黄杨宁对大鼠肝脏NO含量及Na+-K+-ATP酶活性的影响

梁 涛 瞿凌晨 许 立 吕高虹

南京中医药大学（江苏南京 210046）

黄杨宁对大鼠肝脏NO含量及Na+-K+-ATP酶活性的影响

梁 涛 瞿凌晨 许 立△吕高虹

南京中医药大学（江苏南京 210046）

目的 观察黄杨宁大鼠长期给药对肝脏NO含量及Na+-K+-ATP酶活性的影响。方法SD大鼠随机分为对照组、黄杨宁小（0.375mg/kg）、大（1.5mg/kg）剂量组，灌胃给药8周，采用酶标仪检测组织中NO和Na+-K+-ATP酶（Na+-K+-ATPase）含量。结果黄杨宁各剂量组肝组织NO含量和Na+-K+-ATPase活性与对照组比较，显著降低。结论黄杨宁对肝脏毒性可能与NO和Na+-K+-ATPase有关。

黄杨宁 一氧化氮 Na+-K+-ATP酶

△通信作者

黄杨宁具有祛风湿、行气活血的功效，临床主要用于气滞血瘀所致的胸痹心痛、脉结代、冠心病等。临床研究显示，黄杨宁对多种心律失常、心绞痛、冠心病、心功能不全等心血管疾病具有良好的疗效[1]。本实验通过黄杨宁长期给药，检测肝脏组织一氧化氮（NO）含量及 Na+-K+-ATP 酶（Na+-K+-ATPase）活性，探讨黄杨宁对大鼠肝脏的毒性与药效之间是否具有相关性。

1 材料与方法

1.1 试药与仪器 黄杨宁（南京小营制药厂，批号：20101107）。NO、Na+-K+-ATPase检测试剂盒由南京建成生物有限公司提供。XHF-D型匀浆机：宁波新芝生物科技股份有限公司；TD6001型电子天平：天津市天马仪器厂；LDZ5-2型离心机：北京医用离心机厂；DNM-9602A型酶标仪：北京艾普生物设备有限公司AMS（美森）-300型全自动生化分析仪。

1.2 实验动物 SD大鼠30只，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，动物证号SCXK（沪）：2007-0005。适应性喂养1周。

1.3 染毒方法 以蒸馏水作为溶剂，配制成不同质量浓度的黄杨宁溶液。将大鼠随机分为3组，每组10只：对照组灌胃蒸馏水、黄杨宁低剂量组灌胃黄杨宁溶液0.375mg/kg、黄杨宁高剂量组灌胃黄杨宁溶液1.5mg/kg。每周染毒，共8周，末次染毒48h后，乙醚麻醉，股静脉放血，脱椎处死，取肝脏备用。

1.4 标本采集与检测 取肝组织用生理盐水制成10%匀浆，取上清，分别按照NO试剂盒、Na+-K+-ATPase试剂盒的步骤测定组织中NO的含量及Na+-K+-ATPase活性。

2 结 果

黄杨高、低剂量灌胃给药8周后，肝组织NO含量及Na+-K+-ATPase活性与对照组比较，显著降低（P＜0.05或0.01）。

3 讨 论

黄杨宁主要有效成分系生物碱类的环维黄杨星D（Cyclovi-robuxine D）。研究报道显示黄杨宁具有加强心肌收缩力，强心的作用，但强心作用并不是通过细胞膜上的β2受体而发挥的，可能与抑制心肌细胞膜Na+-K+-ATPase活力有关[2]。并且有研究认为强心与抑制心肌细胞膜Na+-K+-ATPase的活力，促进心肌细胞外Ca2+内流和心肌细胞内Ca2+释放有关。同时已有研究发现黄杨宁长期给药会产生肝毒性，对肝功能有一定影响[3]。Na+-K+-ATPase的抑制会导致细胞内钠离子含量增加，通过钠钙交换，钙离子超载增加影响肝细胞的损伤[4]。本实验研究考察黄杨宁对肝脏的毒性是否通过抑制Na+-K+-ATPase，实验结果表明黄杨宁0.375、1.5mg/kg灌胃给药8周，对肝组织Na+-K+-ATPase的活力有抑制作用，推测黄杨宁的肝毒性可能与Na+-K+-ATPase，抑制能量代谢有相关性。同时黄杨宁已有药效学研究报道，其具有扩张血管，促进血液循环，与血管内皮细胞释放NO有关[5]，本实验研究探究黄杨宁长期给药对肝脏的NO含量是否影响，实验结果发现黄杨宁0.375g、1.5mg/kg给药8周，与对照组比较肝组织中NO的含量有显著下降，与药效结果相反，并且药物如果导致体内NO含量下降，会引起肝脏血管收缩，造成肝脏组织缺血缺氧性损伤，继而发生能量代谢紊乱及脂质过氧化损伤[6]。因此黄杨宁产生肝脏毒性可能与NO有关，具体原因有待进一步研究。

表1 各组肝组织中NO含量和Na+-K+-ATPase活性比较（±s）

表1 各组肝组织中NO含量和Na+-K+-ATPase活性比较（±s）

与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

对照组 10 0.56±0.11黄杨宁小剂量组 10 0.24±0.12**黄杨宁大剂量组 10 0.25±0.12**Na+-K+-ATPase（μmol/mg）4.37±1.91 1.94±0.74*1.17±0.81*组 别 n NO（μmol/g）

通过本实验研究发现黄杨宁药效与毒性之间具有一定相关性，但是否是黄杨宁产生肝毒性的决定和唯一因素，是否还有其他因素共同的参与，需要今后加大剂量继续深入研究。（本课题来源于江苏省中药药效与安全性评价重点实验室，编号：T09011）

[1]张开山，吴义元.黄杨宁片临床应用概述基层中药杂志[J].2000，14（4）：52.

[2]温业绍，周念辉，胡式冷，等.环维黄杨星D对心肌的正性肌力效应和细胞膜Na+-K+-ATPase活力的抑制作用 [J].生理学报，1982，34（3）：295.

[3]梁秉文，张朝位.黄杨宁与心脑血管疾病[M].北京：蓝天出版社，2000：202.

[4]宁宗，李贻奎，张荣利.甲基原薯蓣皂苷对心肌细胞内钙及ATP酶功能的影响及其机制酶功能的影响及其机制[J].中国中药杂志，2010，35（1）：80.

[5]Vacca G，Battaglia A，Brunelleschi S，et al.Hemodynamic effects of the intravenous administration of cyclorirobuxine D in anesthetized pigs[J].Life Sciences，1997，61（17）：255.

[6]候文艳，刘晓萍，叶芳.一氧化氮对肝脏的保护作用研究[J].临床医药实践杂志，2004，13（4）：261.

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1004-745X（2011）09-1442-02

2011-04-27）