适用创伤骨科外周血细胞复检规则的探讨

陈延演,刘 诚,张会英

(北京积水潭医院 检验科,北京 100035）

骨科患者,大部分由外伤,感染等因素引起外周血细胞数量和形态的应激变化,如使用通用的复检规则会造成假阳性标本的数量增加,为确保质量,我们参考“国际血液学41条复检规则”[1]和“XE-2100复检协作组”的23条复检规则[2]对创伤骨科的外周全血细胞复检规则进行探讨。

1 材料与方法

1.1 标本来源1050份血标本(840份用于筛选方案的效果评价,210份用于验证试验）来自创伤骨科、手外科、脊柱外科、矫形骨科、小儿骨科及其他科的骨伤患者,初诊标本508份,术后复诊标本542份。

1.2 仪器与试剂SYSMEX XE-2100全自动血细胞分析仪,原装配套试剂、校准物和质控物。按要求对仪器进行校准和每日进行严格的室内质量控制。OLYMPUS CX-21双筒显微镜;瑞氏染液。

1.3 检测方法所有标本于采血后30min至4 h用XE-2100自动进样模式检测,将检测报告备份存档。同时每份标本制备2张血涂片,瑞氏染色,由两名具有五年以上临检工作经验人员按中华人民共和国卫生行业标准的白细胞分类计数参考方法进行镜检[3]。

1.4 初定复检规则参考“国际血液学41条复检规则”和“XE-2100复检协作组”23条复检规则,根据我院骨科患者为主的特点,与临床医师讨论,初步制定血细胞复检规则(见表1）。

1.5 复检规则评估与改进方案应用人工镜检的结果对初定复检规则进行统计学评估,以镜检结果为金标准,评估初定复检规则对标本判断的真阳性率、假阳性率、真阴性率和假阴性率,并对以上各条规则进行统计学评价。其中真阳性定义为触发规则且镜检结果为阳性,假阳性定义为触发规则但镜检结果为阴性,真阴性定义为不触发规则且镜检结果为阴性,假阴性定义为不触发规则而镜检结果为阳性。并根据骨科患者的临床特点,对复检规则进行改进。

表1 初步制定血细胞复检规则

改进方案一:更改初定规则3、4、5条为,WBC＜3.0或 ＞30.0×109/L,PLT＜70或＞1000×109/L,HGB＜70g/L或＞180g/L

改进方案二:更改方案一11条为Neut%≥90%

改进方案三:更改方案二12条为Lym%≥50%(年龄＞8岁）

改进方案四:更改方案三19条为AL≥150(仪器无其他阳性）

改进方案五:更改方案四17条为IG≥140(仪器无其他阳性）

改进方案六:更改方案五17、19条为 IG≥160,AL≥160(仪器无其他阳性）

1.9统计方法:使用Excel软件进行统计分析。

2 结果

2.1 各方案评估应用840例仪器检测数据和显微镜人工镜检结果对初定复检规则及6个改进方案进行评估,并对其真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率以及复检率进行统计,见表2。

2.2 初定复检规则及改进方案假阳性及假阴性统计

2.2.1 假阳性 IG报警53例(6.31%）,假阳性34例(4.05%）。AL报警59例(7.02%）,假阳性57例(6.78%）。AL/BL报警20例(2.38%,6例同时有AL报警）,假阳性19例(2.26%）。BL报警 7例(0.83%,6例同时有IG和AL报警）,假阳性5例(0.6%）。血小板凝集报警9例(1.07%）,假阳性8例(0.95%）。

2.2.2 假阴性 中晚幼粒细胞镜检阳性34例(4.05%）,假阴性19例(2.26%）。镜检发现血小板凝集7例(0.83%）,假阴性6例(0.71%）。有核红细胞镜检阳性4例(0.48%）,假阴性4例(0.48%）。

2.3 复检规则的制定根据“国际血液学41条复检规则”、“XE-2100复检协作组”23条复检规则和6个改进方案,对840份标本进行数据统计分析,并结合初定复检规则在日常工作使用中发现的某些缺陷、创伤骨科特点和XE-2100的性能特点进行了反复研究,最终确定方案六为创伤骨科适用的外周全血细胞复检规则。

2.4 验证试验选用210例临床标本对该方案进行验证试验。结果为假阳性16例(7.62%）,假阴性10例(4.76%）,真阴性184例(87.62%）。满足假阴性＜5%的要求。

3 讨论

XE-2100能快速准确地对各种血细胞进行分类计数,甚至能对原始、幼稚细胞等非正常外周血细胞进行报警提示。但是与人工镜检相比,仍存在较高的假阳性报警。Bourner等[4]曾对4种型号的血细胞分析仪进行比较,结果发现XE-2100假阳性率最高。

随机抽取的840例标本均来自本院创伤骨科、手外科、脊柱外科、矫形骨科、小儿骨科及其他骨科创伤病房(除骨肿瘤科）,患者多以外伤、骨折、失血、感染或择期手术后再创伤为主。其外周血象多见白细胞和中性粒细胞的绝对增多[5]。但这现象多为一过性,是机体的一个正常反应。因此复检方案提高了白细胞计数和中性粒细胞分类上限。

此次异型淋巴细胞在镜检中多见,但多数未达到镜检阳性标准是规则中假阳性的主要组成部分。可能是因为淋巴细胞离体后因为容器、抗凝剂等外界刺激以及随着放置时间延长而发生活化[6],导致仪器报警。

单独BL报警一例,单独AL/BL报警14例,镜检均为阴性。我们在工作中也发现单独BL或AL/BL报警时未见人工镜检阳性。与李亚红等[7]报道相似。但因为出现原始细胞对于血液病诊断意义重大,故未删改,以保证不漏检原始细胞。

回顾近两年的血常规复查记录,发现在标本采集符合要求的前提下,血常规数据的复查结果均与初次检测结果相符。建议对WBC、HGB、PLT复查范围进行了相应的调整,在不降低结果可信度的情况下,减少复查标本数量。

国际血液学复检专家组认为5%是为保证患者检测结果安全性的最大可接受的假阴性率[8]。因此,在制定新复检规则的过程中,为了降低假阳性率和假阴性率我们修改了7个报警指标的临界值。对最后确定方案进行验证试验的结果显示,假阴性10例占4.76%,其中6例为血小板凝集,4例为镜检发现中性中幼粒细胞占1%,这与“XE-2100复检协作组”[2]所得结果相似。本次试验发现血小板凝集的假阳性率很高,李宝青等[9]也有相似发现。其可能的原因是当出现较多破碎的红细胞、白细胞或巨大血小板时,仪器容易出现血小板凝集报警。血小板凝集报警的假阴性率也很高,可能是因为血小板只有微小凝集且数量不多,大血小板计数和血小板体积分布宽度未达到一定的阈值,未达到仪器设置的报警限而不触发仪器报警。

综上所述,我们根据所用XE-2100血细胞分析仪的性能,结合创伤骨科的特点,不断完善复检规则。在保证假阴性率＜5%的情况下,降低了复检率,并且未发现白血病细胞漏检。因此本复检规则适用于创伤骨科的外周全血细胞分析。

[1]Barnes PW,McFadden SL,Machin S,et al.The international consensus group for hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis[J].Laboratory Hematology,2005,ll(2）:83.

[2]XE-2100血细胞分析复检标准制定协作组.Sysmex XE-2100自动血细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨[J].中华医学检验杂志,2008,31(7）:752.

[3]中华人民共和国卫生部.中华人民共和国卫生行业标准一细胞分类计数参考方法[M].北京:人民卫生出版杜,2005.

[4]Bourner G,Dhaliwal J,Sumner J.Perfor mance evaluation of the latest fully automated hematology analyzer in a large commercial laboratory setting:a 4-way,side-by-side study[J].Lab Hematol,2005,11:285.

[5]王鸿利,主编 血液学和血液学检验[M].第2版.北京:人民卫生出版社,1999,139-142.

[6]樊笑霞,吴 飞,王 凌,等.EDTA-K2对异型淋巴细胞检测的干扰[J].第二军医大学学报.2009,30(5）:595.

[7]李亚红,林志远,罗建伟.XE-2100血细胞分析仪白细胞报警功能的评价[J].实用医技杂志,2006,13(6）:936.

[8]卢兴勇,丛玉隆.应重视和提升传统血液形态学检验诊断水平[J].中华检验医学杂志,2006,29(6）:481.

[9]李宝青,叶映月,林 莉,等.Sysmex XE-2100计数血小板时出现QFlags报警提示的可靠性评价[J].临床检验杂志,2009,27(2）:158.