血清胱抑素C测定在糖尿病肾病早期肾损伤中的检测价值

李晓琳

（天津医科大学代谢病医院检验科，天津300070）

据世界卫生组织预计，到2025年，糖尿病（DM）患者将达到3亿，其中2型糖尿病约占全部患者的85%~90%，它对患者的主要威胁之一就是肾脏损害，能阻止糖尿病和高血压肾功能早期损害的方法是早诊断、早治疗[1-2]。较多研究发现血清胱抑素C（serum cystain C，SCys-C）和尿微量白蛋白（UMA）是反映肾功能损害的敏感指标[3]。早期肾功能损害评价的直接指标是肾小球滤过率（GFR），而GFR的评估有赖于反映肾功能损害敏感的标志物。临床常检测血清肌酐（SCr）、尿微量白蛋白（UMA）、β2-微球蛋白（β2-MG）等来评估GFR，但它们都有一定的局限性，且不同程度地受一些肾内肾外因素的影响[4]。血清胱抑素C是近来发现的一个能较好反映肾小球滤过率的指标，较SCr、CCr等有更高的敏感性[5]，且不受年龄、性别影响，在小儿、老年、中老年中均适用。本文检测胱抑素C在2型糖尿病肾病(DN)患者血清中的动态变化，分析其对糖尿病肾病患者的早期诊断价值。

1 资料与方法

1.1 研究对象

1.1.1 对照组（NC组） 天津市公安医院健康体检者30人（男11人，女19人），年龄50~73岁（55.8±9.6），均经口服糖耐量试验（OGTT）及体格检查后排除糖尿病、血脂异常、高血压、心脑肝肾等疾病。

1.1.2 研究组（T2DM组） 天津医科大学代谢病医院2010年收治的符合WHO1999年的糖尿病诊断标准：即空腹血糖≥7.0 mmo1/L或餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L的糖尿病患者，共88例（男39例，女49例），年龄 38~81岁（60.1±9.3）。根据 24 h UMA定量将2型糖尿病患者分为3组：（1）单纯DM组（SDM 组）：UMA＜30 mg/24 h，共 31例（男 10例，女21例），年龄（60.4±7.2）岁；（2）早期 DN 组（EDN组）：UMA 30～300 mg/24 h，共 30例（男 15例，女15例），年龄（57.8±8.0）岁，排除其它因素和心衰、尿路感染、梗阻等；(3)临床期DN组（CDN组）：UMA＞300 mg/24 h，共 27例（男 14例，女 13例），年龄（63.7±11.7）岁，排除其它因素和心衰、尿路感染、梗阻等。

1.2 方法

1.2.1 标本处理 每位研究对象空腹10 h后清晨抽静脉血分离血清，于－20℃冰箱保存待测，留取晨起7:00至次日7:00内24 h尿，并集于一容器中，加入防腐剂，待检并同时记录身高、体重和尿量。

1.2.2 测定方法 血清Cys-C的检测采用乳胶颗粒增强散射免疫比浊法，血清β2-MG和24 h尿UMA的检测采用免疫比浊法，试剂均由北京九强生物技术公司提供，均以HITACHI日立7070全自动生化分析仪测定；SCr、尿肌酐（UCr）的检测采用酶法，使用罗氏公司试剂，由罗氏Modular P全自动生化分析仪测定；HbA1c的检测采用高效液相色谱法，用HLC-723 G7全自动糖化血红蛋白分析仪测定。所有检测项目的质量控制均符合卫生部、天津市以及室内质控要求。根据所有对象的SCr、UCr、24 h尿量、身高、体重计算内生肌酐清除率（CCr）。

1.3 统计学方法 数据资料采用均数±标准差描述。用SPSS 11.0软件进行多组间均数比较的方差分析、4组均数两两比较的q检验和Pearson相关分析。认为P＜0.05时有统计学差异，P＜0.01时差异显著。

2 结果

2.1 一般情况比较 NC组、SDM组、EDN组和CDN组4组间比较，性别、年龄无显著性差异；糖尿病各组空腹血糖、糖化血红蛋白均较对照组显著升高（P<0.01）（表 1）。

2.2 Cys-C 与 UMA、CCr、β2-MG、SCr的检测结果比较 NC组、SDM组、EDN组和CDN组4组间观察指标比较结果见表2。

表1 对照组与糖尿病各组患者一般情况的比较Tab 1 Comparison of general characteristics between control group and diabetic group patients

表2 对照组与糖尿病各组患者观察指标的比较Tab 2 Comparison of parameters between control group and diabetic group patients

NC组、SDM组、EDN组和CDN组4组间观察指标进行均数两两比较的q检验见表3。

2.3 Pearson相关分析 糖尿病患者血清Cys-C与SCr、β2-MG、UMA 呈正相关（P<0.01），相关系数分别为 0.837、0.581和 0.627；与 CCr呈负相关（P<0.01），相关系数为-0.539（P<0.01）。以血清Cys-C检测量为横坐标，分别以SCr、β2-MG、UMA和CCr检测含量为纵坐标做散点图进行比较，结果见图1。

表3 对照组与糖尿病各组间观察指标均数两两比较Tab 3 Pairwise comparison of clinical characteristics between control group and diabetic group patients

图1 血清Cys-C与SCr、β2-MG、UMA、CCr相关关系比较的散点图Fig 1 Scatter plot of correlation of serum Cys-C and SCr,β2-MG,UMA,CCr

3 讨论

Cys-C是一种分子质量为1.33 ku的小分子量的碱性蛋白质，能在大多数的有核细胞内以恒定速度转录和翻译，属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂第二大超家族,机体所有有核细胞都能稳定分泌，产生速率恒定。由于其分子量大于肌酐，且带正电荷，所以更易反应肾小球滤过膜通透性的早期变化，血中的胱抑素C可完全被肾小球滤过，在近曲小管被重吸收并被完全分解代谢，肾脏是清除循环胱抑素C的唯一器官，所以血清浓度主要由个体的GFR来决定，被认为是反映GFR比较理想的内源性标志物，是反映肾功能损伤较理想的指标[6]。同时Cys-C生成浓度稳定，各组织生成率不受年龄、性别、肿瘤、肌肉量及蛋白摄入量等的影响[7]。传统评价肾功能的方法有菊粉清除实验、CCr实验等，菊粉清除实验作为评价GFR的参考方法，但人体对菊粉有发热等副反应，不适合在临床上应用和推广，而CCr实验常作为临床上评价肾功能的常规方法，但内生肌酐清除率的检测需要病人留取24 h尿液及血液，分别检测其尿肌酐和血肌酐，然后体重及身高等参数计算内生肌酐清除率，且对少尿或无尿患者的应用受到一定限制，从留取标本到测定费时、繁琐。同时还受性别、食物结构等因素影响，应用起来很不方便。本研究应用PENIA法检测血清Cys-C，既无需接触同位素又可避免肌酐清除率检测过程的繁琐及不易正确留取标本而影响结果的可靠性，故方法简便、结果更为准确。

本研究选取常见的检测肾小球滤过功能的多项指标，以UMA分组，与正常组做对照，显示糖尿病患者当UMA还未达到30 mg/24 h时，血清Cys－C的升高已经有统计学意义（P＝0.01），而血清β2-MG、SCr和CCr仍正常，无显著差异。结果显示，在评估肾小球滤过功能时，血清Cys－C的敏感性高于UMA、血清 β2-MG、SCr和 CCr，与文献报道相一致[8]。

本实验对血清 Cys－C 与 SCr、β2-MG、CCr、UMA进行了相关性分析，结果发现血清Cys－C与SCr、β2-MG、CCr、UMA均具有很强的相关性，以血清Cys－C与β2-MG相关性最为密切，呈现显著正相关，由此说明血清Cys－C对2型糖尿病肾病早期有较高的诊断价值，能可靠地反映早期肾功能损害，在糖尿病肾病的早期诊断中具有指导意义。

综上所述，Cys-C较其他指标具有更高的敏感性和特异性，是目前较为理想的反映GFR的内源性标志物[9]。

［1］潘静，魏明竞.尿液微量白蛋白的研究近况[J].临床检验杂志，2003，21(5)：315

［2］万长春.孟泽.糖尿病肾病早期诊断的实验室研究进展[J].临床检验杂志，1998，16(3)：186

［3］吴忠毅,杨庆祥，沈来龙.尿液转铁蛋白用于糖尿病肾病的早期诊断[J].临床检验杂志，1994，12(3)：118

［4］李海霞，张春丽，徐国宾,等.健康人群血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与肌酐分布及其评价慢性肾脏病患者肾小球滤过功能的比较研究[J].中华检验医学杂志，2006，29(11):9704

［5］曾爱平，周仁芳，王焰兵.血清胱抑素C浓度判断肾小球滤过功能的应用评价[J].临床检验杂志，2002,20(3):159

［6］Villa P,Jimenez M,Soriano MC,et a1.Serum cystatin C concentration as a marker of acute renal dysfunction in critically ill patients[J].Crit Care,2005,9(2)：139

［7］Filler G，Bokenkamp A,Hofmann W,et a1.Cys C as a marker of GFR-history,indications,and future research[J].Clin Biochem,2005,38(1)：1

［8］祁金友.糖尿病患者血清中胱抑素C含量测定的临床意义[J].检验医学与临床，2007，4（1）：35

［9］林礼兴，雷焕英，林丽婷.血清胱抑素C测定对评价肾小球滤过功能的重要价值[J].临床和实验医学杂志，2006，5（7）：1010n