生长激素在免疫中的作用①

吴瑕

(湖北师范学院体育学院 湖北 黄石 435002)

内分泌系统对免疫功能的调节越来越受到重视,生长激素的作用也越来越重要。笔者以NK细胞、白细胞介素(IL)-1A以及IL-2活性、肿瘤坏死因子(TNFA)的含量以及TNFA mRNA表达作为指标项目,观察去除垂体的大鼠以及生长激素缺乏症的患儿在生长激素治疗前后的免疫指标。

1 资料与方法

1.1 6周岁的大鼠,去除垂体后恢复10天,分为A、B、C三组,使用不同激素的替代治疗:

A组(11只):早上8时给每只大鼠腹腔注射60Mg氢化可的松,每只大鼠口服3Mg左旋甲状腺素,使用3次以后,晚上8时每只大鼠加用300mU的Bio-hGH,使用皮下注射的方式,使用8d。

B组(12只):早上8时给每只大鼠腹腔注射60Mg氢化可的松,每只大鼠口服3Mg左旋甲状腺素,使用10d。

C组(12只):早上8时给每只大鼠腹腔注射0.2mL的生理盐水。

对照组(12只):手术后恢复10d,早上以及晚上8点分别腹腔注射0.2mL的生理盐水,使用10d。

生长激素缺乏症患儿组:一共有11例,有7例患者的疗程小于6个月,患儿年龄最大为17岁,最小为10岁;骨龄最大为15岁,最小为5岁。对照组:20例正常儿童,8例女患儿,12例难患儿,最大年龄为8岁,最小为4岁。对生长激素缺乏症的患者进行治疗:每天0.1U/k的R-hGH,在每天晚上睡觉前一个小时大腿伸侧皮下注射。

1.2 方法

NK细胞活性测定:乳酸脱氢酶(LDH)释放法。IL-1A及IL-2活性的测定:四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法。TNFA含量测定:采用北京邦定公司提供的ELISA药盒检测,敏感度100pg/mL,批间、批内变异系数均在10%以内。TNFA mRNA表达测定:(1)肺巨噬细胞总RNA提取作;(2)TNFA探针制备:TNFA cDNA质粒用HindⅢ BamHⅠ酶切,回收650,750bp二个片段,同位素A-32P标记,过Sephadex G-50柱收集标记探针;(3)TNFA mRNA斑点杂交。

2 结果

去除垂体以后脾脏淋巴细胞数及脾脏NK细胞活性比对照组低,A组治疗后两者都明显升高,但是仍然比对照组低。C组IL-1活性明显降低,A组IL-1活性明显升高,对对照组无明显差异。C组IL-2活性明显降低,A组IL-2活性比C组明显增高。B组的上述指标均与C组相近。去垂体C组TNFA mRNA表达明显降低,B组TNFA mRNA表达与C组相仿,而A组TNFA mRNA表达明显增强,且表达程度与对照组相近。

本组采用R-hGH治疗疗程＞6月者共7例,其身高年生长速率达到11.0±2.8 cm。全组在治疗前NK细胞活性明显降低,经生长激素治疗3个月后,NK细胞恢复到正常水平;治疗前IL-1A及IL-2活性偏低,治疗后两者有逐步增高的趋势,但与治疗前相比,差异无显著意义。

3 讨论

生长激素可以恢复去除垂体后大鼠的TNFA的合成,效果与干扰素没有很大差异,而且在使用TNFA抗血清后,生长激素对巨噬细胞的毒活性的促使作用就完全消除,这说明生长激素对巨噬细胞的作用可能是由于TNF所介导的。本组的研究结果表明,生长激素的作用部位可能是在基因转录水平,但是这种作用的机制还不是很清楚。体外研究表明,生长激素不能够直接促进TNFA的合成。产生这种体内外差异的原因可能有:生长激素通过淋巴细胞促进干扰素的合成,影响了TNFA的合成;生长激素导致类胰岛素生长因子的合成以及释放;生长激素刺激巨噬细胞从而产生超氧化物,对TNFA的合成有促进作用。

[1]谢建新,顾岩,赵淑民,罗宝国,吴肇汉,左焕琛.GH和附加G1n肠外营养联合应用对短肠大鼠小肠黏膜上皮细胞分裂增殖能力的影响[J].复旦学报(医学版),2002(3).

[2]范志勇,王康宁,周定刚.EGF、G1n和pGRF基因质粒对早期断奶仔猪生产性能、免疫功能及相关激素水平的影响[J].畜牧兽医学报,2005(9).