甲状腺显像患者的淋巴细胞中诱导放射性适应反应研究

李明浩

（延边大学附属医院核医学科，吉林 延吉 133000）

初始小剂量（＜20cGy）照射的人体淋巴细胞，在随后大剂量照射时其染色体的损伤比未曾经小剂量照射的人体淋巴细胞少。这个现象是适应反应的主要表现。适应反应主要是因[3H]thymidine[1-9]X-射线[3-9]或γ-射线[10]而诱导。Olivieri等[1]报道被小剂量[3H]thymidine照射过的人体淋巴细胞，当在受到大剂量照射时其染色体的损伤相对较少，Wang等[4]在末梢血进行20cGyX-射线后诱导了适应反应，随后虽然大剂量3Gy照射，其染色体的损伤相对较少。Tc-99m是核医学最常使用的甲状腺显像剂，常用剂量是5mCi这个程度的小剂量能否诱导适应反应，国内尚无详细的报道。研究中在甲状腺显像患者在注射Tc-99m前后各，采血后进行大剂量照射，通过细胞分裂中期染色体分析方法，查出异常染色体数目，进而判断在做骨显像的患者中适应反应的诱导。

1 对象与方法

1.1 对 象

21例甲状腺显像患者，男8例，女13例；平均年龄（45±14）岁；在注射甲状腺显像显像剂Tc-99m前后各，采血5mL进行培养。本研究是经过患者同意后才采血的，注射Tc-99m的剂量是5mCi。作为对照组选择了没有伴染色体异常的遗传病病史的健康成年人10例，男6例，女4例，平均年龄（43±7）岁。对照组，患者组分注射Tc-99m前采血组和注射Tc-99m后采血组，每组再分为放射性照射2Gy组和未照射组，分别查出异常染色体数目后做了比较分析。

1.2 培养及放射性照射

RPMI1640培养基6mL加15%小牛或胎牛血清1mL，青霉素、100unite/mL链霉素、100μg/mL和3%植物血球凝集素（PHA）溶液0.2mL（100μg/mL），然后再加0.5mL血后放置在37℃，5%CO2培养箱。

进行大剂量照射是在培养到第46h用Cs-137照射仪（central dose rate=654Gy/h，Gamamacell 3000 Elan，Nordion，Canada）进行2Gy照射。注射Tc-99m-MIBI后采血组中取一部分是在培养到第44h先加蛋白合成抑制剂cycloheximide10μg/mL培养，洗涤2次后在进行2Gy照射。

培养到第46h加20μg/mL秋水仙素溶液0.2mL使细胞停止在分裂相中期，获得染色体中期分裂组相将收集的细胞经过0.075mol氯化钾溶液低渗处理、用固定液[甲醇：冰醋酸=3∶1]固定、滴片，然后斜放静置，待其自然干燥再经过Giemsa stain solution溶液染色，最后进行镜检分析。

显微镜检查及计：染色体的标本在镜下100倍的倍率寻找核分裂中期细胞，放大到1000倍确认每个细胞都含有46个染色体后才观察.异常染色体主要观察了环状（rings）（R）有双中心的（dicentric）（D）染色体数计数的总染色体中异常染色体的比率命为异常染色体出现频率（Ydr）=（D+R）/total scored cells。

1.3 资料处理

用SPSS 10.0统计学软件对资料进行统计学处理，用t检验比较组织间差异，数据均以±s均数±标准偏差表示。

2 结 果

对照组和患者组未经放射性照射时异常染色体出现频率各为（0.05±0.02）和（0.06±0.04），二者无显著性差异（t=1.2，P＞0.05）。而注射Tc-99m 4h后查异常染色体出现频率为（0.07±0.03），与未经Tc-99m-MIBI注射者相比无明显增加（t=1.2，P＞0.05）（表1）。

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对照组和患者组单纯放射性照射2Gy时异常染色体出现频率各为（0.19±0.04）和（0.18±0.03），二者无显著性差异（t=1.4，P＞0.05）（表2）。

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Tc-99m-MIBI注射后放射性照射2Gy时异常染色体出现频率为（0.15±0.03），比单纯放射性照射2Gy时（0.18±0.03）明显减少（t=3.5，P＜0.01）（表2）。

Tc-99m注射后加蛋白合成抑制剂cycloheximide 10μg/mL培养进行2Gy照射时异常染色体出现频率为（0.19±0.02），明显高于未加cycloheximide时的（0.15±0.03）（t=5.1，P＜0.001），与Tc-99m注射前单纯放射性照射2Gy时（0.18±0.03）者相比无明显差异（t=1.5，P＞0.05）（表2）。

3 讨 论

甲状腺显像作为核医学科最常用的检查方法之一，为临床医师提供重要的情报。在本研究中探讨了甲状腺显像使用的显像剂Tc-99m所放射的射线，对人体淋巴细胞带来损害还是诱导适应反应产生有益的反应。利用做甲状腺显像患者的淋巴细胞，比较其检查前后，及大剂量照射前后的异常染色体数，来判断诱导放射性适应反应与否。结果Tc-99mI注射后放射性照射2Gy的异常染色体数较Tc-99m注射前放射性照射2Gy时明显减少，提示已诱导了适应反应，并且得到了诱导适应性反应过程有蛋白质参与的事实。也就是说，做甲状腺显像的患者没有受到因注射放射性药物引起的障碍反而诱导适应反应对将来的放射性障碍产生抵抗力量。在人体淋巴细胞低剂量放射线能诱导适应反应的事实起初是在1984年Olivieri等[1]报道被小剂量[3H]thymidine照射过的人体淋巴细胞，当在受到150cGy的X线照射时其染色体的损伤较单纯被150cGy的X线照射时其染色体的损伤相对较少。Shadley和Wolff等[9]也报道与单纯被150cGy的X线照射时时相比先经0.5～1cGy照射后再受到150cGy的X线照射时人体淋巴细胞染色体的损伤相对较少。

小剂量照射过的人体淋巴细胞，在随后大剂量照射时其染色体的损伤比未曾经小剂量照射的人体淋巴细胞少这种个现象是适应反应的主要表现。它是因诱导修补蛋白或防御蛋白而产生。Youngblom等[6]先照射1cGy X线照射后再行150cGy的X线照射确认适应反应的产生后使用蛋白合成抑制剂cycloheximide观察了适应反应的变化。结果小剂量照射后经过4～6h后再加cycloheximide不在产生适应反应了。也就是说在诱导适应反应的过程中有蛋白质参与，而这种蛋白质是在被小剂量照射后经过一定小时间隔后诱导。Cai等[8]报道在小剂量照射6h后再加cycloheximide结果，遇到大剂量照射时没有诱导适应反应。Shadley等[3]因为小剂量照射后4～6h之间产生DNA修补反应，所以小剂量照射4h后才能诱导适应反应。Ikushima等[11]报道小剂量照射后4h以前不能诱导适应反应。本研究中注射Tc-99m-MIBI后第46h进行了放射性照射2Gy，这为诱导适应反应提供了充分的时间，这也与适应反应维持三个细胞周期的Shanley等[9]的报道相符。

Shadley等[5]报道诱导适应反应X线照射的初始剂量要超高0.005Gy，其范围是0.005～0.2Gy而在本研究中初始剂量的范围小于此范围。但在本研究的初始剂量的照射方法是内照射，不能与初始剂量的照射方法是外照射时的诱导适应反应范围一致。Bai等[12]报道90Co γ-线0.005Gy一次照射不能诱导适应反应，但对同样的细胞进行0.005Gy两次照射时就能诱导适应反应，也就是说小剂量多次照射放射性累积产生适应反应，那么内照射时如本研究小剂量多次照射放射性累积可不能诱导适应反应是值得探讨的课题。初始小剂量照射而诱导适应反应的内容很多，但放射性核素显像后可否诱导适应，几乎没有报道。通过本研究我们了解到放射性核素甲状腺显像不仅不给患者带来放射性障碍反而诱导适应反应。进一步探讨上述效应的发生机制及其生物学意义将对辐射防护的理论和实践具有重要的价值。

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