P16在宫颈病变中的检测及临床意义

西安市第二医院 (西安 710004)严 瑾

近代肿瘤分子生物学研究表明,宫颈癌的发生发展与 HPV感染有关,并由多种癌基因及抑癌基因共同参与,通过不同机制使原癌基因激活,抑癌基因失活,从而使细胞增殖和凋亡失调所致[1]。我们通过免疫组化 SP法探讨 P16在宫颈病变中的表达及临床意义。

资料与方法

1 一般资料 取我院与西北医院 2008～ 2009年宫颈活检和手术切除的宫颈标本 106例,所有病变均经病理证实,其中宫颈癌 23例,上皮内瘤变 63例(CINⅠ 20例,CINⅡ 18例,CINⅢ 25例),20例正常宫颈鳞状上皮作对照。患者年龄 24～ 61岁,平均年龄4.5岁。

2 方 法 标本经常规甲醛固定、脱水、石蜡包埋、切片,分别行常规病理检查和 P16染色,采用免疫组化 SP法。SP试剂盒及阳性对照片均购自福建迈新公司。

3 结果判定 免疫组化染色结果判断分别按阳性细胞百分数及染色强度计分。阳性细胞数为 0,计 0分;1%～25%计 1分;26%～50%计 2分;51%～75%计 3分;76%～100%计 4分。染色阴性计 0分;淡黄色计 1分;棕黄色计 2分;棕褐色计 3分;两种积分相加,积分为 0～ 1分,表示阴性(一);积分为 2～ 3分,表示阳性;积分为 4～ 5分,表示阳性 (++);积分为 6～ 7分,表示阳性 (+++)。

4 统计学分析 采用 SPSS 13.0统计软件处理,计数资料采用卡方检验。以 P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

P16蛋白在不同宫颈病变中阳性表达率的比较:P16蛋白在宫颈癌、CINⅢ级、CINⅡ级、CINⅠ级和正常宫颈中的阳性表达率分别为 91.3%、88%、83.3%、55%、55%,P16蛋白在宫颈癌、CINⅢ级与 CINⅠ级中的表达差异具有统计学意义(P＜0.05);在 P16蛋白在宫颈癌、CINⅢ级、CINⅡ级、CINⅠ级与正常宫颈中的表达差异也具有统计学意义(P＜0.05),见附表。

附表 P16蛋白在不同程度宫颈病变中阳性表达率的比较

讨 论

P16基因是人们发现的第一个直接作用于细胞周期,抑制细胞分裂的基因[2]。P16基因又称细胞周期依赖性激酶(CDK),定位于人染色体 9p21,编码由 148个氨基酸组成的核结合蛋白,P16蛋白与细胞周期蛋白 D1(Cyclin D1)竞争,特异性结合 CDK4或 CDK6而抑制其活性,组织细胞进入 G1/S期,无限制扩增向肿瘤发展和转化,从而达到抑癌作用。P16的突变和缺失广泛存在于人类肿瘤中,且其低表达与肿瘤的病理分级、肿瘤分级及预后有关[3]。目前国内外学者对 P16蛋白与宫颈癌的研究较多,认为 P16蛋白在宫颈癌中的表达较高,而在非癌组织中的表达较低,表明 P16蛋白与宫颈癌的发生可能有关[4]。研究表明 P161NK4A基因及其产物在大多数原发性肿瘤细胞中缺失,而却在 100%的 CINⅢ和宫颈癌中过表达。文献报道高危HPV可诱导 P16蛋白过表达,在 HPV相关的宫颈癌及其癌前病变的发生发展过程中,HPV的 E7致瘤蛋白能特异性地包裹并使 pRb失活,P161NK4A与 pRb的反馈调节被破坏,pRb的失活不能有效抑制 P161NK4A的聚集,导致细胞中肿瘤抑制因子 P161NK4A表达增加,然而过度表达的 P161NK4A,由于 P161NK4A-pRb反馈环的破坏,不能正常发挥肿瘤抑制功能,细胞呈现持续增值状态,最终发生瘤变。本研究结果显示,P16蛋白在宫颈癌、CINⅢ级、CINⅡ级、CINⅠ级和正常宫颈中的阳性表达率分别为 91.3%、88%、83.3%、55%,P16蛋白在宫颈癌与 CINⅠ级、CINⅢ级与 CINⅠ级中的表达差异具有统计学意(P＜0.05);在宫颈癌与正常宫颈、CIN与正常宫颈中的表达差异也具有统计学意义(P＜0.05);P16在宫颈癌和 CIN中的表达均显著高于正常宫颈,并且随着宫颈病变程度的加重P16的表达强度和阳性表达率不断升高,P16蛋白与宫颈癌及 CIN病变程度和进展可能有关,提示 P16蛋白有可能用于鉴别宫颈不典型增生,筛查出需要早期治疗的高危患者,并监测宫颈病变的发生发展。

综上所述,宫颈癌是从宫颈上皮内瘤变到浸润性癌的一个由量变到质变的连续发展的过程,其中宫颈轻度上皮内瘤变是可逆性的,因此我们选择合适的标记物对宫颈 CIN早期有效的筛查,以减少宫颈癌的发生。P16蛋白在宫颈癌及其癌前病变中过表达,并且随着宫颈病变程度的加重 P16的表达强度和阳性表达率不断升高,提示 P16蛋白与宫颈癌及其癌前病变关系密切,可作为宫颈癌及其癌前病变早期诊断的标记物。

[1]黄海萍,叶学正.p53、P16在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及意义探讨 [J].肿瘤与治疗,2008,21(2):136-139.

[2]邓 飞,胡新荣.P16与宫颈癌 [J].现代肿瘤医学,2006,14(3):500-502.

[3]方 艳,吴宏培.P16和 HSP70在原发性肺癌中的表达及其临床意义 [J].陕西医学杂志,2009,38(11):1515-1516.

[4]江 涛,李隆玉.P16在宫颈癌组织中的表达及其意义[J].实用癌症杂志,2005,11(20):581-587.