紫心甘薯对高脂血症大鼠脂质代谢及氧化应激的影响
2011-10-22陈伟平毛童俊周宇瀚侯鹏超
陈伟平,毛童俊,樊 林,周宇瀚,俞 兢,金 赟,侯鹏超
(1.浙江大学城市学院医学与生命科学学院,浙江杭州310015;2.浙江大学医学院公共卫生系,浙江杭州310058)
紫心甘薯(purple sweet potato)属旋花科一年生草本植物[1],是新近开发出的一类优良特异的甘薯品种,其肉质紫红,外观诱人,具有营养、着色和保健等多重作用,引起国内外的广泛关注。紫甘薯富含花青素[2]及膳食纤维,多年来研究表明,花色素苷具有抗氧化、清除自由基、防癌、提高视力等生物活性[3];膳食纤维可在肠道内吸水后形成胶体,阻止脂类物质向小肠壁的扩散[4],从而减少机体对脂类物质的吸收,起到了降脂的作用。高脂血症是各种原因导致的血胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白升高和(或)高密度脂蛋白降低的一种脂代谢异常疾病[5],它与代谢综合征等疾病密切相关,包括2型糖尿病,胰岛素抵抗,高血压等[6]。目前最安全有效的治疗高脂血症的方法在于饮食干预,因此,从天然食物中找寻具降脂功效的食材已成为研究热点[7-8]。已有研究表明,紫甘薯具有预防高血压,改善肝功能,减少基因突变,抑制诱癌物质的产生,改善视力等保健作用[9]。但关于紫甘薯对脂质代谢影响的研究较少,本实验通过观察紫甘薯对大鼠脂质代谢及氧化应激的影响,为其进一步开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 动物 雄性SD大鼠40只,体重180~200 g,购于浙江省医学科学院。合格证号SCXK(浙)2008-0033。
1.2 材料及试剂 紫心甘薯购于临安市太阳镇紫心甘薯示范基地。总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及总蛋白定量测试盒均购于南京建成生物工程研究所。
1.3 方法
1.3.1 紫心甘薯粉末的制备 将紫心甘薯洗净,晾干,切成薄片后放在0.1 mol/L、pH值为5的柠檬酸溶液里浸泡0.5 min(防止紫心甘薯内的花青素被氧化),置于60℃烘箱内12 h,而后将烘干的紫心甘薯片用中药粉碎机打碎成细粉状用于制备饲料。
1.3.2 动物分组及处理 SD大鼠适应性喂养1周后,禁食12 h,次日晨取尾血测血清 TC、TG。按血脂水平及体重分为4组,每组10只:正常对照组饲喂基础饲料,高脂对照组饲喂高脂饲料(高脂饲料配方:10%蛋白粉、0.5%胆盐、5%猪油及84.5%基础饲料),紫甘薯高剂量组饲喂85%高脂饲料+15%紫甘薯粉,紫甘薯低剂量组饲喂90%高脂饲料+10%紫甘薯粉。动物房温度为22~25℃,相对湿度为45%~60%。动物置不锈钢笼内喂养,5只一笼,自由饮水进食,并且记录当天饮食量,每周称体重一次。实验期为6周,分别于第0周、第3周、第6周末取尾血测定血脂指标。
1.3.3 指标测定 3周末,取尾血测定血清TC、TG、HDL-C指标。6周末,取尾血测定血清TC、TG、HDL-C、SOD 及 MDA 的指标。然后处死大鼠,解剖分离得到肝脏,在冰冷生理盐水中漂洗,除污,拭干,称重;用0.86%预冷生理盐水制成10%组织匀浆,以2 000 r·min-1离心10 min;取上清液测定肝脏SOD、GSH、MDA的活性。蛋白定量采用考马斯亮蓝法。血脂水平及氧化应激指标均按试剂盒说明操作。LDL-C用Friedewald公式计算:LDL-C(mmol/L)=TC(mmol/L)-HDL-C(mmol/L)-TG(mmol/L)×0.456。AI=(TC-HDL-C)/HDL-C[10]。
1.4 统计学分析 以SPSS 11.5统计分析软件先进行单因素方差分析,若具有统计学意义(P<0.05),则采用LSD法进行统计分析,所有数据均以均值±标准差表示。
2 结果
2.1 平均进食量与体重变化 由表1可知整个实验期间,各组大鼠的平均进食量、初始体重以及体重增长均无显著性差异(P>0.05)。
2.2 紫心甘薯对各组大鼠血清TC、TG的影响
由表2可知各组大鼠基础TC、TG水平无显著性差异(P>0.05)。从第3周开始,高脂对照组血清TC、TG水平显著高于正常组(P<0.01)。而紫心甘薯高剂量组大鼠血清TC和TG水平较高脂对照组明显降低;紫心甘薯低剂量组大鼠血清TG在第3周末显著低于高脂对照组,而TC较高脂对照组无显著性差异。这些变化一直持续到第6周末。
2.3 紫心甘薯对各组大鼠血清HDL-C、LDL-C和AI值的影响 由表3可知,第3周末紫心甘薯高、低剂量组血清HDL-C值均显著高于高脂对照组,而LDL-C和AI则显著低于高脂对照组。这些变化一直持续到第6周末。
2.4 紫心甘薯对各组大鼠血清SOD活性、MDA水平的影响 由表4可知,各组大鼠基础SOD活性、MDA水平无显著差异(P>0.05)。随着实验的进展,在第6周末,除正常组外,其余3组SOD水平均有所下降。其中高脂对照组下降最明显,与正常组比有显著性差异,而MDA水平较正常组有显著上升(P<0.01)。紫心甘薯高、低剂量组血清SOD活性均较高脂对照组明显增高,而MDA水平明显降低。
表1 各组平均进食量及体重变化Table 1 Average food intake and weight gain in different groups
表2 紫心甘薯对各实验组血清TC和TG的影响Table 2 Effect of purple sweet potato on serum TC,TG levels in different groups
表3 紫心甘薯对各实验组血清HDL-C和LDL-C及AI的影响Table 3 Effect of purple sweet potato on serum HDL-C,LDL-C and AI in different groups
2.5 肝脏SOD活性和MDA及GSH水平 由表5可知高脂对照组肝脏SOD活性、GSH水平较正常组明显减低,MDA则明显升高(P<0.01)。紫心甘薯高、低剂量组大鼠肝脏SOD活性、GSH水平则显著高于高脂对照组,而MDA水平显著低于高脂对照组。
表4 紫心甘薯对各实验组血清SOD和MDA的影响Table 4 Effect of purple sweet potato on serum SOD and MDA in different groups
表5 肝脏SOD活性和MDA及GSH水平Table 5 Hepatic SOD activities and MDA,GSH levels
3 讨论
目前对高脂血症的研究常通过制备实验性高脂血症动物模型进行,而以化学物质诱发的动物模型在国内外应用最为广泛,尤其是高脂饲料喂养形成的动物模型[11]。本实验亦通过给大鼠喂饲高脂饲料使得在实验第3周末,血清TC、TG水平明显高于正常对照组,说明高脂血症模型建立成功,并且这种状态一直持续到实验结束。实验结果表明,紫心甘薯高、低剂量分别能不同程度的降低血清TC、TG、LDL-C水平和AI值,与高脂对照组比较有显著差异,并且这种变化呈现剂量依赖性关系,而HDL-C则显著升高。HDL-C水平的升高有利于外周胆固醇的清除,防止胆固醇在动脉壁沉积从而阻碍动脉粥样硬化的形成。由此表明紫心甘薯有降脂的功效。
余华等[12]对不同肉色甘薯的营养成分进行了分析,结果显示,与桔红色、黄色甘薯相比,紫心甘薯中除了花青素外,碳水化合物、蛋白质、铜、锌、铁、锰、镁等的含量都显著提高,维生素C、β-胡萝卜素等显著降低,而粗纤维、脂肪、硒等差别不显著。
高脂血症的发病与氧化应激/脂质过氧化也有一定的关系。MDA是脂质过氧化反应的代谢产物,其含量间接反映了细胞受自由基攻击后脂质过氧化程度。本实验结果显示高脂对照组MDA含量明显高于正常对照组,而紫心甘薯高、低剂量组MDA含量有明显降低,与高脂对照组相比有显著性差异。SOD是体内十分重要的抗氧化酶,其功能是去除细胞中的超氧阴离子,活性的高低可反映机体抗氧化能力的强弱。SOD属于金属酶,按照结合金属离子种类不同,可分为三种:含铜与锌超氧化物歧化酶(Cu-ZnSOD)、含锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)和含铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)。紫心甘薯中铜、锌、铁、锰含量显著提高,这为机体内合成更多的SOD提供了可能;GSH是一种内原性的抗氧化物质,在体内的抗氧化体系中起着关键的作用,食物中GSH的浓度与蛋白质含量有关。本研究显示,紫心甘薯高、低剂量组的GSH水平明显较高脂对照组增加,这也可能与紫心甘薯中蛋白质的含量较高有关。以上各种指标都表明,紫心甘薯具有清除过多氧自由基,阻断由氧自由基介导的脂质过氧化作用对细胞造成的损害,减少脂质过氧化产物的形成,提高机体的抗氧化能力等作用。这些作用与紫心甘薯中的营养成分组成有关,也可能与紫心甘薯的降血脂功能有关。
紫心甘薯除具有普通甘薯的营养成分外,还富含花青素和多糖,具有较好的降脂和改善氧化应激的功效,更重要的是它是一种天然无害的产品,因此可以作为人体抗衰老保健品加以开发,具有良好的市场开发前景。
[1]HAN Yong-bin,ZHU Hong-mei,GU Zhen-xin,et al(韩永斌,朱洪梅,顾振新,等).Inhibitory Effect of Purple Sweet Potato Pigments on some Microorganisms[J].Microbiology(微生物学通报),2008,35(6):913-917.(in Chinese)
[2]SUDA I,OKIT,MASUDA M,etal.Direct absorption of acylated anthocyanin in purple-fleshed sweet potato into rats[J].J Agric Food Chem,2002,50(6):1672-1676.
[3]KANO M,TAKAYANAGI T,HARADA K,et al.Antioxidative activity of anthocyanins from purple sweet potato,Ipomoera batatas cultivar Ayamurasaki[J].Biosci.Biotechnol.Biochem,2005,69(5):979-988.
[4]DVIR I,CHAYOTH R,SOD-Moriah U,et al.Soluble polysaccharide and biomass of red microalga Porphyridium spalterintestinalmorphology and reduce serum cholesterol in rats[J].British J Nutr,2000,84(4):469-476.
[5]HUANG Bo-fu(黄波夫).Advance in Research of Traditional Chinese Medicine Treatment to Tall Lipemia[J].Journal of Guangxi Traditional Chinese Medical University(广西中医学院学报),2008,11(3):102-104.(in Chinese)
[6]CRUZ M L,GORAN M I.The metabolic syndrome in children and adolescents[J].Curr Diab Rep,2004,4:53-62.
[7]ZHAO Yan,LIU Guo-yan,SHI Xian-ming(赵 燕,刘国艳,史贤明).Effects of Luo Han Guo Juice Concentrate and Luo Han Guo Mogrosides on the Metabolism of Blood Fat in Mice[J].Journal of Chinese Institute Of Food Science and Technology(中国食品学报),2008,8(1):9-12.(in Chinese)
[8]DEVI R,SHARMA D K.Hypolipidemic effect of different extracts of Clerodendron colebrookianum Walp in normal and high-fat diet fed rats[J].J Ethnopharmacol,2004,90(1):63-68.
[9]MING Xing-jia,LI Kun-pei,ZHANG Ming,et al(明兴加,李坤培,张 明,等).Advance in Research of Physiological Activity of Purple Sweet-Potato[J].Food Research and Developent(食品研究与开发),2007,28(7):144-147.(in Chinese)
[10]ZHANG Shi-hong,YU Chun-shan(张式鸿,俞纯山).Advancein Research ofLow Density Llipoprotein CholesterolDetermination Methods[J].Foreign Medical Sciences(section of Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine)(国外医学临床生物化学与检验学分册),1999,20:151-153.(in Chinese)
[11]MENG Zhen-Zhi(蒙缜之).Advance in Research ofChemicalSubstances Induce Hyperlipemia ModelofRats [J].JournalofGuangxi Traditional Chinese Medical University(广西中医学院学报),2008,11(1):71-73.(in Chinese)
[12]YU Hua,SONG Yong-kang,YAO Qing-hua,et al(余 华,宋永康,姚清华,等).Nutrition composition of sweet potatoes of different colors[J].Fujian Journal of Agricultural Science(福建农业学报),2010,25(4):482-485.(in Chinese)