自身抗体联合检测在自身免疫性肝病诊断中的临床意义

肖红霞

自身免疫性肝病是一类原因不明的慢性肝病，根据其临床表现、生化、免疫学、影像学和组织病理学特点，分为自身免疫性肝炎(autoimmue hepatitis，AIH)、原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)、原发性硬化性胆管炎(primary sclerosing cholangitis，PSC)等。自身免疫性肝病无特征性病症，目前缺乏明确的诊断标准。但由于此类疾病是特异性或非特异性自身抗原刺激机体引起肝组织的损伤，血清中常出现相关的自身抗体。因此，这些自身抗体的实验室检查对此类疾病的诊断尤为重要。本资料用酶联免疫吸附法和免疫印迹法分别检测自身免疫性肝病和慢性病毒性肝炎患者血清中的自身抗体，探讨两类疾病之间自身抗体的差异性及临床意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象

按诊断标准收集2009年7月至2011年7月山西省中医门诊及住院的自身免疫性肝病患者27例，其中AIH患者16例，PBC患者9例，PSC患者2例;慢性病毒性肝炎患者45例，其中慢性乙型肝炎(HBV)25例，慢性丙型肝炎(HCV)20例。另外随机收集20例健康体检人员为正常对照。

1.2 方法

用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测抗核抗体(ANA)，试剂由德国IMTEC公司提供。用免疫印迹法检测抗肝抗原抗体谱，试剂由德国IMTEC公司提供。抗肝抗原抗体谱包括:抗线粒体抗体(AMA-M2)、抗肝肾微粒体抗体Ⅰ型(LKM-1)、抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原抗体(SLA/LP)、抗多核点抗体(Sp100)、跨膜糖蛋白210kd抗体(gp-210)、抗肝细胞浆Ⅰ型抗原抗体(LC1)。

1.3 统计学处理

应用SPSS11.5统计学软件进行处理，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ANA的检测结果

AIH患者血清ANA检出阳性率最高，病毒性肝炎组ANA阳性检出率较低;AIH组、PBC组和PSC组分别与HBV组、HCV组及正常对照组比较(χ2检验)，均P＜0.05，差异有统计学意义。见表1。因此推断，检测ANA对自身免疫性肝病有诊断意义。

表1 各组ANA的检测结果

2.2 抗肝抗原抗体谱检测结果

AIH组的SLA/LP和LKM-1抗体阳性检出率较高，为62.5%、37.5%，分别与 HBV组和 HCV组的SLA/LP和LKM-1抗体阳性检出率比较，均P＜0.05，差异有统计学意义。PBC组AMA-M2和 gp-210抗体的阳性检出率最高，为88.9%和55.6%，分别与HBV组和HCV组的AMA-M2和gp-210抗体的阳性检出率比较，均P＜0.05，差异有统计学意义。PSC组有1例检出AMA-M2抗体阳性。在诊断明确的20例HCV中检出1例抗LKM-1抗体阳性。见表2。

表2 各组抗肝抗原抗体谱检测结果 例

3 讨论

自身免疫性肝病是机体自身免疫反应过度造成的肝组织损伤。出现肝功能异常及相应症状体征的一组慢性肝脏疾病，包括由肝细胞受累的自身免疫性肝炎和主要因肝内、肝外胆管细胞受累的原发性胆汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎。我国是慢性肝炎的高发区，以病毒性肝炎为主，但近年来自身免疫性肝病有升高的趋势。自身免疫性肝病的特点是，在肝脏出现病理性炎症损伤的同时，血中伴有特征性与肝脏相关的循环自身抗体。检测自身抗体已成为自身免疫性肝病诊断和鉴别诊断的重要手段[1]。

本研究结果显示，AIH组的ANA检出率最高，为87.5%，其次PBC组为66.7%，PSC组因标本量少不易比较。ANA是细胞内所有核抗原成分的自身抗体总称，其靶抗原包括细胞核、细胞浆、细胞骨架和细胞分裂周期蛋白等。ANA是AIH患者血清中最先被发现的自身抗体，至今仍是诊断AIH敏感性最高的标志性抗体[2]。ANA不具有疾病特异性，本研究表明在其他自身免疫性疾病、慢性病毒性肝炎，甚至有报道称健康老年人群中亦可有阳性表现[3]。自身免疫性肝病组(包括AIH组、PBC组和PSC组)ANA检出率明显高于慢性病毒性肝炎组(包括HBV组、HCV组)和健康对照组，因此我们认为，通过检测ANA将有助于自身免疫性肝病的鉴别诊断。

研究中自身免疫性肝病患者检出AMA-M2，LKM-1，SLA/LP，Sp100，gp-210和 LC1抗体阳性率均明显高于病毒性肝病患者，特别是自身免疫性肝病特异性LC-l抗体在病毒性肝病患者血清中未出现。血清检测中，AIH患者主要以 SLA/LP(62.5%)和 LKM-1(37.5%)抗体阳性检出率较高。抗SLA/LP抗体是肝细胞浆内的一种可溶性蛋白[4]，我们研究的非AIH组患者SLA/LP基本为阴性，故抗SLA/LP抗体检测对AIH具有较高特异性，可以作为AIH的血清学参考指标。

本研究中9例PBC患者AMA-M2的阳性检出率最高，为88.9%，略低于国内学者的报道[5]。另外，PBC患者gp-210抗体的阳性检出率较高，为55.6%，而其他自身免疫性肝病组和慢性病毒性肝炎组gp-210抗体为阴性，故gp-210抗体对PBC的诊断具有高度特异性。本地区PSC发病较少，收集的病例中只有1例AMA-M2抗体为阳性，无法判断其敏感性和特异性，随着研究的深入，我们将对PSC的自身抗体检测做进一步探讨。病毒性肝炎中也检出一定量的自身抗体，但检出阳性率较低。需要强调的是在诊断明确的20例HCV中检出1例抗LKM-1抗体阳性，提示抗LKM-1抗体和HCV存在交叉免疫现象。这提示临床抗病毒治疗时要注意，对抗LKM-1抗体阳性的HCV患者慎用干扰素，以防产生严重的后果。

综上所述，ANA和抗肝抗原抗体在自身免疫性肝病的诊断中占重要地位。自身抗体在不同的肝病中存在差异性表达，早期通过联合检测自身抗体有助于正确诊断和鉴别诊断，对指导治疗和预后有一定作用。

[1] 贾继尔.自身抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的应用[J].中华检验医学杂志，2003，26(2):120-122.

[2] Pietro Invernizzi，Ana Lleo，Mauro Podda.Interpreting Serological Test in Diagnosing Autoimmune LiveRDiseases[J].Semin LiveRDis，2007，27:161-172.

[3] Lyons R，Narain S，Nichols C，et al.Effective Use of Autoantibody Tests in the Diagnosis of Systemic Autoimmune Disease[J].Ann NY Acad Sci，2005，1050:217-228.

[4] Wies I，BrunneRS，HenningeRJ，et al.Identification of Target Antigen foRSLA/LP Autoantibodies in Autoimmune Hepatitis[J].Lancet，2000，355:1510-1515.

[5] 张利方，阎有功，周 萍.原发性胆汁性肝硬化患者自身抗体检测及其临床意义[J].临床内科杂志，2008，25(9):67-629.