中放置四个同种处理，每个处理重复8次，将放置好纸片的培养皿置于恒温培养箱中培养48h，枯草杆菌和金黄色葡萄球菌适宜温度为37℃，酵母菌为28℃，用尺量取抑菌环直径[12].

2.6 数据统计

3 实验结果

3.1 不同浓度的米醋对枯草杆菌的抑制作用

表1 不同浓度的米醋对枯草杆菌的抑制作用

注：与无菌水组比较*P<0.05，**P<0.01

实验结果表明:与无菌水组比较，2%的米醋对枯草杆菌没有抑制作用，其他浓度的米醋均有抑菌效果，其抑制作用随浓度的升高而增强，且4%、6%的米醋组差异显著(P<0.05)，9%的米醋组差异极显著(P<0.01)，浴盐组差异显著(P<0.05)，因此，米醋具有一定的抑菌作用，且9%的米醋对枯草杆菌的抑菌作用比浴盐对枯草杆菌的抑菌作用强.

3.2 不同浓度的米醋对金黄色葡萄球菌的抑制作用

表2 不同浓度的米醋对金黄色葡萄球菌的抑制作用

注:与无菌水组比较*P<0.05，**P<0.01.

实验结果表明：与无菌水组比较，2%的米醋对金黄色葡萄球菌没有抑制作用，其他各个浓度的米醋均有抑菌效果，其抑制作用均随其浓度的升高而增强，且4%、6%的米醋组差异显著(P<0.05)，9%的米醋组差异极显著(P<0.01)，因此米醋对金黄色葡萄球菌有一定的抑菌作用，且9%的米醋对金黄色葡萄球菌的抑菌作用比浴盐对金黄色葡萄球菌的抑菌作用强.

3.3 不同浓度的米醋对酵母菌的抑制作用

表3 不同浓度的米醋对酵母菌的抑制作用

注：与无菌水组比较*P<0.05，**P<0.01．

实验结果表明:与无菌水组比较，2%、4%的米醋对酵母菌的抑菌作用微弱，无显著性差异，6%、9%的米醋组差异显著(P<0.05)，浴盐组差异极显著(P<0.01)．因此,米醋对酵母菌有一定的抑菌作用且其抑菌作用比浴盐弱.

4 讨论

米醋不仅是调味佳品，现今更是净身、美容的保健品.醋酸是米醋的主要成分，米醋通过降低pH值使细菌处于不利的生长环境，酸性物质改变蛋白质构型，扰乱多肽链的折叠方式，造成蛋白变性，尤其是酶的变性导致细菌代谢活动终止，从而起到杀菌作用.实验结果表明，米醋对枯草杆菌和金黄色葡萄球菌有一定的抑菌作用，其抑菌作用随着浓度的增加而增强，说明米醋对细菌是有较强的抑菌作用.酵母菌属真菌，真菌是喜酸性的菌，所以米醋对其抑制作用比对细菌的抑菌作用弱[13].浴盐是沐浴佳品，它具有软化硬水、软化角质、杀菌和促进血液循环的作用[14-15].浴盐对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌均有一定的抑制作用.但与米醋比较，对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱，对酵母菌的抑制作用较强.可见米醋不仅是调味佳品和保健品，而且是一种消毒剂.因此，可以考虑将米醋作为保健醋和杀菌剂进行开发.另外，对于米醋的剂量安全试验及其与剂量效果的关系有待于进一步探讨.

参考文献：

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