麻口皮子药总黄酮的提取及含量测定

陈 兴，张志国

(1.湖南省岳阳市一人民医院，湖南 岳阳 414000; 2.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007)

麻口皮子药总黄酮的提取及含量测定

陈 兴1，张志国2

(1.湖南省岳阳市一人民医院，湖南 岳阳 414000; 2.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007)

目的 比较麻口皮子药中总黄酮的不同提取方法并进行含量测定，为地方药材资源的合理开发利用提供实验依据。方法 以510 nm为检测波长测定吸光度，比较回流法提取、超声提取和浸渍法提取所得总黄酮的量。结果 回流法提取所得总黄酮量较多，对照品溶液质量浓度在 0.42 ～4.2 μg/mL 范围内与吸光度线性关系良好，回归方程 A=0.264 7 C+0.032，r=0.999 0(n=6);平均回收率为 97.53% ，RSD=1.85%(n=6)。结论 紫外分光光度法可用于麻口皮子药的质量控制。

紫外分光光度法;麻口皮子药;总黄酮;含量测定

麻口皮子药为芸香科植物柄果花椒 Zanthoxylum simulans Hance var.podocarpum(Hemsl.)Huang 的干燥干皮及枝皮，味辛、涩，性温，入肺、肝、脾三经，具有祛风散寒、活血止痛的功效，临床用于风寒湿痹、跌打损伤、蛇咬伤等，效果良好[1]。所含黄酮类化合物具多种生物活性，有抗溃疡、抗过敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病等作用。因麻口皮子药为地方药材，目前对其研究甚少[2－3]。笔者比较了3种方法提取麻口皮子药中总黄酮类化合物的优劣，并建立了含量测定方法，现报道如下。

1 仪器与试药

UV－2501 PC型紫外可见分光光度计(日本岛津);HH－S8型数显恒温水浴锅;电子分析天平;超声波清洗器。芦丁对照品(中国药品生物制品检定所);麻口皮子药(湖南振兴中药饮片有限公司);60%乙醇。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液制备

精密称取干燥至恒重的芦丁对照品4.2 mg，置10 mL量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品贮备液;精密吸取对照品贮备液1 mL，置10 mL量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，即得含芦丁42 μg/mL的对照品溶液。

2.2 供试品溶液制备[4]

2.2.1 回流法提取

精密称取样品1 g，加入6倍量的60%乙醇，回流提取2次，每次60 min，合并所得溶液，定容至100 mL，重复试验3次。

2.2.2 超声提取

精密称取样品1 g，加入6倍量的60%乙醇，超声提取2次，每次60 min，合并所得溶液，定容至100 mL，重复试验3次。

2.2.3 浸渍法提取

精密称取样品1 g，加入6倍量的60%乙醇，冷浸提取4次，每次60 min，合并所得溶液，定容至100 mL。重复试验3次。

2.3 吸收波长选择

取对照品溶液和供试品溶液各5 mL，进行全波长扫描，对照品溶液和供试品溶液在510 nm波长处均有最大吸收，因此选择510 nm作为检测波长。

2.4 统计分析

以SPSS 12.0统计软件，采用最小显著差数法对3种提取方法所得数据进行完全随机设计的方差分析，结果见表1和表2。表中结果表明，回流法提取所得总黄酮较多，3组数据多个样本均数两两比较，差异均有显著性意义(P＜0.05)。

表1 3种提取方法提取总黄酮的结果

表2 3种方法提取总黄酮方差分析结果

2.5 方法学考察

线性关系考察:精密量取对照品溶液 0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL，置 10 mL 容量瓶中，以乙醇为空白，于 510 nm 波长处测定吸光度。以质量浓度 C(g/mL)为横坐标、吸光度值 A为纵坐标作图。结果表明，对照品溶液质量浓度在0.42～4.2 μg/mL范围内与吸光度线性关系良好，回归方程 A=0.264 7 C+0.032，r=0.999 0(n=6)。

精密度试验:吸取同一质量浓度对照品溶液，连续测定6次，以吸光度值计算精密度。结果 RSD=1.46%(n=6)。

重复性试验:取同一批样品6份，按回流提取法制备溶液，测得总黄酮含量(以芦丁计)的 RSD为1.79%(n=6)，表明方法重复性较好。

稳定性试验:按回流提取法制备供试品溶液，精密吸取同一供试品溶液，于 0，4，8，12，24，48 h 时测定吸光度，RSD=1.51%(n=6)，表明供试品溶液在48 h内稳定。

加样回收试验:取已知含量(总黄酮含量为0.973 6%)的药材粉末6份，每份约0.1 g，精密称定，分别精密加入质量浓度为42 μg/mL的对照品溶液20，25，30 mL，按回流提取法操作，定容至100 mL，精密量取1 mL，转移至10 mL量瓶中，加水至刻度，作为供试品溶液，测定吸光度，计算回收率。结果见表3。

表3 加样回收试验结果(n=6)

2.6 样品含量测定

取3批样品，每批3份，每份约1 g。按回流提取法制备溶液，测定其含量，结果批号为090612，090915，091106的3批样品中，总黄酮平均含量分别为 1.004 6% ，1.071 3% ，0.973 6% ，RSD 分别为 1.26%，1.73%，1.84%(n=3)。

3 讨论

曾考察了不同浓度(30%，40%，50%，60%，70%，80%)的乙醇，结果用60%乙醇提取的总黄酮量较多，且溶液杂质较少，故采用 60%乙醇提取;还比较了不同提取时间(30，45，60，90 min)，结果提取60 min所得总黄酮量比提取30 min和45 min多，与提取90 min相差不大，从节省时间考虑，选择60 min作为提取时间。而回流提取、超声提取、浸渍法提取3种方法中，回流法提取所得总黄酮量较多，为1.124 2%。

[1]湖南省卫生厅.湖南中药材标准[M].长沙:湖南科学技术出版社，1993:304－307.

[2]陈 兴，张志国，黄开颜.麻口皮子药总黄酮醇提工艺研究[J].中南药学，2008，6(4):434－436.

[3]符明进，张绍梅.酸麻膏治疗婴幼儿湿疹临床观察[J].湖南中医学院学报，2005，25(1):40－48.

[4]马合木提·买买提明，海力茜·陶尔大洪，玛依拉，等.紫外分光光度法测定维药鹰嘴豆中总黄酮的含量[J].时珍国医国药，2007，18(4):889.

Extraction and Content Determination of Total Flavonoids in Cortex Zanthoxyli

Chen Xing1，Zhang Zhiguo2
(1.The First People’s Hospital of Yueyang，Yueyang，Hunan，China 414000;2.The First Affiliated Hospital， Hunan University of Traditional Chinese Medicine， Changsha， Hunan， China 410007)

Objective To compare different extraction and content determination methods of total flavonoids in Cortex Zanthoxyli，in order to provide experimental evidence for the rational application of local medicine resources.Methods The detection wavelength was 510 nm.To compare the volumes of total flavonoids extracted by using reflux extraction，ultrasonic extraction and impregnation extraction methods.Results The volume of total flavonoids extracted by reflux extraction was more than the others.The linear detection concentration range of total flavonoids was 0.42－4.2 μg/mL，and the regression equation was A=0.264 7 C+0.032， r=0.999 0(n=6).Conclusion The method can be used for the quality control of Cortex Zanthoxyli.

UV－spectrophotometry;Cortex Zanthoxyli;total flavonoids;content determination

TQ461;R284.1;R282.71

A

1006－4931(2011)05－0038－02

2010－04－07;

2010－09－02)

陈兴，男，硕士研究生，主管药师，主要从事医院药学工作，(电子信箱)chenxing19770812@163.com。