注射用头孢地嗪钠含量测定的不确定度分析*

曹立全

(天津市药品检验所，天津 300070)

随着《实验室资质认定评审准则》于2007年1月1日的实施，通过相关资质认定的各级药品检验机构均建立了新的质量体系。根据质量体系运行的要求，各实验室应建立有关测量不确定度的程序文件，以评价检测结果的准确性和可靠性。根据JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》中的有关规定，参考相关文献资料[1，2]，结合日常的检验工作，对注射用头孢地嗪钠的含量测定结果进行测量不确定度评估，为评价检测报告提供科学依据。

1 实验部分

1.1仪器与试药 岛津LC-2010C高效液相色谱仪；shimadzu CLASS-VP工作站；色谱柱:Agilent C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；梅特勒AG-245电子天平(瑞士，十万分之一)。头孢地嗪对照品(中国药品生物制品检定所提供，含量88.6%，批号130520-200501)；注射用头孢地嗪钠(规格0.5 g，批号523240)；乙腈为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

1.2色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐乙腈溶液(取磷酸二氢钾0.8 g，无水磷酸氢二钠0.2 g溶于水，加入80 ml乙腈，用水稀释至1 000 ml)为流动相；检测波长为254 nm；柱温40 ℃；流速1.0 ml/min；进样量10 μl。

1.3溶液的制备

1.3.1对照品溶液 精密称取头孢地嗪对照品28.31和28.92 mg，分别置50 ml量瓶中，加水适量使溶解并定容至刻度，摇匀。

1.3.2供试品溶液 精密称取平均装量项下注射用头孢地嗪钠27.62和27.37 mg，分别置50 ml量瓶中，加水适量使溶解并定容至刻度，摇匀。

2 不确定度的分析与评定

2.1识别不确定度来源 主要有对照品与供试品溶液峰面积响应值、对照品与供试品的称量与稀释、对照品纯度、供试品平均装量等。

2.2建立数学模型

2.3分析并计算不确定度分量

2.3.1对照品引入的相对标准不确定度urel(S)

对照品称样2份，分别为28.31和28.92 mg，则对照品称样的相对标准不确定度

urel(Sm)

urel(ρ)

=0.029/88.6=3.3×10-4。

合并以上两个分量，则

urel(Sm)

=7.2×10-4。

=5.4×10-4。

2.3.1.3对照品溶液峰面积引入的不确定度urel(SV) 该不确定度的产生主要由重复进样所引起，由仪器给出的进样峰面积标准偏差为随机测量，属于A类不确定度。2份对照品分别进样5次和2次，用极差法分别计算其标准不确定度，重复测量的峰面积平均值为8 760 915和8 946 170，极差R1为23 077，R2为7 891，当n=5时极差系数C1=2.33，则标准不确定度u(SA1)=R1/C1=23 077/2.33=9 904；当n=2时极差系数C2=1.13，则标准不确定度u(SA2)=R2/C2=7 891/1.13=6 983；则相对标准不确定度

urel(SA)

=1.4×10-3。

2.3.1.4对照品的相对标准不确定度urel(S)

urel(S)

=1.7×10-3

2.3.2供试品引入的相对标准不确定度urel(T)

2.3.2.1供试品称量引入的相对标准不确定度urel(Tm) 主要来源于供试品称量和平均装量。根据“2.3.1.1”项下所述u(m)=1.3×10-2。供试品称样2份，分别为27.62和27.37 mg，则供试品称样的相对标准不确定度

urel(Tm)

=6.7×10-4供试品平均装量为0.541 2 g，其标准偏差为2.3×10-3，按A类评定中合并样本标准差计算，则供试品平均装量的相对标准不确定度为

urel(Tm)

=2.0×10-3。

2.3.2.2供试品稀释引入的相对标准不确定度urel(TV) 同“2.3.1.2”项下，则urel(TV)=5.4×10-4。

2.3.2.3供试品溶液峰面积引入的不确定度urel(TA) 含量测定时，2份供试品溶液分别进样2次，用极差法分别计算其标准不确定度，重复测量的峰面积平均值为9 013 947和8 941 016，极差R1为10 286，R2为3 080，当n=2时极差系数C=1.13，则标准不确定度

urel(TA1)=R1/C=10 286/1.13=9 103，

urel(TA2)=R2/C=3 080/1.13=2 726；则相对标准不确定度

urel(TA)

=1.1×10-3。

2.3.2.4供试品的相对标准不确定度urel(T)

urel(T)

=3.2×10-3。

2.3.3计算合成相对标准不确定度urel(X) 供试品含量测定结果P为101.20%，urel(X)是由对照品引入的相对标准不确定度urel(S)和供试品引入的相对标准不确定度urel(T)所构成，故

urel(X)

=0.37%

2.3.4计算扩展不确定度 按95%置信概率，取包含因子k=2，则U95=0.37%×2=0.74%。

2.3.5测量不确定度报告 本次实验注射用头孢地嗪钠的含量为(101.20±0.74)%。

3 讨论

3.1测量不确定度是定量说明检测结果的质量的一个参数，检测结果的可靠性很大程度上取决于其不确定度的大小，测量结果附有不确定度说明才是完整及有意义的。在本次实验中，测量不确定度主要来源于供试品的称量，供试品和对照品色谱峰面积次之，因此，在实验中降低称量步骤，加强对仪器的保养以及标准操作的训练，采用合理的取样方式，就可以减少人为因素对实验结果的影响。

3.2在测量不确定度的实验方案设计和评定过程中，要尽可能接近日常检验工作的实际情况，在本次评定注射用头孢地嗪钠含量测定的不确定度时，即采用了平行实验的日常检验模式，测量结果为(101.20±0.74)%，测量结果的扩展不确定度U95=0.74%，真实地反映了实验室日常检验结果的水平。

1 申安.HPLC法测定头孢氨苄胶囊含量的测量不确定度评定.药物分析杂志，2009，29(8)：1384

2 倪育才.实用测量不确定度评定.北京:中国计量出版社,2004：25