替米考星溶液的紫外分光光度法测定

岳永波，李玉霞，魏占勇，刘 毅

（河北远征药业有限公司河北省兽药工程技术研究中心，河北石家庄 050041）

替米考星溶液的紫外分光光度法测定

岳永波，李玉霞，魏占勇，刘 毅

（河北远征药业有限公司河北省兽药工程技术研究中心，河北石家庄 050041）

建立了紫外分光光度法测定替米考星溶液含量的方法。以0.01 mol/L的盐酸为溶剂，测定波长为291 nm，通过专属性试验、准确度试验、线性关系考察、精密度试验等方法学研究，建立了紫外分光光度法测定替米考星的方法。替米考星测定的线性方程为A＝0.026 7ρ＋0.005 9，r＝0.999 9，线性范围为8～48μg/m L。准确度试验（n＝9）平均回收率为100.6%，RSD值为0.5%。以紫外分光光度法测定替米考星溶液的含量，方法准确、简单易行，是适合快速测定替米考星含量的方法。

替米考星；溶液；紫外分光光度法；测定

替米考星（tilmicosin）为半合成泰乐菌素的大环内酯类兽用专用抗生素，用于治疗胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌及支原体感染。替米考星溶液为替米考星与适宜的辅料溶解于水而成的制剂。《中华人民共和国兽药典》采用HPLC法测定替米考星原料及其预混剂、注射液和溶液的含量［1］。目前，有研究人员报道了应用紫外分光光度法测定替米考星注射液［2－3］，但用紫外分光光度法测定替米考星溶液未见报道。笔者应用紫外分光光度法对其含量进行了方法学考察，结果表明该方法准确、可靠。

1 仪器与试药

PE Lambda 20紫外可见分光光度计，赛多利斯BT224S万分之一分析天平。

替米考星对照品，中国兽医药品监察所提供，批号为K0310711，质量分数为91.0%；替米考星原料，湖北龙翔药业有限公司提供，批号为110803，质量分数为88.8%；替米考星溶液，质量分数为25%，批号为110601，110901，111001，均为自制。

2 方法与结果

2.1 对照品储备液的制备

精密称取替米考星对照品既定量，加入0.01 mol/L盐酸溶液，制成质量浓度为0.4 mg/m L的溶液，作为对照品储备液。

2.2 测定波长的选择

精密量取5 m L替米考星对照品储备液，放入100 m L量瓶中，加入0.01 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，作为对照品溶液。以0.01 mol/L盐酸溶液为空白，按照紫外分光光度法，在波长200～400 nm处进行扫描。结果得知替米考星对照品在291 nm处有最大吸收，故选择291 nm作为测定波长。替米考星对照品紫外吸收谱图见图1。

图1 替米考星对照品紫外吸收谱图Fig.1 UV absorption spectra of tilmicosin reference substance

2.3 专属性试验

替米考星对照品溶液制备同“2.2”项。精密量取替米考星溶液2 m L，放入500 m L量瓶中，加入0.01 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取稀释后的溶液2 m L，放入100 m L量瓶中，加入0.01 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，作为样品溶液。按处方比例不加替米考星配制干扰，摇匀后，操作同上，作为干扰溶液。按照紫外分光光度法，以0.01 mol/L盐酸溶液为空白，在波长200～400 nm处进行扫描。结果得知替米考星对照品与样品在200～400 nm处扫描的最大吸收相同，干扰在291 nm处无吸收，结果见图2。

图2 替米考星溶液紫外吸收谱图Fig.2 UV absorption spectra of tilmicosin solution

2.4 线性关系考察

分别精密量取对照品储备液1，2，3，4，5，6 m L，放入50 m L量瓶中，加0.01 mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液。以0.01 mol/L盐酸溶液为空白，在波长291 nm处分别测定各供试品溶液的吸光度。以样品吸光度（A）对质量浓度（ρ）进行线性回归，得回归方程为A＝0.026 7ρ＋0.005 9，r＝0.999 9。结果表明替米考星在8～48μg/m L线性关系良好。

2.5 准确度试验

分别制备替米考星供试品溶液（n＝9）与对照品溶液，以0.01 mol/L盐酸溶液为空白，在波长291 nm处分别测定吸光度，计算回收率。结果测得替米考星的平均回收率为100.6%，RSD值为0.5%（n＝9），表明以紫外分光光度法测定替米考星溶液，准确度良好。结果见表1。

表1 紫外分光光度法测定替米考星溶液准确度试验结果Tab.1 Accuracy test of tilmicosin solution by UV

2.6 精密度试验

分别精密称取替米考星原料药20，25，30 mg各3份，分别放入100 m L量瓶中，按处方比例加入辅料，加入0.01 mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀。精密量取20 m L，放入250 m L量瓶中，加入0.01 mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密称取对照品适量，加入0.01 mol/L盐酸溶液，制成质量浓度为20μg/m L的溶液，作为对照品溶液。以0.01 mol/L盐酸溶液为空白，在波长291 nm处分别测定吸光度，计算含量。结果测得替米考星溶液的平均质量分数为100.1%，RSD值为0.4%（n＝9），表明以紫外分光光度法测定的含量精密度良好。

2.7 稳定性试验

将经过精密度试验后的样品放置2，4，6，12，24，48 h，分别再测定，测得平均质量分数（n＝6）为100.2%，99.9%，100.2%，99.1%，100.1%，100.6%；RSD值为0.4%，0.5%，0.6%，0.4%，0.7%，0.6%。结果表明：2～48 h测定时间内的数据无显著差异，样品测定方法稳定可行。

2.8 样品测定

分别精密量取替米考星溶液（批号为110601，110901，111001）适量，加入0.01 mol/L 的盐酸溶液，制成质量浓度为20μg/m L的溶液，作为样品溶液。再精密称取对照品适量，加入0.01 mol/L盐酸溶液，制成质量浓度为20μg/m L的溶液，作为对照品溶液。在波长291 nm处分别测定吸光度，计算含量。结果得到3个批号样品的质量分数分别为98.7%，100.8%，99.8%。

2.9 紫外分光光度法与高效液相色谱法的比较试验

紫外分光光度法测定同“2.8”项。高效液相色谱法同《中华人民共和国兽药典》［1］中所述。结果测得替米考星溶液（批号为111001）高效液相色谱法测得的质量分数为99.8%，紫外分光光度法测得的质量分数为99.9%，表明二者在测定同一批样品时，得到的结果相差不大。此外，以紫外分光光度法测定替米考星溶液的准确度良好，结果见表2。

表2 高效液相色谱法与紫外分光光度法测定结果比较Tab.2 Result comparison by using HPLC and UV

3 讨 论

用紫外分光光度法测替米考星含量时，宋艳红等采用蒸馏水为溶剂［2］，白东英等采用p H值为7.4～7.5的磷酸盐缓冲液为溶剂［3］。笔者用水和0.01 mol/L盐酸溶液为溶剂，经试验发现替米考星的紫外吸收光谱相同。替米考星不溶于水，以水作为溶剂时，对照品溶解过程中产生大量气泡，对照品细粉附着在气泡上，即使超声处理也易导致溶解不完全。替米考星易溶于酸，其对照品在0.01 mol/L盐酸溶液中溶解快速、完全，不产生气泡，无需超声处理。故本试验选用0.01 mol/L盐酸溶液为溶剂。

［1］中华人民共和国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典［M］.北京：中国农业出版社，2010.

［2］宋艳红，白小红，李 英.紫外分光光度法测定替米考星的含量［J］.山西医科大学学报，2005，36（1）：71－73.

［3］白东英，李引乾，黄勇旗，等.替米考星长效注射液的质量控制［J］.西北农业大学学报，2008，17（3）：64－66.

UV spectrophotometry determination of tilmicosin solution

YUE Yong－bo，LI Yu－xia，WEI Zhan－yong，LIU Yi

（Hebei Engineering Research Center of Veterinary Drugs，Hebei Yuanzheng Pharmaceutical Company Limited，Shijiazhuang Hebei 050041，China）

A method for the determination of tilmicosin solution by ultraviolet spectrophotometry is established，with 0.01 mol/L HCl as solvent，detecting wave length at 291 nm，and through investigating the specificity accuracy，linearity and precision.The linear equation isA＝0.026 7ρ＋0.005 9，r＝0.999 9，in the range of 8～48μg/m L.The average recovery is 100.6%and RSD is 0.5% （n＝9）.The UV method is an accurate，simple，and rapid way for determination.

tilmicosin；solution；UV spectrophotometry；determination

O657

A

1008－1534（2012）04－206－02

2012－05－08；

2012－05－22

张士莹

岳永波（1971－），男，河北栾城人，高级工程师，主要从事兽药研发方面的工作。