兽用抗菌药物耐药性监测计划的指导原则

黄秀梅，赵思俊，王 娟，孙晓亮，谭维泉，曲志娜

（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

药物虽然在维护人类及动物健康和福利方面发挥了重大的作用，但由于抗菌药物广泛使用所引发的耐药性问题也已成为危及食品安全、动物和人类健康的一个全球性问题。世界动物卫生组织（OIE）是一个负责改善全球动物健康状况的国际组织，近年来控制和解决动物源细菌耐药性问题成为其主要工作之一。早在1998年OIE就开始关注耐药性的检测和控制。2003年，OIE专门成立了“抗菌药物耐药性工作组”，针对抗菌药物的使用及其耐药性问题开展了系列工作，制定了兽用抗菌药物耐药性监测计划的指导原则。

1 监测目的

了解细菌耐药性发展趋势；发现新的耐药性机制；为人类和动物健康风险性评估提供足够的数据；为保障动物和人类健康相关措施的制定提供基础；为指导临床开具处方和谨慎使用抗菌药物提供资料。

2 监测内容和方式

各成员要对耐药性采取主动监测及监控，被动监测和监控只能提供辅助信息。主动监测须按采样计划主动采样，当不属于采样计划范围内的送检样本属被动监测范围。

要注意调查的系统性（包括统计学方法），常规采样和监测要包括农场、市场和屠宰场。要制定监测计划，确定采样动物源、群体数及采样量，并应查看兽医临床检验和实验室诊断记录。

3 抗菌药物耐药性监测计划的建立

3.1 总则

定期或持续地对动物源性、食品源性、环境源性和人源性耐药细菌流行变化规律进行监控，对遏制抗菌药物耐药性的传播和指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。应对食物链不同环节进行动物源性细菌监测，包括食品加工、包装和销售等各个环节。

3.2 采样原则

采样应按统计学方法进行，并应保证样品的代表性及采样方法的稳定性。采样应考虑以下因素：样品大小、样品来源（动物、食品、动物饲料）、动物种类、同种动物的不同类型（按年龄、生产类型分类）、相同类型的动物分类、动物的健康状况（健康或疾病）、随机样本（定向的、系统的）、样本的采集（动物粪便、屠体或食品）等等。

3.2.1 采样量 样品量应保证足够耐药菌的检出，但不宜过多以免造成资源浪费，具体见表1。

表 1 评估抗菌药物耐药性流行的样本量

3.2.2 样品来源

3.2.2.1 动物 OIE各成员国应考察本国的畜牧生产体系，经风险评估后，才能得出耐药性的严重性以及对动物和人类健康的影响。采样应该考虑牲畜类别，包括成年牛和犊牛、屠宰猪、肉鸡、产蛋鸡和/或其它家禽和鱼类。

3.2.2.2 食品和动物饲料 被污染的食物常被认为是将抗菌药物耐药性从动物传递给人类的主要途径。不同种类的蔬果可能暴露于家畜的粪尿或污水，污染动物源性耐药菌。动物饲料，包括进口饲料，也应在耐药性监测及监控计划范围内。

3.2.3 样品的收集 家畜采集粪便，家禽采集整个盲肠内容物。牛和猪，应采集至少5 g的粪便样才能保证细菌的分离。在屠宰场采集屠体样本，应提供屠宰方法，屠宰卫生条件和在屠宰过程中肉品污染粪便的程度等信息。在销售环节中采集样本能为消费者提供接触食品前耐药率变化的相关信息。现有的食品加工过程中微生物监测和“危害性分析及关键控制技术”（HACCP）计划，能为屠宰后对食物链进行耐药性监测及监控提供有用的样本。

3.2.4 细菌的分离 细菌菌株的分离和鉴定应遵循国际公认的操作规范。监测细菌的种类：a）动物源病原菌。对动物源性病原菌耐药性监测能为人类和动物健康提供保障，并能指导兽医临床合理使用药物。动物源性病原菌耐药性信息的获取，主要来自兽医诊断实验室对临床送检病料的分析。这些样本通常来源自严重感染或治疗失败导致的反复感染病例，提供的耐药信息可能有偏差。b）人兽共患病原菌。ⅰ）沙门氏菌。采集沙门氏菌样本包括牛、猪、鸡及其他家禽。具有重要流行病学的血清型，如伤寒和肠炎沙门氏菌，应该在监测范围。对其它血清型进行监测，应根据不同国家流行病学情况来选择。所有沙门氏菌分离菌应检测其血清型。如有必要，可也做菌株的噬菌体分型，分型应按国家级实验室的标准方法进行。ⅱ）弯曲杆菌。空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌作为共生菌，可从以上样本中分离。弯曲杆菌分离菌株应鉴定到种。推荐采用琼脂稀释法或微量肉汤稀释法用于弯曲杆菌药物敏感性检测。必须严格执行质量控制程序。ⅲ）肠出血性大肠埃希氏菌。肠出血性大肠埃希氏菌（EHEC），如O157血清型，对人有致病性，但对动物无致病性的菌株，也应在耐药性监测及监控计划范围内。c）共生菌。大肠杆菌和肠球菌是常见的共生菌。这些细菌常被认为是耐药基因的储库，可能将耐药基因传递给致病菌引起动物或人感染。这些菌易从健康动物体内和屠宰场分离获得，故对其进行耐药性监测具有重要意义，具体见表2。

表 2 耐药性监测和监控所涉及的动物源病原菌种类

3.2.5 菌株的保存 菌株的保存时间至少到调查报告完成时，最好能作永久保存。所有收集的菌株应按年份保存，以便开展回顾性调查。

3.2.6 药物敏感性试验抗菌药物的选择 人医和兽医临床使用的重要抗菌药物应是监测对象。然而，监测的抗菌药物种类选择要取决于该国的经济实力。

3.2.7 数据的记录及保存 定量记录药物敏感性试验结果。验证试验应按《陆生动物手册》（Terrestrial Manual）的1.1.6 章中有关抗菌药物敏感性试验方法进行。

3.2.8 结果的记录、存档及解释 a）由于所需保存的信息量大而复杂，获取信息时间不同，故应考虑建立数据库对相关资料进行保存。b）对原始数据（最初，无法解释的数据）保存是必要的。因为这些数据可以对出现的各种问题，包括将来可能出现的情况作出解释。c）不同系统（实验室自动记录数据的比较，以及将数据提交给耐药监测计划中心）间数据的交换需要有相关计算机系统的技术支持。实验结果应以定量记录方式收集保存到国家数据库。d）记录的内容包括：采样计划；采样日期；动物种类/牲畜分类 ；样品类型 ；采样目的；畜禽群或动物的地理分布；动物年龄。e）实验室提供的资料应包括以下信息：实验室的属性；菌株分离日期；出具报告的日期；细菌种类和其他相关的分类特性（如血清型、噬菌体分型、抗菌药物敏感实验结果/耐药表型）。f）报告包括耐药菌株所占的比例，包括药物敏感性判断折点值。g）在临床上，根据药敏判断折点值将细菌分为敏感、中敏及耐药菌。这些常被临床或药理学参考的折点值是各国各自制定的，在国家间是不同的。h）记录所使用的参考体系。i）为达到监测目的，首先要考虑的就是确定微生物敏感性判断折点值。折点值应依据被监测细菌MICs的分布范围或抑菌圈直径范围来确定。当使用微生物折点值进行耐药性判断时，只有确信耐药的细菌群是源自正常敏感细菌群时才可定义为耐药。j）必要时，应记录分离菌株的耐药表型（耐药谱）。

3.2.9 标准实验室和年度报告 a）各国应设立国家标准实验中心承担以下责职：协调耐药性监测及监控计划的相关事宜；在国家重要区域收集信息；撰写整个国家耐药性情况分析年度报告。b）国家标准实验中心有权获取以下内容：原始数据；可信和完整的试验结果，实验室间的校正；熟练水平试验结果；监测系统的组织结构信息；试验方法的相关信息。

编 译 自：Harmonisation of national antimicrobial resistance surveillance and monitoring programmes. OIE-Terrestrial Animal Health Code，2011，Chapter6.7.网 址 ：http://www.oie.int/index.php?id=169&L=0&htmfi le=chapitre_1.6.7.htm